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酸化后消失，中和或碱化后又出现，微溶于乙醇；比较大吸收波长（水）。中文名称：荧光素钠中文别名：荧光黄钠；荧光橙红钠；荧光素二钠英文名FLUORESCEINSODIUM等级：BS物性数据编辑播报1.性状：未确定2.密度（g/cm3,25/4℃）：.相对蒸汽密度（g/cm3,空气=1）：未确定4.熔点（oC）：3205.沸点（oC,常压）：未确定6.沸点（oC,8kPa）：未确定7.折射率：未确定8.闪点（oC）：未确定9.比旋光度（o）：未确定10.自燃点或引燃温度（oC）：未确定11.蒸气压（kPa,25oC）：未确定12.饱和蒸气压（kPa,60oC）：未确定13.燃烧热（KJ/mo...

具体实验流程：注：该操作流程通常用来检测转染了萤火虫荧光素酶基因的真核细胞中荧光素酶表达的活性，不适用于对细菌荧光素酶进行检测。1．实验***天，消化并接种细胞（根据具体实验选择合适的细胞）于35mm细胞培养皿，置于5％CO2、饱和湿度的37℃培养箱内培养过夜。2．等细胞密度达到70％时用Luciferase报告基因质粒、LacZ的表达质粒及其它质粒（根据具体实验确定）共转染细胞（根据具体实验选择转染方法，如磷酸钙沉淀法、PEI、lipofectamine2000等均可）。3．转染24－36h后，吸取培养液，用预冷的PBS（无钙和镁离子）洗涤细胞。注：荧光酶的酶促反应会被痕量的钙所抑制...

其中更有代表性的是一种学名为Photinuspyralis的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中，荧光的产生是来自于萤光素的氧化，有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷（ATP）。没有荧光素酶的情况下，萤光素与氧气反应的速率非常慢，而钙离子的存在常?？梢越徊郊铀俜从Γㄓ爰∪馐账醯那榭鱿嗨疲1]荧光生成反应通常分为以下两步：萤光素+ATP→萤光素化腺苷酸（luciferyladenylate）+PPi萤光素化腺苷酸+O2→氧荧光素+AMP+光这一反应非常节省能量，几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯，只有越10%的能量被转化为光，剩余的能量都变为...

luciferin)的分子结构如右图所示：，在氧气、ATP存在的条件下和荧光素酶发生反应，生成氧化荧光素(oxyluciferin)，分子结构如右图所示，并产生长发生光现象。但是该底物荧光素以前大多依赖进口，产品价格昂贵。而且由于该产品容易降解、受潮影响使用效果。所以，需要国产化的方式生产，一方面可以降低成本，一方面可以增强使用效果。作者：科远迪链接：zhuanlan./p/来源：知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权，非商业转载请注明出处。D-luciferin，potassiumsalt荧光素产品说明书发光原理哺乳动物生物发光，一般是将Fireflyluciferase基...

酸化后消失，中和或碱化后又出现，微溶于乙醇；比较大吸收波长（水）。中文名称：荧光素钠中文别名：荧光黄钠；荧光橙红钠；荧光素二钠英文名FLUORESCEINSODIUM等级：BS物性数据编辑播报1.性状：未确定2.密度（g/cm3,25/4℃）：.相对蒸汽密度（g/cm3,空气=1）：未确定4.熔点（oC）：3205.沸点（oC,常压）：未确定6.沸点（oC,8kPa）：未确定7.折射率：未确定8.闪点（oC）：未确定9.比旋光度（o）：未确定10.自燃点或引燃温度（oC）：未确定11.蒸气压（kPa,25oC）：未确定12.饱和蒸气压（kPa,60oC）：未确定13.燃烧热（KJ/mo...

普遍应用于整个生物技术领域，尤其是体内活ti成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。萤光素酶（英文名称：Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，其中更有代表性的是一种学名为Photinuspyrali'的萤火虫体内的萤光素酶，萤火虫发光的腹部或海洋的蓝色发光波浪将大自然中生物发光奇迹呈现于世。在生物化学和分子生物学的早期，这一现象被认为是发展生物分析的有力平台。1991年，Promega发布了di一代萤光素酶分析产品，并启动了基于萤光素酶的进一步创新计划，通过持续致力于...

荧光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中。研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成荧光素酶。间接体外成像是一种强大的研究手段，可以对整个动物体中的细胞群落进行分析：将不同类型的细胞（骨髓干细胞、T细胞等）标记上（即表达）荧光素酶，就可以用高敏感度的CCD相机进行对动物体内进行活ti观察而不会伤害到动物本身。在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以放出荧光，而发出的光子可以被光敏感元件，如荧光探测器或改进后的光学显微镜探测到。这就使得对包括影响在内的多种生命活动进程进行观察成为可能。例如，荧光素酶可以被用于检测血库中所存血液中的红血球是否开始破裂。法医可...

是新型底物开发的一个早期实例。[1]2012NanoLuc?萤光素酶基于定向进化和新型底物开发方面的经验，研究人员从虾的萤光素酶改造设计出一种新型萤光素酶报告基因，即NanoLuc?萤光素酶。这是一种小分子（19kDa）单体酶，具有独特的底物，其灵敏度比已具备高灵敏度的萤火虫或海肾萤光素酶系统高约100倍。这种新型的报告基因有着范围广的应用前景，为进一步的技术开发奠定了基础。[1]2015NanoBRET?技术NanoLuc?的小体积和非常明亮的光输出是作为蛋白质标签的理想特征。这些特征还很适合作为生物发光共振能量转移（BRET）的供体。一项针对各种能量受体荧光基团的深入研究发现，红色...

萤火虫荧光素酶（Luciferase）是一种常用的信号分子，可以用来标记肿瘤细胞.一．细胞方法将带有荧光素luc转酶报告基因的真核表达重组质粒pRc/CMV2-7，利用G418筛选，获得稳染人乳腺哎细胞株MCF-7-luc，并在稳定表达荧光素酶基因的细胞克隆MCF-7体外评价其发光能力。通过建立裸鼠移植瘤模型，利用活题生物发光成像系统检测肿大的瘤生长及转移情况，为下一步监测裸鼠移植瘤对药物作用的变化情从而为分析药物对肿大的瘤的治的好效果提供理想的状况.G418筛选浓度的确定：37℃细胞培养箱中常培养,G418按0、200、400、600、800、1000μg/ml设置6个浓度梯度。在细...

可用荧光素酶检测系统灵敏方便地测定荧光素酶基因的表达。荧光素酶报告基因有许多优点：①非放射性；②比CAT及其他报告基因速度快；③比CAT灵敏100倍；④荧光素酶在哺乳细胞中的半衰期为3小时，在植物中的半衰期为3．5小时。由于半衰期短，故启动子的改变会即时导致荧光素酶活性的改变，而荧光素酶不会积累。相反，CAT在哺乳细胞中的半衰期为50小时。荧光素酶浓度在10—16mol/L（10pS/L）到10-8mol/L（1mg/L）范围内，荧光信号强度与酶浓度成正比。在理想条件下，可检测到l0-20mol/L的荧光素酶。检测步骤：1．用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。2．...

8．取剩余裂解液测定LacZ的活性，其读数作为内标用以矫正荧光素酶的读数。9.用矫正后的读数作图，分析数据。注：荧光素见光易氧化，已稀释未用的荧光素应丢弃。注意事项：1．荧光素酶检测试剂需在15-25℃条件下预平衡后再进行反应，而后依据具体条件进行自动或手动检测。当用液闪计数仪时，加入荧光素酶检测试剂后立即轻轻混匀。2．如果细胞裂解后不能立即对提取物进行检测，样品可以在冰上保存大约5h，在-70℃可保存数月。不要反复冻融以避免酶活性的降低。3．利用上述方法检测冷的样品时，其信号强度将下降5-15%。4．在荧光素酶活性较高的情况下，导致信号超出线性范围（信号溢出）可用裂解液将样品进行稀释...

通过开发新的方法来改变萤火虫萤光素酶检测的信号动力学，例如Bright-Glo?、Steady-Glo?和Dual-Glo?允许使用微孔板进行检测。而“加样-读数”的形式简化了样品处理，并实现了在非常高通量的应用中使用报告基因检测。[1]随着UltraGlo?萤光素酶的发展，现在已经实现了“加样-读数”的ATP检测方法。ATP是细胞健康的重要指标，这使得CellTiter-Glo?能有效测定细胞活力，尤其是在高通量应用中。该检测原理还促进了其它ATP检测平台的诞生，尤其是用于研究ATP酶（如激酶）的Kinase-Glo?（2004年）和ADP-Glo?（2009年）酶检测系统。[1]2...

SodiumSalt/D荧光素钠盐分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O分子量：g/mol纯度：高级纯（）应用：1）体外化学发光分析（invitro）；2）***成像实验（invivo）；3）高灵敏度ATP分析；步骤：Protocol1：InVitroBioluminescentAssays/体外生物发光检测1）用mL蒸馏水溶解gD-荧光素钠盐，配制成100mM的储存液（200×，浓度30mg/ml）?；煸群罅⒓词褂没蚍肿昂?20℃冻存。2）用组织培养基1∶200稀释储存液，配置工作液(终浓度150μg/mL)。3）去除培养细胞的培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加1×荧光素工作...

酸化后消失，中和或碱化后又出现，微溶于乙醇；比较大吸收波长（水）。中文名称：荧光素钠中文别名：荧光黄钠；荧光橙红钠；荧光素二钠英文名FLUORESCEINSODIUM等级：BS物性数据编辑播报1.性状：未确定2.密度（g/cm3,25/4℃）：.相对蒸汽密度（g/cm3,空气=1）：未确定4.熔点（oC）：3205.沸点（oC,常压）：未确定6.沸点（oC,8kPa）：未确定7.折射率：未确定8.闪点（oC）：未确定9.比旋光度（o）：未确定10.自燃点或引燃温度（oC）：未确定11.蒸气压（kPa,25oC）：未确定12.饱和蒸气压（kPa,60oC）：未确定13.燃烧热（KJ/mo...

可用荧光素酶检测系统灵敏方便地测定荧光素酶基因的表达。荧光素酶报告基因有许多优点：①非放射性；②比CAT及其他报告基因速度快；③比CAT灵敏100倍；④荧光素酶在哺乳细胞中的半衰期为3小时，在植物中的半衰期为3．5小时。由于半衰期短，故启动子的改变会即时导致荧光素酶活性的改变，而荧光素酶不会积累。相反，CAT在哺乳细胞中的半衰期为50小时。荧光素酶浓度在10—16mol/L（10pS/L）到10-8mol/L（1mg/L）范围内，荧光信号强度与酶浓度成正比。在理想条件下，可检测到l0-20mol/L的荧光素酶。检测步骤：1．用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。2．...

更为人所知的发光生物是萤火虫，而其所采用不同的荧光素酶与其他发光生物如荧光菇（发光类脐菇，Omphalotusolearius）或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中，发光反应所需的氧气是从被称为腹部气管（abdominaltrachea）的管道中输入。一些生物，如叩头虫，含有多种不同的荧光素酶，能够催化同一荧光素底物，而发出不同颜色的荧光。萤火虫有2000多种，而叩甲总科（包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫）则有更多，因此它们的荧光素酶对于分子系统学研究很有用。目前研究得更透彻的荧光素酶是来自Photinini族萤火虫中的北美萤火虫（Photinuspyralis）。免疫荧光法免疫荧光法的基本...

海肾萤光素酶因其底物要求和光输出方面的差异而可用于双重报告检测。Amplite?海肾荧光素酶报告基因测定Amplite?Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒提供了一种快速，灵敏的方法，可以使用专有的发光配方在基于细胞的检测中检海肾萤光素酶的活性，与海肾萤光素酶相互作用后，该试剂产生具有强光的产物。Amplite?海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒特点：该测定法与标准细胞生长培养基兼容该试剂盒可以测量野生型和合成hRluc基因的原始表达或基因表达每个试剂盒均包含可以方便96孔和384孔板检测所必不可少的组分。荧光素酶是生物体内催化荧光素等物质氧化发光的一类酶的总称。自然界中，不同的发光生...

或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10min，然后进行图像分析。2.***成像分析1）用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液，混匀。2）用μm滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。4）注射入体内10-15min（待光信号达到更强稳定平台期）后进行成像分析。注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而...

荧光素也就是FDAFDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较BCECF或Calcein的亲水性低，因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。FDA也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别为488nm和530nm。荧光素酶（英文名称：Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，其中更有代表性的是一种学名为Photinuspyralis的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中，荧光的产生是来自于萤光素的氧化，有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷（ATP）。没有荧光素酶的情况下，萤光素与氧气反应的速率非常慢，而钙离子的存在常?？梢越徊郊铀俜从Γㄓ爰∪馐账醯那榭鱿?..

常见的荧光素酶有两种，分别是萤火虫荧光素酶（fireflyluciferase，编码基因是luc）和海肾荧光素酶（Renillaluciferase，编码基因是Rluc），前者的底物是D-Luciferin，后者的底物是Coelenterazine。它们共同的作用原理是在ATP和荧光素酶的催化作用下，底物被氧化发光（不同底物光的颜色和波长不同），当底物过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。***成像技术（opticalinvivoimaging）目前主要采用生物发光（bioluminescence）与荧光（fluorescence）两种技术，生物发光法是基于荧光素酶能催化底...

2）按10μL/g体重的浓度向每支小鼠注射相应量的15mg/mL荧光素溶液；3）腹腔注射10-15min后进行成像分析。（对每只动物模型做荧光素动力学研究以确定峰值信号获取时间）Firefly,freeacid/D-萤火虫荧光素分子式：C11H8N2O3S2分子量：g/mol外观：白色至浅黄色粉末溶解：，形成近乎无色至浅黄色的清夜保存：-15°C避光应用：1）活细胞、组织或生物体内luc标记基因和荧光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析；2）***用于报告基因分析，免疫分析和ATP荧光卫生监测分析D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种...

荧光素也就是FDAFDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较BCECF或Calcein的亲水性低，因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。FDA也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别为488nm和530nm。荧光素酶（英文名称：Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，其中更有代表性的是一种学名为Photinuspyralis的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中，荧光的产生是来自于萤光素的氧化，有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷（ATP）。没有荧光素酶的情况下，萤光素与氧气反应的速率非常慢，而钙离子的存在常常可以进一步加速反应（与肌肉收缩的情况相...

D-荧光素钾盐是一种化学品。中文别名:(S)-4,5-二氢-2-(6-羟基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸钾盐英文别名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxybenzothiazol-2-yl)thiazole-4-carboxylicacidpotassiumsalt产品描述D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域，特别是体内活题成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素底物能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Lu...

注意事项1）本品（fireflyluciferin）和甲虫荧光素（beetleluciferin）、萤光素钾盐只是不同别名，以CAS号115144-35-9为准。2）注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定更佳信号平台期和更佳的检测时间。3）如果要进行ATP的检测，尽量避免外源ATP的污染，如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材，在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。4）为避免反复冻融，本产品配制成溶液后建议适当分装后-20℃或-80℃保存。为防止氧化，如有条件，可以对储存液充氮气或氩气后保存。5）对于检测灵敏度要求特别...

后者能够易溶于水或缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。产品性质运输和保存运输条件：4℃冰袋运输；短期保存：4℃干燥避光长期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期长期保存：有效期一年工作液：先用现配使用方法1.体外生物发光检测1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30mg/mL的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵...

按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射，以小鼠为例，每只小鼠体重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入体内10-15min（待光信号达到更强稳定平台期）后进行成像分析。注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定更高信号检测时间和信号平台期。注意事项1）本品（fireflyluciferin）和甲虫荧光素（beetleluciferin）、萤光素钾盐只是不同别名，以CAS号115144-35-9为准。2）注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定更佳信号平台期和更佳的检测时间。3）如果要进行ATP的检测，尽...

每孔加入100μl养24h后，Luciferin使其终浓度为150μg/ml，PBS，再加入D-立即用活题成像系统检测，分析发光强度与细胞数之间的相关性。4)细胞生长曲线绘制MCF7-luc细胞和作为对照取表达荧光素酶的MCF-7细胞，接种于24孔板，接种密度为2×104/孔。细胞接种后1～7d，每天胰蛋白酶消化其中3孔细胞，用细胞计数仪测定细胞数。以细胞生长天数为横坐标，细胞数目为纵坐标，分别绘制两种细胞生长曲线。二．动物模型BLAB/c裸鼠皮下移植瘤模型的建立BLAB/cnu/nu裸鼠，4～5周龄，体重（15±2）g，雌雄各3只。取对数生长期的MCF-7用PBS重悬为2．5×10/...

产品描述D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域，特别是体内***成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素底物能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的慢病毒转染入细胞后构建稳定表达细胞株，构建原位**模型，之后注入荧光素底物，通过IVIS系统来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或进行药物药效评价等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。注：在抗**药物药效评价试验中，由于生物...

4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10min，然后进行图像分析。2.活ti成像分析1）用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液，混匀。2）用μm滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射，以小鼠为例，每只小鼠体重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入体内10-15min（待光信号达到更强稳定平台期）后进行成像分析。注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定更高信号检测时间和信号平台期。注意事项1）本品（firefly...

荧光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中。研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成荧光素酶。间接体外成像是一种强大的研究手段，可以对整个动物体中的细胞群落进行分析：将不同类型的细胞（骨髓干细胞、T细胞等）标记上（即表达）荧光素酶，就可以用高敏感度的CCD相机进行对动物体内进行活ti观察而不会伤害到动物本身。在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以放出荧光，而发出的光子可以被光敏感元件，如荧光探测器或改进后的光学显微镜探测到。这就使得对包括影响在内的多种生命活动进程进行观察成为可能。例如，荧光素酶可以被用于检测血库中所存血液中的红血球是否开始破裂。法医可...