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河南IncRNA转录组学技术服务

来源: 发布时间:2021-12-24

转录组分析是目前应用比较广的高通量测序分析技术之一。常见设计是不同样品之间比较,寻找差异基因、标志基因、协同变化基因、差异剪接和新转录本,并进行结果可视化、功能注释和网络分析等。转录组的测序分析也相对成熟,从RNA提取、构建文库、上机测序再到结果解析既可以自己完成,又可以在专业公司进行。概括来看转录组的分析流程比较简单,序列比对-转录本拼接(可选)-表达定量-差异基因-功能富集-定制分析。整个环节清晰流畅,可以作为刚开始接触高通量测序学习比较合适的技术之一。转录组学有高通量、更精确的数字信号。河南IncRNA转录组学技术服务

转录组学为什么原核物种只能做有参转录组分析?由于原核生物的基因组中存在大量基因重叠区域、操纵子及多顺反子,如果按照无参转录组分析策略进行组装的话,难度较大,组装结果存在较大风险。转录组学差异基因数目多少比较合理?不同的处理,不同的研究目标,差异基因的数目是不同的,从几十个到几千个都有可能。但是如果差异基因数目是个位数或者上万,那么就需要和分析人员沟通一下,查一查是否有问题。转录组学差异基因太多,注释信息太杂乱,怎么挑选目标基因?对不同的差异组合进行维恩图分析,挑选共有或者特有的差异基因作为后续的研究对象;根据前人的文献报道,挑选相关差异基因,不要局限在自己研究的物种上。广州mRNA-seq转录组学分析方法转录学组测序能够提供更普遍的检测范围。

全转录组学测序技术优势:文库优化:针对不同长度的序列采用两种文库构建方法,采用去核糖体的链特异性文库可以获得mRNA、lncRNA和circRNA的序列信息。数据全:全转录组测序完成后可获取4类主要RNA(miRNA,mRNA,lncRNA,circRNA)数据,可对这些数据进行标准分析及整合分析。关联全:通过对mRNA/miRNA/lncRNA/circRN序列测定及后续分析,深入开展全转录组调控网络(ceRNA网络)分析。样本类型:细胞,组织,体液、血清、血浆、全血,总RNA等。建议总RNA起始量:>15μg,浓度≥200ng/μL)。

转录组学(Transcriptome)广义上指某一生理条件下,细胞内所有转录产物的汇合,包括信使RNA(mRNA)、核糖体RNA(rRNA)、转运RNA(tRNA)及非编码RNA(ncRNA);狭义上指所有mRNA的汇合。转录组具有很强的时间和空间特性,是基因功能及结构研究的基础和出发点,掌握了生物个体基因转录水平的变化,可深入了解其生命活动特征和调控机制。通过新一代高通量测序,能够全方面快速地获得某一物种特定组织在某一状态下的几乎所有转录本的基因序列信息。转录组学测序的研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有RNA的总和。

全转录组测序:狭义的转录组默认只包含mRNA,但是广义的转录组指的是细胞或组织中所有转录产物的汇合,其中包含mRNA和非编码RNA(non-codingRNA,ncRNA)。非编码RNA目前的研究多集中在具有调控功能的smallRNA(以miRNA为表示),长链非编码RNA(longnon-codingRNA,lncRNA)和环状RNA(circularRNA,circRNA)上,而这几类ncRNA的调控对象都和mRNA有关。因此,全转录组即包含了ncRNAs和mRNA。全转录组测序即对以上四种ncRNA进行测序,并分析这四者之间复杂的相互作用关系。普通转录组测序主要适用于不同的生长阶段或者发育过程。浙江单细胞转录组学定性分析

转录组学是研究细胞表型和功能的一个重要手段。河南IncRNA转录组学技术服务

circRNA转录组学:是一类具有闭合环状结构的非编码RNA分子,没有5′帽子结构和3′poly(A)结构,主要位于细胞质或储存于外泌体中,不受RNA外切酶影响,表达更稳定且不易降解,已被证明普遍存在于多种真核生物体内[1]。大多数circRNA是由外显子环化而成,也有部分circRNA是由内含子环化而成的套索结构。同时由于circRNA含有大量的miRNA应答原件(MREs),能与AGO蛋白形成RNA诱导沉默复合体(RISC)的催化关键,然后导致circRNA降解。根据来源,circRNA可大致分为四类:全外显子型的circRNA,内含子和外显子组合的EIcircRNA,内含子组成的套索型ciRNA,由病毒RNA基因组、tRNA、rRNA、snRNA等环化产生的circRNA。河南IncRNA转录组学技术服务

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