单细胞转录组学技术：10×genomics技术：首先在凝胶微珠上种上特定的DNA的片段，DNA的片段由三部分组成：Barcode、UMI、PolyT组成。Barcode是16个碱基的长度。一共有400万种Barcode，一个微珠是对应于一种Barcode，通过这400万种Barcode，可以把凝胶微珠给区分开（通过barcode可以把cell分开）。UMI是一段随机序列，也就是说每一个DNA分子，都有自己的UMI序列（一个微珠上有很多种UMI，通过UMI可以把RNA分子分开，并可以标记RNA分子的数量）。10个碱基长的UMI，有100万种序列的变化（4^10=1,048,576），UMI的作用是为了区分哪些reads是来自于一个原始cDNA分子区分基因片段重复还是duplication及区分是真实的SNP位点还是PCR产生的突变。通过10×genomics仪器将单个细胞与单个凝胶微珠通过油相混在一起，形成油包水的小微滴。转录组学无需了解物种基因信息，能够直接对任何物种进行转录组分析。湖北mRNA-seq转录组学技术服务

全长转录组测序的优势：1、全方面鉴定可变剪切；2、发现更多新基因；3、有效改善基因组注释；4、鉴定更多的LncRNA；5、准确定位融合基因。研究思路：由于全长转录组测序是基于第三代测序技术，因而其成本依然较高，如果全部研究项目均基于全长转录组，通常来说很难承担，因此，全长转录组测序一般与普通转录组测序相结合。宏转录组学是什么？宏转录组学也称为环境转录组学，指从整体水平上研究某一特定环境、特定时期菌群群体全部基因转录情况以及转录调控规律，以揭示微生物在不同环境压力下的适应机制，探索环境与微生物之间的相互作用机理。上海转录组学检测价格转录组学灵敏度高，可以检测细胞中少至几个拷贝的稀有转录本。

全转录组学测序技术优势：文库优化：针对不同长度的序列采用两种文库构建方法，采用去核糖体的链特异性文库可以获得mRNA、lncRNA和circRNA的序列信息。数据全：全转录组测序完成后可获取4类主要RNA（miRNA，mRNA，lncRNA，circRNA）数据，可对这些数据进行标准分析及整合分析。关联全：通过对mRNA/miRNA/lncRNA/circRN序列测定及后续分析，深入开展全转录组调控网络(ceRNA网络)分析。样本类型：细胞，组织，体液、血清、血浆、全血，总RNA等。建议总RNA起始量：＞15μg，浓度≥200ng/μL）。

转录组学 (transcriptomics)是功能基因组学 ( Functional Genomics)研究的重要组成部分，是一门在整体水平上研究细胞中所有基因转录及转录调控规律的学科。随着越来越多的基因组序列相继被测定,生命科学的研究进入了后基因组时代,各类组学技术得到迅速地发展与普遍地应用包括以基因为研究对象的基因组学(Genomics)、以转录过程为研究对象的转录组学(Transcriptomics)。意义：1、转录组谱可以提供特定条件下某些基因表达的信息,并据此推断相应未知基因的功能,揭示特定调节基因的作用机制。2、通过基于基因表达谱的分子标签,不只可以辨别细胞的表型归属,还可以用于疾病的诊断。转录组学差异基因太多，注释信息太杂乱，怎么挑选目标基因？

单细胞转录组学技术：单细胞转录组目前主要有三种方法：SMART扩增技术、10×genomics技术及Andeplete技术。SMART扩增技术比较关键的技术，就是设计了2个特殊的引物。再配合用MMLV逆转录酶进行逆转录。特殊引物1由中间PolyT序列加上一段通用序列及3’末端两个简并碱基构成，但在PolyT的3’端倒数第二个碱基是A、C、G而非T的简并碱基，而倒数第1个为简并碱基，这样做的好处是让它正好结合在mRNA的3’端连到Poly(A)尾巴的这个连接处，而不会结合到mRNA的别的地方。这样就保证了逆转录的起始位置正好是mRNA的3’端的序列终止位置。MMLV逆转录酶，这个酶有个特点，就是它在转录到mRNA的5’端末端的时侯，会在新合成的cDNA的3’末端，多加出几个C碱基来。转录组学为什么原核物种只能做有参转录组分析？湖北mRNA-seq转录组学技术服务

转录学组测序可对任意物种的整体转录活动进行检测。湖北mRNA-seq转录组学技术服务

全长转录组学测序：由于在转录组研究中通常所使用的第二代测序技术具有测序读长的限制，因此在进行测序之前，需要先将样本的mRNA打碎为小片段，之后再通过与参考基因组比对或拼接的方式识别转录本，这就会造成一定的错误比例，同时在也很难区分单碱基水平的差异。全长转录组测序的优势：1、全方面鉴定可变剪切；2、发现更多新基因；3、有效改善基因组注释；4、鉴定更多的LncRNA；5、准确定位融合基因。研究思路：由于全长转录组测序是基于第三代测序技术，因而其成本依然较高，如果全部研究项目均基于全长转录组，通常来说很难承担，因此，全长转录组测序一般与普通转录组测序相结合。湖北mRNA-seq转录组学技术服务