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杭州高通量转录组学定性分析

来源: 发布时间:2022-01-08

RNA-Seq转录组学技术优势:相比基因芯片和标记的碱基序列的测序方法,RNA-seq具有一定的优越性。与基因芯片相比,RNA-Seq不只可以在更高的分辨率下用来测量基因的表达水平情况,还可以揭示未知的转录组和拼接亚型,并为选择性拼接亚型提供定量分析。相对于传统的芯片杂交平台,转录组测序无需预先针对已知序列设计探针,即可对任意物种的整体转录活动进行检测,提供更精确的数字化信号、更高的检测通量以及更普遍的检测范围,是目前深入研究复杂性转录组的强大工具。鉴于这些优势,RNA-Seq很快就被应用到关于瘤病相关研究的多个方面。转录组学能够同时鉴定和定量稀有转录本和正常转录本。杭州高通量转录组学定性分析

RNA-Seq,是基于新一代测序技术的转录组学研究方法:首先提取生物样品的全部转录的RNA并进行mRNA富集,然后反转录为cDNA后进行的新一代高通量测序,在此基础上进行片段的拼接组装,从而可得到一个个的转录本,进而可以形成对该生物样品当前发育状态的基因表达状况的全局了解。不同阶段或部位的生物样品的RNA-Seq转录组进行比较分析,则可以在转录层面得到基因表达水平的变化,针对关键基因则可以进行代谢通路(Pathway)的构建。转录组学即特定细胞在某一功能状态下转录出来的所有RNA的总和,包括mRNA和非编码RNA。南京IncRNA转录组学研究转录组学可以对任意物种进行全基因组分析。

转录组学:转录组学是研究特定的细胞、组织或个体在特定时间和状态下所转录出所有RNA的学科,转录组测序是指利用高通量测序方法,研究特定的细胞、组织或个体在特定时间和状态下所转录出的所有mRNA,用于揭示不同功能状态下的基因表达、结构的差异,阐明分子机制。应用领域:医学研究:疾病标志物筛查、疾病的诊断和分型、疾病复发诊断、病因与病理机制探究、临床疗效评价、药物毒理学评价。生命科学研究:非生物环境关系研究、植物与微生物、在表型鉴定中的应用、代谢途径及功能基因组研究、药用植物研究中的应用。

circRNA转录组学成环机制:circRNA环化方式分为内含子环化和外显子环化。目前主流的成环机制可归类为:依赖于剪切体的索尾插接环化。在mRNA前体上,通过连续的组装小核核糖体蛋白从而催化外显子下游的5′供体的位点连接到上游的3′受体的位点,索尾插接形成环化,然后通过剪切形成circRNA。顺式作用元件促进circRNA形成。部分circRNA外显子两侧的内含子中含有反向互补序列,首先在剪切位点上并排形成RNA双链体,再通过可变剪切形成带内含子和不带内含子两种不同的circRNA。或者外显子内部以及两侧的内含子可以竞争进行RNA配对,然后通过可变剪切形成不同类型的circRNA。普通转录组测序主要适用于不同的生长阶段或者发育过程。

RNA-Seq转录组学技术优势:RNA-seq技术可以检测到低水平表达、未识别的转录子和新拼接亚型基因。另一方面,与基因芯片相比,RNA-Seq有一个更广的检测动态范围,可以研究编码和非编码RNA,更易于基因网络的构建、发现选择性剪切转录物,检测到等位基因的具体表达方式,也可以用来提取基因型信息。在RNA-Seq单细胞研究中,一个主要优势是可以分析整个转录序列,而不是有限制数量的基因,并且,研究DNA和RNA的方法并不是相互排斥的,他们可以相互结合使用,产生更多的生物学上重要的信息。转录组学狭义上指所有mRNA的组合。山东mRNA-seq转录组学技术分析

转录组具有时间特异性的特点。杭州高通量转录组学定性分析

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