转录组测序推荐的测序数据量?转录组测序所需数据量与所研究物种的基因组大小有关,基因组越大,则所需数据量越大。按照我们的经验来说:常规物种一般建议6G数据即可;基因组较大的物种推荐8G以上数据,比如:小麦建议10G数据起,甘蔗、甘薯建议至少8G数据。转录组测序必须做生物学重复么?需要几个重复?生物学重复是生物实验所必须的,转录组测序也不例外,至少3 次生物学重复。准备生物重复样品时,通过对实验的预先设计和控制,尽可能将与实验处理无关的背景条件控制在同一水平,减少批次效应对结果的影响。转录组学可应用于疾病标志物筛查、疾病的诊断和分型、疾病复发诊断。杭州全转录学组技术分析
转录组学应用领域:海洋水产:生长发育机制,渔业资源,渔业环境与水产品安全等;微生物:致病机理,耐药机制,病原体-宿主相互作用研究等;生物医药:生物标志物,疾病机理机制,疾病分型,药物开发,个性化医治等;环境科学:发酵过程优化,生物燃料生产,环境危害风险评估研究等;食品科学:食品储藏及加工条件优化,食品组分及品质鉴定,功能性食品开发,食品安全监检测等。转录组是特定发育阶段或生理条件下细胞内的完整转录信息的汇合,表示了基因表达的中间状态。江苏全转录学组研究广义转录组学是指生命单元(通常是一种细胞)中所有按基因信息单元转录和加工的RNA分子。
RNA-Seq转录组学的应用:RNA-Seq即对转录组进行测序和分析。一般来说在研究所会委托公司测序得到数据自己进行后续的生信分析(质控,mapping,差异基因表达分析,SNV分析等)。RNA-Seq有着巨大的应用前景。在不同背景下比较mRNA水平同一物种,不同组织:研究基因在不同部分的表达情况。同一物种,同一组织:研究基因在不同处理下,不同条件下的表达变化。同一组织,不同物种:研究基因的进化关系。时间序列实验:基因在不同时期的表达情况与发育的关系?;蚍掷啵赫业较赴匾?,疾病相关,处理相关的基因表达模式,用于诊断疾病和预测等。基因网络和通路:基因在细胞活动中的功能,基因间的相互作用。
单细胞转录组关键步骤:单细胞的分离和捕获:温和分离,稀有细胞。转录本的捕获和扩增:RNA测序需要0.1-1.0ugtotalRNA,捕获效率10%(5-**NA测序需要1ngDNA,极限稀释加移液分离单细胞;显微操作分选单细胞;流式分选带有表面Marker的单细胞;激光切割实体组织;微流控技术;磁珠捕获,主要用于CTC。它的一个优点是可以结合流式细胞荧光分?。‵ACS,fluorescentactivatedcellsorting)根据表面Marker分选细胞。因此特别适合分选细胞子集用于测序。它的另一个优点是可以获得细胞形态全览图,提供另外一个维度的信息,可用于鉴定微孔中是否有损伤的细胞或双份细胞,主要缺点是通量低且每个细胞所需的工作量相当大。转录组学是一门在整体水平上研究细胞中基因转录的情况及转录调控规律的学科。
转录组学测序类型:1.根据RNA种类:可以分为mRNA测序,SmallRNA测序,LncRNA测序、CircRNA测序、全转录组测序等。2.根据物种特点:比如真核生物或者原核生物,是否有参考基因组,测序平台的不同,分为真核有参和无参转录组测序,原核转录组测序,全长转录组测序等。3.根据相互关系:分为互作转录组,比较转录组等等;此外,基因组甲基化会影响到基因的转录调控,也属于转录调控测序范畴;还有用于研究转录因子与DNA的交互作用或组蛋白修饰在基因组上的分布的ChIP-Seq,研究RNA与蛋白互作关系的RIP-Seq,以及研究RNA甲基化的MeRIP-Seq等。宏转录组学以生态环境中的全部RNA为研究对象,避开了微生物分离培养困难的问题。mRNA-seq转录组学研究内容
转录组即一个活细胞所能转录出来的所有RNA的总和,是研究细胞表型和功能的一个重要手段。杭州全转录学组技术分析
单细胞转录组关键步骤:单细胞的分离和捕获:温和分离,稀有细胞。转录本的捕获和扩增:RNA测序需要0.1-1.0ug total RNA,捕获效率10%(5-**NA测序需要1ng DNA,极限稀释加移液分离单细胞;显微操作分选单细胞;流式分选带有表面Marker的单细胞;激光切割实体组织;微流控技术;磁珠捕获,主要用于CTC。单细胞转录组学基本概念:普通转录组的思路也可以应用到单细胞转录组。普通转录组相当于把一群细胞混合到一起去提取RNA,获得的是每个细胞中RNA表达量的平均值。单细胞是把每个细胞单独分出来去提取RNA,然后建库测序,获得是是单个细胞的表达值。在每个细胞里面基因的表达具有随机性,且存在异质性。杭州全转录学组技术分析