蛋白质翻译后修饰组学技术原理:首先将蛋白样本酶解成肽段混合物,然后使用液相色谱对酶解后的肽段混合物进行组分分离以降低样本复杂程度,然后通过高质量的修饰类抗体和生物材料对修饰肽段进行富集,之后上样至液相色谱 - 串联质谱中进行分析,通过相应的数据库检索匹配,一次可鉴定成百上千个修饰位点。蛋白质磷酸化位点分析样品经酶解后,用 TiO2 微球对磷酸化肽段进行富集,富集后的产物由质谱分析,并通过软件完成数据检索。琥珀酰化修饰蛋白质组技术特点:采用主流抗体亲和富集方法,特异性高,富集效率好。蛋白质翻译后修饰几乎参与了细胞所有正常生命活动的过程。浙江蛋白质琥珀酰化修饰组学有哪些
翻译后修饰蛋白组分析:蛋白质翻译后修饰是影响蛋白质功能并调节整个细胞过程的重要方式,几乎在每个细胞过程中都是不可或缺的。分析和鉴定翻译后修饰蛋白质对揭示蛋白质的功能和深入了解各种生理现象具有重要意义。大多数翻译后修饰蛋白以低化学计量和丰度存在,这限制了在分析全细胞裂解液时对其的检测。蛋白质是各种细胞功能比较重要的执行者,其功能正常与否决定着生命活动能否有序、高效的进行,而其中翻译后修饰起着至关重要的作用。翻译后修饰改变了蛋白质中不同氨基酸残基上的生物化学官能团,进而改变其化学性质或结构,使得蛋白质具有更为复杂的结构和更为完善的功能,实现更为精细的调节。蛋白质的翻译后修饰过程极其复杂,已知的翻译后修饰种类有20多种。但其中较为常见的主要是磷酸化、泛素化、SUMO化、酰(含乙酰)化、甲基化以及糖基化。济南亚硝基化修饰蛋白质组学质谱鉴定蛋白质翻译后修饰组学有什么重要的作用呢?
泛素化修饰蛋白质组学的作用:泛素化、心血管等疾病的发病密切相关。因此,作为近年来生物化学研究的一个重大成果,它已然成为研究、开发新药物的新靶点。技术原理是首先将蛋白样本酶解成肽段混合物,然后使用液相色谱对酶解后的肽段混合物进行组分分离以降低样本复杂程度,然后通过高质量的泛素化修饰抗体和生物材料对修饰肽段进行富集,之后上样至液相色谱-串联质谱中进行分析定量。技术优势:高特异性的修饰抗体;高分辨率、高灵敏度质谱仪;鉴定通量高;可与代谢组学等进行多组学联合分析。
蛋白质乙酰化修饰组学:乙酰化修饰是指在酶或非酶作用下,将乙酰CoA的乙酰基基团转移至蛋白质氨基酸的残基上。蛋白质乙酰化也是一种可逆的酶促反应过程。乙酰基转移酶可以将乙酰基团(CH3C=O)从乙酰辅酶A转移至蛋白质。同理,去乙酰化酶则可以逆转这种反应。蛋白质上的赖氨酸乙酰化是细胞内一种重要的PTMs过程。不仅发生在细胞核内组蛋白、转录因子等上,在细胞质和线粒体中也存在着诸多蛋白的乙酰化修饰。在植物研究领域内,乙酰化修饰主要参与植物光合作用、生长发育、胁迫响应等过程。在医学领域,乙酰化修饰可调节人体内某种代谢酶,控制糖尿病,这一发现为糖尿病干预与疗理带来新的希望。磷酸化修饰蛋白质组学是原核生物和真核生物中比较重要的调控修饰形式。
泛素化修饰蛋白质组技术原理:首先将蛋白样本酶解成肽段混合物,然后使用液相色谱对酶解后的肽段混合物进行组分分离以降低样本复杂程度,然后通过高质量的泛素化修饰类抗体和生物材料对修饰肽段进行富集,之后上样至液相色谱-串联质谱中进行分析定量。技术优势:1、高特异性的修饰类泛抗体;2、高分辨率、高灵敏度质谱仪;应用领域:泛素化修饰还参与了细胞周期、增殖、细胞凋亡、分化、转录调控、基因表达、转录调节、信号传递、损伤修复、炎症免疫等几乎一切生命活动的调控。泛素化心血管等疾病的发病密切相关。因此,作为近年来生物化学研究的一个重大成果,它已然成为研究、开发新药物的新靶点。蛋白质的N-糖基化位点修饰是重要的蛋白质翻译后修饰之一。济南亚硝基化修饰蛋白质组学质谱鉴定
翻译后修饰是指对翻译后的蛋白质进行共价加工的过程。浙江蛋白质琥珀酰化修饰组学有哪些
蛋白质的甲基化修饰 :蛋白质的甲基化(methylation)是指将甲基酶促转移到蛋白质的某个残基上,通常是赖氨酸或精氨酸,也包括组氨酸、半胱氨酸和天冬酰胺等。蛋白质的甲基化是一种普遍的修饰,在大鼠肝细胞核的总蛋白提取物中,大约2%的精氨酸残基是二甲基化的。蛋白质甲基化经常与乙酰化并列,因为它们都是常见的表观遗传修饰,经常发生在组蛋白上。不过从化学反应的角度来看,乙酰化可以算作一种短链脂酰化修饰,这里主要讨论甲基化方面的问题。浙江蛋白质琥珀酰化修饰组学有哪些