什么是转录组测序?转录组广义上指在某一生理条件下,细胞内所有转录组产物的组合,包括:mRNA、ncRNA、rRNA等;狭义上指所有mRNA的组合。转录组测序的研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有RNA的总和,主要包括mRNA和ncRNA。转录组具有时间特异性、组织特异性、空间特异性等特点。普通转录组测序适用于哪些情况?普通转录组测序主要适用于两大类:一是不同的生长阶段或者发育过程;二是不同的环境、药物、病原菌等逆境胁迫处理。转录组学分析转录本的结构和表达水平的同时,还能发现未知转录本和稀有转录本。四川外泌体转录组学应用
单细胞 RNA-seq转录组学的工作流程:单细胞 RNA 测序等高通量单细胞转录组学技术通常从针对不同瘤和组织类型(解离、分选和分离细胞等)量身定制的实验工作流程开始,然后产生可以比对的序列,量化、质量控制 (QC) 过滤和以不同方式标准化,以实现许多下游计算分析,例如聚类分析以识别转录不同的细胞类型和亚群,等位基因分析以识别单核苷酸变异(SNV,用星号表示)或拷贝数变体(CNV)、轨迹分析、剪接检测或瘤的微环境(TME)相互作用的推断中。mRNA-seq转录组学领域转录组学是研究细胞表型和功能的一个重要手段。
转录组学的概念:转录组是指特定组织或细胞在某一发育阶段或功能状态下转录出来的所有RNA的汇合,包括蛋白质编码的信使RNA和非编码RNA(rRNA、tRNA和其他ncRNAs),高通量测序技术也被称为下一代测序(NGS)技术,推进了基因组学的研究进展。该项新技术除了研究静态基因组,近年来也开始应用于动态转录分析,由此衍生的技术称为RNA序列分析(RNA-seq)随着DNA基因芯片技术的快速发展,开创了这个病症近十年的高通量转录组研究。RNA-Seq技术可以从转录水平检测瘤中的改变基因。通过相关软件分析,鉴定相关改变基因在瘤发生的发展中所起的作用。然后经过刷选,进一步挑选出相关靶基因进行实验研究,有望为瘤的基因医治提供新的靶点。
转录组学(transcriptomics)是功能基因组学(FunctionalGenomics)研究的重要组成部分,是一门在整体水平上研究细胞中所有基因转录及转录调控规律的学科。随着人类基因组计划HGP(HumanGenomeProject)的完成,科学家也逐渐认识到对基因结构序列的研究只是基因组学研究的一部分,并不能揭示所有的生命奥秘,所以接下来需要解决的问题是:研究这些基因序列的功能、参与的生命过程、表达调控方式,以及这些基因在不同的时空条件下的表达差异等。这些问题都需要功能基因组学技术来解决,而转录组学技术是功能基因组学研究的重要组成部分。对基因及其转录表达产物功能研究的功能基因组学,将为疾病控制和新药开发、作物和畜禽品种的改良提供新思路,为人类解决健康问题、食物问题、能源问题和环境问题提供新方法。转录组学测序包括mRNA和非编码RNA。
宏转录组学也称为环境转录组学,指从整体水平上研究某一特定环境、特定时期菌群群体全部基因转录情况以及转录调控规律,以揭示微生物在不同环境压力下的适应机制,探索环境与微生物之间的相互作用机理。其适用范围包括人体微生态、环境、工业、农业等领域。宏转录组学以生态环境中的全部RNA为研究对象,避开了微生物分离培养困难的问题,能有效的扩展微生物资源的利用空间。应用领域:包括肠道微生物、口腔微生物、粪便微生物、人体组织微生物。狭义上转录组学的指所有mRNA的组合。四川外泌体转录组学应用
转录学组测序能够提供更普遍的检测范围。四川外泌体转录组学应用
单细胞RNA-seq转录组学工作流程:单细胞RNA测序等高通量单细胞转录组学技术通常从针对不同瘤和组织类型(解离、分选和分离细胞等)量身定制的实验工作流程开始,然后产生可以比对的序列,量化、质量控制(QC)过滤和以不同方式标准化,以实现许多下游计算分析,例如聚类分析以识别转录不同的细胞类型和亚群,等位基因分析以识别单核苷酸变异(SNV,用星号表示)或拷贝数变体(CNV)、轨迹分析、剪接检测或瘤的微环境(TME)相互作用的推断中。单细胞转录组学数据的分析通常因精心设计的研究设计而变得复杂,这些设计可能包括来自患病和未患病个体的样本、在不同时间点(例如,诊疗前和诊疗后)收集的同一个人的多个样本,或来自表现出不同疾病状态的不同个体的多个样本。这样的研究设计可以发现患者共享的转录特征,这些特征可能定义疾病中常见的干扰分子途径。四川外泌体转录组学应用