PCR 仪的**组成与功能:1. 温控系统关键部件:加热模块(如半导体加热片、热板)、温度传感器(热电偶或红外传感器)。技术要求:温度范围:通常为 4-100℃,覆盖 PCR 各阶段需求。控温精度:±0.1-0.5℃,确保引物特异性结合和酶活性稳定。升降温速率:常见为 3-8℃/s,高速 PCR 仪可达 10℃/s 以上,缩短反应时间。2. 反应模块样本容量:常见规格:96 孔板(单孔 20-100μL)、384 孔板(低通量)、单管 / 8 联管(适合少量样本)。特殊设计:梯度 PCR 仪可在同一反应中设置不同孔位的退火温度,用于优化引物条件。3. 控制系统与软件功能:预设 PCR 程序(如 touchdown PCR、巢式 PCR)、实时监控温度曲线、存储实验数据。界面:触摸屏或电脑端操作,支持程序编辑和个性化设置。RePure-A也强调节能环保,减少对环境的影响,这使得其在科研机构和高校生物实验室中得到了广泛应用。无锡普通基因扩增仪PCR仪价格多少
反应体系配制与加样体系配制:按比例在离心管中混合各组分(先加非模板试剂,***加模板,避免污染),轻轻混匀(勿剧烈震荡),短暂离心(1000-2000 rpm,10-20 秒)使液体沉底。示例(20μL 体系):qPCR Mix 10μL + 上游引物(10μM)0.8μL + 下游引物(10μM)0.8μL + 模板 2μL + 无菌水 6.4μL(探针法需额外加探针)。加样:将配制好的体系逐一加入 96 孔板的对应孔中,避免产生气泡(若有气泡,用吸头刺破)。加样后用封板膜密封(确保无褶皱、无漏液),短暂离心(500-1000 rpm,30 秒),使液体聚集在孔底,避免挂壁。江苏基因扩增仪PCR仪功能RePure-(D)B在同一次实验中测试多个不同温度下的反应效果,提高实验的成功率。
实时荧光定量 PCR 仪(qPCR 仪)的使用需严格遵循操作流程,以确保实验结果的准确性和重复性。实验前准备试剂与样本准备:根据实验需求配制qPCR反应体系(通常包括模板DNA/RNA逆转录产物、引物、探针/荧光染料、qPCRMix酶、无菌水等),需在冰上操作,避免酶失活。模板:确保核酸提取纯度(OD260/280在1.8-2.0之间),避免蛋白、盐类等杂质污染。引物/探针:需验证特异性,避免引物二聚体或非特异性结合。仪器与耗材检查:检查qPCR仪电源、触摸屏/软件是否正常启动,清洁样品槽(去除灰尘或液滴,避免影响温度传导)。准备无菌的PCR管或96孔板(建议使用光学级耗材,确保荧光信号穿透性)、移液器(校准合格)、滤芯吸头(防止交叉污染)。
PCR 仪的维护与注意事项:日常维护:定期清洁反应模块,去除残留试剂(如矿物油、PCR 产物),避免污染。校准温度:使用标准温度计验证控温精度,每年至少 1 次。操作注意:配置反应体系时需在冰上进行,防止引物或酶提前活化。避免频繁开关仪器,减少温控模块损耗。实验后及时进行模块消毒(如用 75% 乙醇擦拭),防止交叉污染。PCR 仪的发展趋势:便携化与集成化:微流控芯片 PCR 仪将反应体系微型化,可实现 “样本进 - 结果出” 的即时检测(如 POCT 设备)。高通量与自动化:结合机器人工作站,实现从样本提取到 PCR 扩增的全流程自动化,适用于大规模筛查。多功能整合:如与测序仪联用,实现 “扩增 - 测序” 一体化,缩短基因分析周期。光学系统可以确保高灵敏度和高特异性,适用于各种基因表达分析、病原体检测和 SNP 分型等应用。
应用场景:匹配实验目的与样本特性:1. 科研场景需求:引物设计优化、基因克隆、突变检测等,需灵活调整反应条件。选型建议:梯度 PCR 仪 + 低通量模块(如 8 联管),便于小样本多条件测试;若涉及多基因并行扩增,可搭配 96 孔板模块。2. 临床与诊断需求:病原体检测(如**、HPV)、基因分型、大规模筛查,需兼顾效率与可靠性。选型建议:高通量普通 PCR 仪(96 孔板)或荧光定量 PCR 仪(qPCR,可同步定量),若需现场快速检测,可选便携式微流控 PCR 仪(如电池供电、15-30 分钟出结果)。3. 工业与野外场景需求:食品检测、环境监测、应急防疫,需设备便携、抗干扰。选型建议:便携式 PCR 仪(体积≤10cm×10cm),支持车载电源或电池,部分机型集成样本提取功能(如磁珠法),实现 “样本即检”。RePure-(D)B采用先进的PID温控技术,可精确控制反应温度,保证PCR反应的稳定性和可靠性。江苏定性基因扩增仪PCR仪有哪些
支持多重荧光检测,能够同时监测多个靶标,提升实验的通量和效率。无锡普通基因扩增仪PCR仪价格多少
医疗与临床诊断:疾病检测的 “金标准”1. 病原体快速检测场景:病毒性疾病:(扩增 N 基因 / ORF1ab 基因)、乙肝病毒(HBV-DNA 检测)、HPV 分型(L1 基因扩增);细菌性疾病:结核分枝杆菌(IS6110 基因检测)、淋球菌(隐蔽质粒基因扩增)。技术价值:相比传统培养法,PCR 可缩短检测时间(如结核检测从 2-4 周缩短至 4 小时),且适用于微量样本(如脑脊液、拭子)。设备需求:高通量 96 孔板 PCR 仪,部分场景需搭配核酸提取仪实现自动化检测。2. 遗传疾病筛查场景:产前诊断(如唐氏综合征 21 号染色体三体检测)、新生儿遗传病(囊性纤维化基因 F508del 突变检测)。技术价值:通过扩增目标突变位点,结合测序或酶切分析,实现疾病的早期确诊(如脊髓性肌萎缩症 SMN1 基因缺失检测)。无锡普通基因扩增仪PCR仪价格多少