定量蛋白质组学的方法学背景和意义:从生命活动的直接执行者——蛋白质的角度研究生命现象和规律(特别是疾病防治和病理研究)已成为研究生命科学的主要手段。而这些研究往往离不开对细胞、组织中含有蛋白质种类和表达量的研究。对处不同时期、不同条件下蛋白质表达水平变化的研究,识别功能模块和路径,监控疾病的生物标志物,这些研究都需要对蛋白质进行鉴定和定量。生物质谱技术的出现和不断成熟为蛋白质差异表达分析提供了更可靠、动态范围更广的研究手段。基于质谱技术,科学家们不断开发出新的定量蛋白质组学方法,来了解细胞、组织或生物体的整体蛋白质动力学。蛋白质组学在生物学领域的研究中的应用是怎样的?江苏TMT/iTRAQ标记定量蛋白质组学价钱
蛋白质组学技术:电喷雾质谱:ESI-MS是利用高电场使质谱进样端的毛细管柱流出的液滴带电,在N2气流的作用下,液滴溶剂蒸发,表面积缩小,表面电荷密度不断增加,直至产生的库仑力与液滴表面张力达到雷利极限,液滴爆裂为带电的子液滴,这一过程不断重复使液滴非常细小呈喷雾状,这时液滴表面的电场非常强大,使分析物离子化并以带单电荷或多电荷的离子形式进入质量分析器。ESI-MS从液相中产生离子,一般说来,肽段的混合物经过液相色谱分离后,经过偶联的与在线连接的离子阱质谱分析,给出肽片段的精确的氨基酸序列,但是分析时间一般较长。目前,许多实验室两种质谱方法连用,获得有意义的蛋白质的肽段序列,设计探针或引物来获得有意义的基因。随着蛋白质组研究的深入,又有多种新型质谱仪出现,主要是在上述质谱仪的基础上进行改进与重新组合。湖北外泌体蛋白质组学研究定量蛋白质组学通过对蛋白质的定量分析,以了解基因在不同的生理、病理和逆境条件下的表达情况。
PRM靶向蛋白质组学:产品分类:a.相对定量(目的同WB)。b.一定定量(目的同Elisa)。技术优势:(1)无需抗体,可直接对样本中目标蛋白质进行定量分析。(2)高特异性、准确度和灵敏度,靶向检测目标蛋白对应的多个unique肽段。(3)通量高,可以同时实现几十个蛋白的定量检测。样本要求:动物及临床组织标本100mg/sample,血清、血浆200μL/sample,细胞、微生物1×107cells/sample。应用方向:验证修饰和非修饰定量蛋白组学结果;目标蛋白相对定量和一定定量分析。蛋白质组学属于后基因组时代的科学研究,针对基因表达产物进行检测与定量。
蛋白质组的研究不但能为生命活动规律提供物质基础,也能为众多种疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。通过对正常个体及病理个体间的蛋白质组比较分析,我们可以找到某些“疾病特异性的蛋白质分子”,它们可成为新药物设计的分子靶点,或者也会为疾病的早期诊断提供分子标志。确实,那些世界范围内销路比较好的药物本身是蛋白质或其作用靶点为某种蛋白质分子。因此,蛋白质组学研究不只是探索生命奥秘的必须工作,也能为人类健康事业带来巨大的利益。蛋白质组学的研究是生命科学进入后基因时代的特征。蛋白质组研究技术涉及到各种重要的生物学现象,如信号转导、细胞分化、蛋白质折叠等等。
我国科学家已经在重大疾病如肝病、维甲酸诱导白血病细胞凋亡启动模型及维甲酸定向诱导胚胎干细胞向神经系统分化的模型等比较蛋白质组研究以及一些重要生理和病理体系的蛋白质组成分研究方面获得了重要成就。蛋白质组学的重要应用领域有:在临床疾病中的应用、在微生物蛋白质组学中的应用、在植物研究中的应用、在肾脏病学领域的应用。我们通过研究蛋白质组,可以为患者提供有用的疾病诊断、诊疗、预后评估信息;可以早期更为准确的诊断出胰腺病;也可以为AD的诊断、诊疗药物的设计和筛选奠定基础。这项研究技术其实离我们生活非常近,对我们生命而言尤为重要。近年来,高通量蛋白质分离与鉴定技术,如双向电泳、生物质谱、蛋白质芯片、酵母双杂交系统、生物信息学等相继建立并日趋完善,加速了蛋白质组学的发展。蛋白质组学与其它学科的交叉也将日益明显和重要。江苏TMT/iTRAQ标记定量蛋白质组学价钱
在对早老性痴呆等人类重大疾病的临床诊断和治理方面蛋白质组技术也有十分诱人的前景。江苏TMT/iTRAQ标记定量蛋白质组学价钱
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