泛素化修饰蛋白质组学:泛素是一种由76个氨基酸组成的多肽,在真核生物中高度保守,可通过异肽键与目标蛋白赖氨酸残基的氨基进行共价连接。泛素化蛋白的富集主要基于标记,泛素用亲和标签(通常为6xHis)进行标记,并通过镍螯合色谱亲和提取泛素化蛋白。由于泛素的C端为Arg-Gly-Gly结构,经胰蛋白酶水解后,Gly-Gly保留在修饰蛋白的肽链上,使肽的质量增加114,因此可作为泛素定位位点的质量标记。用HPLC对样品进行预分离,使用针对特定残留结构的抗体富集泛素化肽,可很大程度上提高泛素化蛋白的浓度。串联质谱可以鉴定泛素化位点。蛋白质翻译后修饰在许多细胞过程中起着关键作用。湖北蛋白质磷酸化修饰组学分析
蛋白质翻译后修饰的重要性:翻译后修饰可以发生在蛋白质生命周期的任何阶段。例如,许多蛋白质在翻译完成后不久就被修饰,以介导适当的蛋白质折叠或稳定,或将新生蛋白质引导到不同的细胞区室(例如,细胞核、膜)。折叠和定位完成后发生其他修饰,以刺激或灭活催化活性或以其他方式影响蛋白质的生物活性。蛋白质也与靶向降解蛋白质的标签共价连接。除了单一的修饰外,蛋白质通?;雇ü牒笄懈詈屯ü鞍字食墒斓姆植交圃黾庸δ芑诺淖楹辖行奘?。分析蛋白质及其翻译后修饰对于心脏病、神经退行性疾病和糖尿病的研究尤为重要。PTMs 的特征,虽然具有挑战性,但提供了对病因学过程下的细胞功能的无价的洞察。在技术上,研究翻译后修饰蛋白的主要挑战是开发特异性的检测和纯化方法。幸运的是,这些技术障碍正在用各种新的和精炼的蛋白质组学技术来克服。武汉蛋白质乙?;奘巫檠е饕际醯鞍字柿姿峄奘慰捎τ糜谑称饭ひ捣矫?。
蛋白质翻译后修饰组学:翻译后修饰(Post-translational modification, PTM)是指对翻译后的蛋白质进行共价加工的过程。它通过在一个或多个氨基酸残基加上修饰基团,可以改变蛋白质的物理、化学性质,进而影响蛋白质的空间构象和活性状态、亚细胞定位、折叠及其稳定性以及蛋白质-蛋白质相互作用。蛋白质翻译后修饰的丰度变化在生命活动研究中具有重大意义,异常的翻译后修饰会导致多种疾病的发生。质谱可以分辨蛋白质修饰前和修饰后分子量上的变化,因此只要知道靶蛋白翻译后修饰前后分子量的变化,就能对翻译后修饰方式进行鉴定和定量。
甲基化修饰蛋白质组学技术应用领域:基础医学、临床诊断:生物标志物,疾病机理机制,疾病分型,个性化治理等;生物医药:药物作用机理,药效评价,药物开发等;农林领域:抗逆胁迫机制,生长发育机制,育种保护研究等;畜牧业:肉类及乳品质研究,致病机理研究等;微生物领域:致病机理,耐药机制,病原体-宿主相互作用研究等;海洋水产:渔业资源,海水养殖,渔业环境与水产品安全等。技术优势:采用抗体,特异性高;鉴定通量高, 一次可检测高可达上千个甲基化修饰位点。蛋白质翻译后修饰有什么生物学意义?
泛素化修饰蛋白质组学有些什么?泛素化可以生产出单泛素化或多泛素化蛋白质。后者在当7个赖氨酸残基的泛素与另一个泛素的甘氨酸C端连接形成。这种泛素分子链接在生物过程中起到重要的作用。共价结合泛素的蛋白质能被蛋白酶识别并降解,这是细胞内短寿命蛋白质和一些异常蛋白降解的普遍途径。泛素化及类泛素化蛋白在细胞分裂,自噬,DNA修复,免疫应答,细胞消亡等方面同样起到关键作用。与消化道内进行的蛋白质水解不同,从泛素与蛋白的结合到将蛋白水解成小的肽段,整个水解过程需要能量参与。人们开始意识到泛素-蛋白酶系统是一个对于真核细胞非常重要的调节系统。蛋白质翻译后修饰 (PTMs) 进一步促进了从基因组水平到蛋白质组复杂性的增加。磷酸化修饰蛋白质组学主要技术
泛素化修饰蛋白组学是一种重要的翻译后修饰。湖北蛋白质磷酸化修饰组学分析
乙?;奘蔚鞍鬃檠вτ梅较蛴惺裁??1、基础医学、临床诊断:生物标志物,疾病机理机制,疾病分型,个性化治理等;2、生物医药:药物作用机理,药效评价,药物开发等;3、微生物领域:致病机理,耐药机制,病原体-宿主相互作用研究等;4、海洋水产:渔业资源,海水养殖,渔业环境与水产品安全等;5、生物能源、环境科学领域:发酵过程优化,生物燃料生产,环境危定风险评估研究等;6、食品营养:食品储藏及加工条件优化,食品组分及品质鉴定,功能性食品开发,食品安全监检测等。湖北蛋白质磷酸化修饰组学分析