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浙江IncRNA转录组学分析方法

来源: 发布时间:2022-03-13

转录组是干什么用的,和表达谱有什么区别?转录组,指细胞某一时期所有基因的转录水平。转录组学,是一门在整体水平上研究细胞中基因转录的情况及转录调控规律的学科。简而言之,转录组学是从RNA水平研究基因表达的情况。对RNA的分析。分析应该是分几个维度的DNA到RNA,RNA的剪切拼接,RNA的翻译。表达谱有两种,分别是基因表达谱和蛋白质表达谱。基因表达谱是指细胞中所有基因表达的格局。通过比较分析基因表达谱,可从整体水平研究代谢机制,认识基因相互作用的网络关系,发现重要基因。转录组学能够同时鉴定和定量稀有转录本和正常转录本。浙江IncRNA转录组学分析方法

全转录组学测序技术优势:文库优化:针对不同长度的序列采用两种文库构建方法,采用去核糖体的链特异性文库可以获得mRNA、lncRNA和circRNA的序列信息。数据全:全转录组测序完成后可获取4类主要RNA(miRNA,mRNA,lncRNA,circRNA)数据,可对这些数据进行标准分析及整合分析。关联全:通过对mRNA/miRNA/lncRNA/circRN序列测定及后续分析,深入开展全转录组调控网络(ceRNA网络)分析。样本类型:细胞,组织,体液、血清、血浆、全血,总RNA等。建议总RNA起始量:>15μg,浓度≥200ng/μL)。广东外泌体microRNA转录组学主要技术转录组学可应用于表达差异的研究。

转录组学测序比其他研究方法有哪些优势?转录组学测序具有以下优势:(1)可以直接测定每个转录本片段序列、单核苷酸分辨率的准确度,同时不存在传统微阵列杂交的荧光模拟信号带来的交叉反应和背景噪音问题;(2)灵敏度高,可以检测细胞中少至几个拷贝的稀有转录本;(3)可以对任意物种进行全基因组分析,无需预先设计特异性探针,因此无需了解物种基因信息,能够直接对任何物种进行转录组分析,同时能够检测未知基因,发现新的转录本,并准确地识别可变剪切位点及cSNP,UTR区域。(4)检测范围广,高于6个数量级的动态检测范围,能够同时鉴定和定量稀有转录本和正常转录本。

单细胞转录组学技术:Anydeplete技术首先通过随机引物进行一链合成,一链合成引入核苷酸类似物,用于酶切打断,二链合成同样引入核苷酸类似物用于保证链特异性。然后两端加上接头,接头一条链也带有核苷酸类似物,用于酶切降解。当形成单链文库后,设计特异性引物与rRNA形成文库结合,一轮退火延伸,rRNA文库形成双链结构。Reverseadaptor上带有特异的酶切位点,当形成双链结构酶切位点被识别,切去接头,这样rRNA形成的文库不带有完整的接头,而其他文库带有完整接头,通过PCR扩增富积既能得到想要的信息,包含mRNA及LncRNA信息。同样Anydeplete技术与10×genomics技术一样,包含分子标签,可分析duplication及PCR产生突变位点。转录组学是一门在整体水平上研究细胞中基因转录的情况及转录调控规律的学科。

转录组学应用领域:农林领域:生长发育机制,抗逆胁迫机制,育种,物种保护研究等;畜牧业:生长发育机制,致病机理研究,肉类及乳制品品质研究等;海洋水产:生长发育机制,渔业资源,渔业环境与水产品安全等;微生物:致病机理,耐药机制,病原体-宿主相互作用研究等;生物医药:生物标志物,疾病机理机制,疾病分型,药物开发,个性化医治等;环境科学:发酵过程优化,生物燃料生产,环境危害风险评估研究等;食品科学:食品储藏及加工条件优化,食品组分及品质鉴定,功能性食品开发,食品安全监检测等。转录组学有高通量、更精确的数字信号。广东外泌体microRNA转录组学主要技术

转录组学广义上指在某一生理条件下,细胞内所有转录组产物的组合。浙江IncRNA转录组学分析方法

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