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广州外泌体microRNA转录组学研究内容

来源: 发布时间:2022-03-12

circRNA转录组学成环机制:circRNA环化方式分为内含子环化和外显子环化。目前主流的成环机制可归类为:依赖于剪切体的索尾插接环化。在mRNA前体上,通过连续的组装小核核糖体蛋白从而催化外显子下游的5′供体的位点连接到上游的3′受体的位点,索尾插接形成环化,然后通过剪切形成circRNA。顺式作用元件促进circRNA形成。部分circRNA外显子两侧的内含子中含有反向互补序列,首先在剪切位点上并排形成RNA双链体,再通过可变剪切形成带内含子和不带内含子两种不同的circRNA。或者外显子内部以及两侧的内含子可以竞争进行RNA配对,然后通过可变剪切形成不同类型的circRNA。转录组学测序的研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有RNA的总和。广州外泌体microRNA转录组学研究内容

宏转录组学也称为环境转录组学,指从整体水平上研究某一特定环境、特定时期菌群群体全部基因转录情况以及转录调控规律,以揭示微生物在不同环境压力下的适应机制,探索环境与微生物之间的相互作用机理。其适用范围包括人体微生态、环境、工业、农业等领域。宏转录组学以生态环境中的全部RNA为研究对象,避开了微生物分离培养困难的问题,能有效的扩展微生物资源的利用空间。应用领域:包括肠道微生物、口腔微生物、粪便微生物、人体组织微生物。江苏IncRNA转录组学服务转录组学测序样品纯度要求,OD值应在1.8至2.2之间。

转录组分析是目前应用比较广的高通量测序分析技术之一。常见设计是不同样品之间比较,寻找差异基因、标志基因、协同变化基因、差异剪接和新转录本,并进行结果可视化、功能注释和网络分析等。转录组的测序分析也相对成熟,从RNA提取、构建文库、上机测序再到结果解析既可以自己完成,又可以在专业公司进行。概括来看转录组的分析流程比较简单,序列比对-转录本拼接(可选)-表达定量-差异基因-功能富集-定制分析。整个环节清晰流畅,可以作为刚开始接触高通量测序学习比较合适的技术之一。

RNA-Seq转录组学的应用:RNA-Seq即对转录组进行测序和分析。一般来说在研究所会委托公司测序得到数据自己进行后续的生信分析(质控,mapping,差异基因表达分析,SNV分析等)。RNA-Seq有着巨大的应用前景。在不同背景下比较mRNA水平同一物种,不同组织:研究基因在不同部分的表达情况。同一物种,同一组织:研究基因在不同处理下,不同条件下的表达变化。同一组织,不同物种:研究基因的进化关系。时间序列实验:基因在不同时期的表达情况与发育的关系。基因分类:找到细胞特异,疾病相关,处理相关的基因表达模式,用于诊断疾病和预测等。基因网络和通路:基因在细胞活动中的功能,基因间的相互作用。转录组学可应用于表达差异的研究。

宏转录学组的概念:宏转录组是特定时期、环境样本、组织样本中所有的微生物的RNA(转录本)的汇合。通过对这些转录本进行大规模高通量测序,可以直接获得环境中可培养和不可培养的微生物转录组信息。这种技术不只具有宏基因组技术的全部优点,可以检测环境中的活性微生物、活性转录本以及活性功能进行研究,还可以比较不同环境下的差异表达基因和差异功能途径,揭示微生物在不同环境压力下的适应机制,探索环境与微生物之间的互作机理。普通转录组测序主要适用于不同的环境、药物、病原菌等逆境胁迫处理。江苏IncRNA转录组学研究方法

转录组学测序样品纯度要求,电泳检测28S:18S至少大于1.8。广州外泌体microRNA转录组学研究内容

RNA-Seq转录组学技术优势:相比基因芯片和标记的碱基序列的测序方法,RNA-seq具有一定的优越性。与基因芯片相比,RNA-Seq不只可以在更高的分辨率下用来测量基因的表达水平情况,还可以揭示未知的转录组和拼接亚型,并为选择性拼接亚型提供定量分析。相对于传统的芯片杂交平台,转录组测序无需预先针对已知序列设计探针,即可对任意物种的整体转录活动进行检测,提供更精确的数字化信号、更高的检测通量以及更普遍的检测范围,是目前深入研究复杂性转录组的强大工具。鉴于这些优势,RNA-Seq很快就被应用到关于瘤病相关研究的多个方面。广州外泌体microRNA转录组学研究内容

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