蛋白质组学技术：等电聚焦：等电聚焦（isoelectricfocusing，IEF）是一种利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。等电聚焦凝胶电泳依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离，等电聚焦中，蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸，在电场中形成正极为酸性，负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷，因此可以在电场中移动；当蛋白质迁移至其等电点位置时，其静电荷数为零，在电场中不再移动，据此将蛋白质分离。蛋白质组学由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生，细胞代谢等过程的整体而全方面的认识。南京外泌体蛋白质组学项目

蛋白组学样本要求：常规组织：（心、肝、脾、肺、肾、肠、脑、肌肉等）PBS洗涤去除残留血液和污染物，剔除无关的干扰组织（血管、脂肪、结缔组织等）；冲洗干净，用组织剪或手术刀将组织分离成1cm3左右的小块；液氮速冻5min，保存于-80℃。软骨组织：PBS洗涤去除残留血液和污染物；用手术刀将软骨切成1cm3左右的小块；液氮速冻5min，保存于-80℃。软体动物（吸虫等）PBS洗涤去除来自宿主的污染；液氮速冻5min，保存于-80℃。蛋白质组的研究不但能为生命活动规律提供物质基础，也能为众多种疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。南京外泌体蛋白质组学项目在未来的发展中，蛋白质组学的研究领域将更加普遍。

Labelfree非标记定量蛋白质组学技术特点：（1）不需要标记处理，操作简单，成本低、实验周期短；（2）每个样品单独处理、上机；（3）可以做任意样本的总蛋白质差异定量，样品类型不受限制；（4）对单个样品的蛋白总量要求相对较低，对于组织本身蛋白量不高，可以选择Label-Free，适用于一些难收集样品；（5）定性没有问题，但是定量的准确性较标记定量稍差，会受到质谱稳定性等因素的影响；（6）适合于大样本量的定量比较（大于24个样本）。蛋白质组学在医学的研究应用：蛋白质组学(Proteomics)是研究细胞、组织或生物体中蛋白质组成、定位、变化及其相互作用规律的科学。

蛋白质组学在医疗和健康方面有什么应用？具体而言，蛋白质组学在此类应用中，更多地用于提供高通量蛋白质定性定量信息。作为检测手段的蛋白质组学：事实上，在当前的生物医学研究和临床诊断中，蛋白质组学相关技术有非常多的应用。因为蛋白质组学技术的本质（从分析化学角度来看），就是对蛋白质的定性定量分析。生物医学和临床诊断中，需要大量表征一种或多种蛋白质的含量、氨基酸序列、翻译后修饰等信息。蛋白质组学相关技术目前在一小部分]应用中具有独特优势。有很多蛋白质组学的研究者在工业界和医院进行相关研究和日常工作。很容易发现，当前蛋白质组学的临床应用更多地集中在第二类。第1类的应用更接近于生物医学基础研究，目前还没有和大部分人的现实生活产生关系。蛋白质组意指“一种基因组所表达的全套蛋白质”，即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质。

蛋白质组学是以蛋白质组为研究对象，研究细胞、组织或生物体蛋白质组成及其变化规律的科学。蛋白质组学研究不只是探索生命奥秘的必须工作，也能为人类健康事业带来巨大的利益，是生命科学进入后基因时代的特征。蛋白质是生命存在和运动的物质基础，是细胞增殖、分化、衰老和凋亡等重大生命活动的执行者，亦是基因功能活动的执行者，是生命现象复杂性和多变性的直接体现者。蛋白质组研究是为了识别及鉴定一个细胞或组织所表达的全部蛋白质以及它们的表达模式，是对基因组研究的重要补充，是对生物体在蛋白质水平上定量、动态、整体性的研究。这类研究有助于了解蛋白的结构、细胞的功能、生命的本质及活动规律，为疾病的诊断、诊疗、疫苗及新药开发提供科学依据。目前国际上许多大型药物公司正投入大量的人力和物力进行蛋白质组学方面的应用性研究。杭州修饰蛋白组学检测价格

对人类而言，蛋白质组学的研究终究要服务于人类的健康。南京外泌体蛋白质组学项目

定量蛋白质组学分析（QuantitativeProteomics）是对一个基因组表达的全部蛋白质或一个复杂混合体系内所有蛋白质进行精确鉴定和定量。可用于筛选和寻找任何因素引起的样本之间的差异表达蛋白，结合生物信息学揭示细胞生理病理等功能，同时也可对某些关键蛋白进行定性和定量分析。目前定量蛋白质组学技术常见标记（Label）和非标记的（LabelFree）定量策略。定量蛋白质组学技术常见的几类主要包括：LabelFree定量蛋白组分析、SILAC与免疫共沉淀蛋白互作分析、MRM/PRM定量蛋白组学分析、SILAC/Dimethyl标记定量蛋白组分析、SWATH定量蛋白组学、TMT/iTRAQ/multinotch定量蛋白组学分析。南京外泌体蛋白质组学项目

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