Nature：从血液通过exosomes入手早期确诊**。原文标题：Glypican-1identifiescancerexosomesanddetectsearlypancreaticcancer。原文摘要：Exosomes are lipid-bilayer-enclosed extracellular vesicles that contain proteins and nucleic acids. They are secreted by all cells and circulate in the blood. Specific detection and isolation of cancer-cell-derived exosomes in the circulation is currently lacking. Using mass spectrometry analyses, we identify a cell surface proteoglycan, glypican-1 (GPC1), specifically enriched on cancer-cell-derived exosomes. GPC1+ circulating exosomes (crExos) were monitored and isolated using flow cytometry from the serum of patients and mice with cancer. GPC1+ crExos were detected in the serum of patients with pancreatic cancer with absolute specificity and sensitivity, distinguishing healthy subjects and patients with a benign pancreatic disease from patients with early- and late-stage pancreatic cancer. Levels of GPC1+ crExos correlate with tumour burden and the survival of pre- and post-surgical patients. 胸水的外泌体怎么制备？浙江分离外泌体要多少钱

    体液样本收集外泌体。1、选择血清还是血浆？推荐大多数研究选择血浆。血液凝固过程中血小板会产生大量外泌体，含量占血清中外泌体的50%以上，选择血浆可避免不必要的影响。2、注意抗凝剂的选择肝素类抗凝剂与PCR假阴性有关，这可能是因为肝素与引物和/或酶有竞争作用。除了***PCR，肝素可以与外泌体结合，阻止细胞摄取外泌体。因此需要记录肝素类药物治疗的患者的血液样本。EDTA和双嘧达莫（CTAD），CTAD可以阻止血小板的***并***其释放外泌体。EDTA可能会干扰PCR反应（尽管其程度小于肝素），但是还是优于其他选择。此外，有研究表明钙螯合剂可在体外促进外泌体与血小板的结合从而降低经EDTA、或柠檬酸盐处理后的血液样本中外泌体的表观数量。使用肝素时这种影响就不会发生，因此建议在测量外泌体的精确数量时选用肝素。但是也有研究表明肝素可以导致体外条件下外泌体的减少。总之，目前尚需要更多的研究论证抗凝剂是否及如何对外泌体的释放，作用和下游反应产生特异性影响。 天津鉴定外泌体多少钱外泌体数据库有哪些？

⊙外泌体发挥功能并一定需要受体细胞摄入外泌体：外泌体的膜蛋白有可能与细胞膜蛋白作用，***细胞内通路

⊙外泌体的角色之一：细胞-细胞通讯，比如抗原递呈

⊙外泌体的角色之二：垃圾箱，外排多余或者无功能的细胞成分

为什么要研究外泌体？：

⊙揭示疾病发病机制：从微环境角度揭示细胞之间通讯促进疾病发生的原因。

⊙寻找疾病诊断和预后的分子标志物

⊙外泌体作为药物载体，实现靶向给药

外泌体的分离和鉴定方法：

⊙外泌体的分离：差速离心、密度梯度离心、体积排阻色谱法、过滤法、聚合物沉淀法、免疫分离、隔离筛选法

⊙外泌体分离后需要进行粒径分析：如NanoSight NS300

⊙外泌体检测的marker：常用的有TSG101、CD9、CD63、CD81、ALIX、HSP70

industryTemplate血浆样品外泌体怎么制备？

    众所周知，成熟的miRNA可以与装配蛋白（assemblyproteins）相互作用，形成一个复合物，称miRISC。miRISC的主要成分包括miRNA、可被miRNA***的mRNA、GW182和AGO2。人类AGO2蛋白，主要结合miRNA5’末端的U或A碱基，能介导mRNA和miRNA结合，介导后续的翻译***或mRNA分子降解。**近研究发现AGO2蛋白和外泌体miRNA分拣机制之间有一种可能的联系。对外泌体蛋白进行分析时，用质谱MS或WBD都有发现AGO2蛋白的存在。Guduric-Fuchsetal.发现敲除了AGO2基因后，会减少那些偏好于进入外泌体的miRNA的类型或丰度，如HEK293T细胞系来源的外泌体中的miR-451,miR-150和miR-142-3p。还有些证据也支持miRISC和外泌体miRNA分拣之间的联系。首先，miRISC的主要成分被发现与MVB（多囊泡小体）有相同定位；其次，阻碍MVB被溶酶体降解会导致miRISC的过度累积，而阻断MVB形成会导致miRISC的丢失；再次，细胞***时出现的miRNA***靶序列水平的变化可能引起外泌体miRNA的分拣。总之，某些miRNA中的特异序列可能指导它们整合入外泌体，而有些酶或其他蛋白质可能也能控制外泌体miRNA的分拣--以一种不依赖于miRNA序列的形式。 做外泌体就找云生物！四川测序外泌体多少钱

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转移的**细胞为适应新环境，沉默了自己的基因，促进**转移灶形成，而沉默基因的正是外泌体中的microRNA。文章概要为：“Microenvironment-induced PTEN loss by exosomal microRNA primes brain metastasis outgrowth”，由外泌体分泌的microRNA引起微环境介导的PTEN丢失，为脑转移生长做了准备。这篇是2015.10.19发表在Nature 上的文章，文章主要讲的是，脑环境依赖的PTEN可回复性表达，受脑内的星形胶质细胞分泌的外泌体中的microRNA调控。浙江分离外泌体要多少钱