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贵州Label free非标记定量蛋白质组学应用

来源: 发布时间:2022-05-11

蛋白质组学概念:蛋白质组学(英语:proteomics,又译作蛋白质体学),是以蛋白质组为研究对象,研究细胞、组织或生物体蛋白质组成及其变化规律的科学。蛋白质组(Proteome)一词,源于蛋白质(protein)与基因组(genome)两个词的组合,意指“一种基因组所表达的全套蛋白质”,即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质。蛋白质组学本质上指的是在大规模水平上研究蛋白质的特征,包括蛋白质的表达水平,翻译后的修饰,蛋白与蛋白相互作用等,由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生,细胞代谢等过程的整体而全方面的认识。近两年来蛋白质组研究技术已被应用到各种生命科学领域,如细胞生物学、神经生物学等。贵州Label free非标记定量蛋白质组学应用

蛋白质组学技术:等电聚焦:等电聚焦(isoelectricfocusing,IEF)是一种利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。等电聚焦凝胶电泳依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸,在电场中形成正极为酸性,负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷,因此可以在电场中移动;当蛋白质迁移至其等电点位置时,其静电荷数为零,在电场中不再移动,据此将蛋白质分离。贵州Label free非标记定量蛋白质组学应用蛋白质组学技术在农业生物科研领域的应用为作物生长发育、病虫害防治、遗传育种、等方面发挥重要的作用。

iTRAQ/TMT 标记定量蛋白质组学:iTRAQ 和 TMT 技术采用多种同位素标记,可与氨基反应实现连接,实现多个样本蛋白组的定性与定量。技术优点:适用范围广、高通量、结果可靠。灵敏度高,分离能力强,自动化程度高。 Label Free 非标记定量蛋白质组学:Label Free 技术不依赖同位素标记,可通过液质联用对蛋白质酶解肽段进行分析,分析大规模鉴定蛋白质时所产生的质谱数据,对被检测到的离子峰强度进行积分,以积分面积进行相对定量。蛋白质组学,指对某一基因组所表达的所有蛋白质及其特征进行大规模、系统化地研究,以期望在蛋白质水平上解释控制复杂的生命活动的分子网络。

蛋白质组研究:蛋白质组研究是指系统研究在某一特定时间、特定条件下,某一种特定组织中的所有蛋白质。对蛋白质的研究也不只是局限于蛋白质的氨基酸序列,而是包括了蛋白质的表达量,蛋白质活性,被修饰的状况以及和其他蛋白质或分子的相互作用情况、亚细胞定位和三维结构。这些信息对于全方面了解复杂的生物系统有着重要的意义。因此,蛋白质组学研究目标是大规模、系统化地研究蛋白质的特性,以期望在蛋白质水平上解释控制复杂的生命活动的分子网络。蛋白质组学研究不只是探索生命奥秘的必须工作,也能为人类健康事业带来巨大的利益。

蛋白质组学技术有什么?双向凝胶电泳:双向凝胶电泳的原理是第1向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。由于双向电泳技术在蛋白质组与医学研究中所处的重要位置,它可用于蛋白质转录及转录后修饰研究,蛋白质组的比较和蛋白质间的相互作用,细胞分化凋亡研究,致病机制及耐药机制的研究,疗效监测,新药开发,研究,蛋白纯度检查,小量蛋白纯化,新替代疫苗的研制等许多方面。近年来经过多方面改进已成为研究蛋白质组的比较有使用价值的关键方法。样本测到的蛋白种类跟数据库和样本本身蛋白浓度有关,一般数据库越大,可以鉴定到的蛋白质数量越多。济南PRM靶向定量蛋白质组学价格

蛋白质组学在应用中,更多地用于提供高通量蛋白质定性定量信息。贵州Label free非标记定量蛋白质组学应用

蛋白组学技术:质谱技术相较于传统蛋白质鉴定技术而言,拥有灵敏、准确、高通量、自动化等特点。质谱鉴定蛋白质的基本原理是先将样品分子离子化,然后根据不同离子之间的质荷比差异来分离并确定蛋白质的相对分子质量。根据蛋白质酶解后所得到的肽质量指纹图谱、肽序列标签、和肽阶梯序列去检索蛋白质或核酸序列数据库,质谱技术可达到对蛋白质的快速鉴定和高通量筛选。因产生离子的方法不同而发展起来的质谱包括基质辅助激光解吸离子化质谱、电喷雾离子化质谱、表面增强激光解吸离子化质谱等。贵州Label free非标记定量蛋白质组学应用

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