泛素化修饰蛋白质组学的作用:泛素化、心血管等疾病的发病密切相关。因此,作为近年来生物化学研究的一个重大成果,它已然成为研究、开发新药物的新靶点。技术原理是首先将蛋白样本酶解成肽段混合物,然后使用液相色谱对酶解后的肽段混合物进行组分分离以降低样本复杂程度,然后通过高质量的泛素化修饰抗体和生物材料对修饰肽段进行富集,之后上样至液相色谱-串联质谱中进行分析定量。技术优势:高特异性的修饰抗体;高分辨率、高灵敏度质谱仪;鉴定通量高;可与代谢组学等进行多组学联合分析。泛素化修饰蛋白组学是一种重要的翻译后修饰。武汉蛋白质琥珀?;奘巫檠е势追治?/p>
定量N-糖基化蛋白质翻译修饰组学:蛋白质的N-糖基化位点修饰是重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用。蛋白质的N-糖基化修饰位点具有保守的氨基酸序列NX(S/T)(其中X为除脯氨酸以外的其它氨基酸)凝集素亲和法是目前糖蛋白质组学中应用普遍的分离富集方法。凝集素(lectin)是一类糖结合蛋白质,能专一识别某一特殊结构的单糖或聚糖中特定的糖基序列而与之结合,它们与糖链可逆非共价结合,糖蛋白或糖肽被凝集素捕获之后,通常用特定的单糖通过竞争结合凝集素将糖蛋白或糖肽洗脱下来。贵州丙?;奘蔚鞍字首檠Х治鲅芯恳阴;奘蔚鞍鬃檠вτ梅较蛴惺裁矗?/p>
乙酰化修饰蛋白组学应用方向:1、乙?;奘斡胂赴虮泶锏骺亍⒈砉鄣骺亍⑾赴蛲觥⑾赴?、信号转导、蛋白质稳定性等生理过程研究。2、乙酰化引起的代谢疾病、代谢紊乱发生等疾病机理研究。乙酰化生物学意义:1、调节DNA-蛋白、蛋白-蛋白相互作用;2、与其他PTMs发生crosstalk;3、调节酶活性;4、调控蛋白亚细胞定位。生物领域各个研究方面,如:1、农林领域:抗逆胁迫机制,生长发育机制,育种?;ぱ芯康?;2、 畜牧业:肉类及乳品质研究,致病机理研究等。
蛋白翻译后修饰位点鉴定:蛋白质翻译后修饰(Post-Translational Modifications, PTMs)几乎参与了细胞所有正常生命活动的过程,并发挥十分重要的调控作用。蛋白质修饰位点能够影响蛋白的多种属性,包括蛋白质折叠、活性以及之后的功能,对于蛋白质修饰位点的发现及研究对阐明蛋白质的功能具有重要作用。技术特点:时间快,周期短;识别位点准确,采用高分辨率质谱技术可以准确定位到发生修饰的氨基酸位点。适用范围:已知蛋白序列;明确翻译后修饰的类型。蛋白质翻译后修饰是影响蛋白质功能并调节整个细胞过程的重要方式。
磷酸化修饰蛋白质组学服务:蛋白质的磷酸化修饰是生物体内重要的共价修饰方式之一。磷酸化修饰本身所具有的简单、灵活、可逆的特性,以及磷酸基团的供体ATP的易得性,使得磷酸化修饰被真核细胞所选择接受成为一种比较普遍的调控手段。蛋白质的磷酸化和去磷酸化这一可逆过程,几乎调节着包括细胞的增殖、发育、分化、细胞骨架调控、细胞凋亡、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢发生等生命活动的所有过程,并且可逆的蛋白质磷酸化是目前所知道的比较主要的信号转导方式。目前已经知道有许多人类疾病是由于异常的磷酸化修饰所引起,而有些磷酸化修饰却是某种疾病所导致的后果。蛋白质的翻译后修饰过程极其复杂。贵阳丙二?;奘蔚鞍字首檠е势追治?/p>
蛋白质磷酸化修饰组学是植物体内比较常见的PTM修饰手段。武汉蛋白质琥珀酰化修饰组学质谱分析
泛素化修饰蛋白组学研究:泛素化修饰蛋白组学是一种重要的翻译后修饰。泛素-蛋白酶体系统介导了真核生物体内80%~85%的蛋白质降解。此外,泛素化修饰还可以直接影响蛋白质的活性和定位,调控包括细胞周期、细胞凋亡、转录调控、DNA 损伤修复以及免疫应答等在内的多种细胞活动。由于翻译后修饰的蛋白质在生物样本中含量低、动态范围广,质谱分析前需要对修饰进行富集以提高其丰度,然后利用传统的定量蛋白组分析手段对富集得到的泛素化肽段样品进行定量分析。武汉蛋白质琥珀?;奘巫檠е势追治?/p>