蛋白质修饰位点分析:基于LC-MS/MS分析能够精确测定蛋白质或多肽分子质量这一特性,从而检测蛋白质或者多肽上位点发生何种修饰。可检测修饰类型如下: 磷酸化、糖基化、乙酰化、泛素化、丙酰化、丁酰化、丙二酰化、戊二酰化、琥珀酰化、单甲基化、二甲基化、三甲基化。1、磷酸化:信号转导、细胞周期、生长发育机理等;2、糖基化:蛋白质折叠、更新以及免疫应答等;3、乙酰化:基因表达调控、细胞凋亡、细胞代谢、蛋白质稳定性以及神经退行性的病变等;4、泛素化:细胞周期、细胞凋亡、转录调控、DNA修复以及信号转导等;5、甲基化:染色质结构及转录调控等;6、丙酰化 / 丙二酰化 / 戊二酰化 / 琥珀酰化:主要存在于线粒体和细菌中,与代谢过程密切相关。乙酰化修饰是体内保守的可逆转的蛋白修饰。贵州蛋白质乙酰化修饰组学分析
蛋白质学组翻译后修饰分析:组蛋白是一类高度保守的蛋白质,是染色质的关键成分,是DNA包装的结构单位。组蛋白的功能受其翻译后修饰介导。组蛋白翻译后修饰包括通过丝氨酸或苏氨酸残基的磷酸化,赖氨酸或精氨酸的甲基化,赖氨酸的乙酰化和脱乙酰基,赖氨酸的泛素化和磺酰化等对组蛋白进行的共价修饰。组蛋白这些修饰对于核完整性至关重要,因为它们可以调节染色质结构并募集参与基因调节、DNA修复和染色体浓缩的酶。组蛋白的翻译后修饰大多位于N末端的尾巴上,因为N末端是蛋白质中比较暴露和比较灵活的区域。分析组蛋白翻译后修饰有助于探索组蛋白修饰与染色体浓缩、DNA转录等生物功能之间的关系。广东蛋白质糖基化修饰组学价钱乙酰化修饰是原核和真核生物所共有的一种翻译后修饰类型。
蛋白磷酸化修饰过程:蛋白磷酸化修饰这一过程是通过蛋白激酶催化,将磷酸基团从ATP转移到多肽底物的丝氨酸、苏氨酸,或酪氨酸残基上。并且磷酸化修饰的过程是可逆的,去磷酸化反应由蛋白磷酸酶催化完成。蛋白磷酸化检测方法:Western Blot检测方法:Western Blot是检测蛋白磷酸化水平的常用方法,主要过程为先利用SDS-PAGE分离蛋白质,随后将蛋白质转移到PVDF膜上,然后使用特异性识别磷酸化蛋白的抗体来鉴定目标蛋白的磷酸化水平。只有被磷酸化修饰的蛋白才会在相应分子质量的地方显现特异性蛋白条带。
翻译后修饰蛋白的检测方法:翻译后修饰蛋白的检测技术包括有免疫沉淀、western blot、质谱技术、体外生化分析等。其中,免疫沉淀是大多数翻译后修饰检测中的关键步骤,它利用蛋白特异性抗体或某种翻译后修饰的特异性抗体来富集目标蛋白,之后再用western blot或质谱技术分析目标蛋白。Western blot和质谱技术均可用于蛋白质翻译后修饰的下游检测,其中Western blot相对简单但依赖于特异性抗体且无法识别单个蛋白质变化,质谱则可以检测包括未知PTM在内的几乎所有的PTMs但成本更高需要专业知识来分析产生的大量数据。研究人员可以根据成本、有无可用抗体,以及有没有目标等选择合适的方法进行检测。蛋白质磷酸化修饰组学具有全方面性。
蛋白质磷酸化修饰组学:蛋白质的磷酸化修饰是生物体内重要的共价修饰方式之一。磷酸化修饰本身所具有的简单、灵活、可逆的特性,以及磷酸基团的供体ATP的易得性,使得磷酸化修饰被真核细胞所选择接受成为一种比较普遍的调控手段。蛋白质的磷酸化和去磷酸化这一可逆过程,几乎调节着包括细胞的增殖、发育、分化、细胞骨架调控、细胞凋亡、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢发生等生命活动的所有过程,并且可逆的蛋白质磷酸化是目前所知道的比较主要的信号转导方式。目前已经知道有许多人类疾病是由于异常的磷酸化修饰所引起,而有些磷酸化修饰却是某种疾病所导致的后果。泛素化修饰是一种重要的翻译后修饰。深圳磷酸化修饰蛋白质组学有哪些
蛋白质翻译后修饰有什么生物学意义?贵州蛋白质乙酰化修饰组学分析
质谱分析蛋白翻译后修饰:相对于蛋白质印迹等技术,质谱技术能更有效的对蛋白质的翻译后修饰进行分析,且可以对常规的Western blot 翻译后修饰蛋白鉴定进行补充。质谱分析蛋白翻译后修饰一般使用自下而上的基于肽段的方法。但是自下而上的质谱方法无法保证可以完全识别目的蛋白的特定翻译后修饰,因为质谱是通过蛋白质序列内的多个肽段来鉴定的,这很大程度上降低了翻译后修饰肽段被识别的机会。一种提高质谱仪检测到修饰肽段数量的策略是使用PTM亲和试剂进行肽段富集,而不是使用PTM亲和试剂进行蛋白富集,这将减少富集的未修饰肽段的数量。贵州蛋白质乙酰化修饰组学分析
上海拜谱生物科技有限公司致力于商务服务,是一家服务型公司。拜谱生物致力于为客户提供良好的多组学服务,质谱检测,蛋白质组学,代谢组学,一切以用户需求为中心,深受广大客户的欢迎。公司秉持诚信为本的经营理念,在商务服务深耕多年,以技术为先导,以自主产品为重点,发挥人才优势,打造商务服务良好品牌。拜谱生物立足于全国市场,依托强大的研发实力,融合前沿的技术理念,飞快响应客户的变化需求。