根据不同的作用位点,蛋白质乙酰化修饰分为:发生在蛋白N端的乙酰化修饰、发生在蛋白赖氨酸上的乙酰化修饰。前者发生在90%以上的真核生物新生蛋白上,对于新生蛋白的成熟和细胞定位非常重要,由N乙酰转移酶(NATs)负责;而后者是一个可逆的过程,主要由赖氨酸乙酰化酶(KATs)和赖氨酸去乙酰化酶(KDACs),赖氨酸的乙酰化修饰是我们目前研究的重点。蛋白质磷酸化修饰应用领域:应用在食品工业方面,通过人工翻译磷酸化修饰的蛋白可以普遍用于各种食用蛋白质的改性,以改善蛋白质品质。如,花生蛋白、大豆蛋白、小麦面筋蛋白等。在人工磷酸化修饰的方法下,也可以研究各种蛋白质的功能和相关代谢途径的调控。在医学领域,蛋白质的磷酸化紊乱,会导致细胞周期调控异常,因此,病理的形成与蛋白质的磷酸化异常也有很大相关性。其分子机制问题对于病症等重大疾病的研究具有相当的指导意义,这也是指当之无愧地成为生物学研究领域中的热点。蛋白质翻译后修饰组学磷酸化修饰具有简单的特性。湖北蛋白质糖基化修饰组学主要方式
泛素化修饰PRM定量验证:原理: 泛素化修饰是一种重要的翻译后修饰。泛素-蛋白酶体系统介导了真核生物体内80%~85%的蛋白质降解。此外,泛素化修饰还可以直接影响蛋白质的活性和定位,调控包括细胞周期、细胞凋亡、转录调控、DNA 损伤修复以及免疫应答等在内的多种细胞活动。首先对泛素化的蛋白进行胰酶消化,在赖氨酸的修饰位点上会产生两个甘氨酸的残基(K-GG),利用对泛素化赖氨酸(K-GG)具有高亲和力的基序抗体,特异性富集复杂样本中的泛素化肽段,结合LC-MS/MS蛋白质定量方法,实现大规模泛素化蛋白质定性定量分析。广州泛素化修饰蛋白质组学服务自中而下的蛋白质组学技术可用于组蛋白修饰的分析。
甲基化修饰蛋白质组学技术原理:目前用于甲基化蛋白质组分析的甲基化肽段富集抗体分为精氨酸甲基化(Me-R)抗体和赖氨酸甲基化(Me-K)抗体两大类。根据氨基酸残基上所含甲基化修饰基团数量的不同,精氨酸甲基化(Me-R)抗体又包括:单甲基化精氨酸(MMA)抗体、非对称二甲基化精氨酸(ADMA)抗体和对称二甲基化精氨酸(SDMA)抗体;赖氨酸甲基化(Me-K)抗体又包括:赖氨酸单甲基化(K-Me)抗体、赖氨酸二甲基化(K-2Me)抗体和赖氨酸三甲基化(K-3Me)抗体。其中,Me-R的各类抗体需要单独使用,而Me-K抗体可以混合使用。
定量磷酸化蛋白质翻译修饰组学:蛋白质发生磷酸化是重要的翻译后修饰,它与信号传导、细胞周期、生长发育机理等诸多生物学问题有密切关系。研究蛋白质磷酸化对阐明蛋白质功能具有重要意义。将磷酸化肽段TiO2富集技术和iTRAQ/TMT/Lable free技术相结合,实现对磷酸化蛋白质组学的定量研究。技术原理:在磷酸化肽段富集前先进行 iTRAQ/TMT 标记,然后通过 TiO2 富集方法获得高纯度的磷酸化肽段,之后结合高分辨率质谱完成对样品的定量分析。蛋白质翻译后修饰可以改变蛋白质的物理、化学性质。
乙酰化修饰蛋白组学应用方向有什么?1、基础医学、临床诊断:生物标志物,疾病机理机制,疾病分型,个性化治理等;2、生物医药:药物作用机理,药效评价,药物开发等;3、微生物领域:致病机理,耐药机制,病原体-宿主相互作用研究等;4、海洋水产:渔业资源,海水养殖,渔业环境与水产品安全等;5、生物能源、环境科学领域:发酵过程优化,生物燃料生产,环境危定风险评估研究等;6、食品营养:食品储藏及加工条件优化,食品组分及品质鉴定,功能性食品开发,食品安全监检测等。常见的蛋白质翻译后修饰包括乙酰化。湖北蛋白质糖基化修饰组学主要方式
大多数翻译后修饰蛋白以低化学计量和丰度存在,这限制了在分析全细胞裂解液时对其的检测。湖北蛋白质糖基化修饰组学主要方式
泛素化修饰蛋白质组学的介绍:泛素由76个氨基酸组成,高度保守,普遍存在于真核细胞内,故名泛素。泛素化是可逆的,依赖ATP并且通过泛素刺激酶E1,泛素结合酶E2,泛素连接酶E3一系列催化反应所致。这些特殊的酶包括泛素酶,结合酶、连结酶和降解酶等。泛素化在蛋白质的定位、代谢、功能、调节和降解中都起着十分重要的作用。同时,它也参与了细胞周期、增殖、凋亡、分化、转移、基因表达、转录调节、信号传递、损伤修复、炎症免疫等几乎一切生命活动的调控。泛素化、心血管等疾病的发病密切相关。因此,作为近年来生物化学研究的一个重大成果,它已然成为研究、开发新药物的新靶点。湖北蛋白质糖基化修饰组学主要方式