转录组学的概念:转录组是指特定组织或细胞在某一发育阶段或功能状态下转录出来的所有RNA的汇合,包括蛋白质编码的信使RNA和非编码RNA(rRNA、tRNA和其他ncRNAs),高通量测序技术也被称为下一代测序(NGS)技术,推进了基因组学的研究进展。该项新技术除了研究静态基因组,近年来也开始应用于动态转录分析,由此衍生的技术称为RNA序列分析(RNA-seq)随着DNA基因芯片技术的快速发展,开创了这个病症近十年的高通量转录组研究。RNA-Seq技术可以从转录水平检测瘤中的改变基因。通过相关软件分析,鉴定相关改变基因在瘤发生的发展中所起的作用。然后经过刷选,进一步挑选出相关靶基因进行实验研究,有望为瘤的基因医治提供新的靶点。转录组是干什么用的,和表达谱有什么区别?上海外泌体转录组学技术分析
宏转录组学适用范围包括人体微生态、环境、工业、农业等领域。宏转录组学以生态环境中的全部RNA为研究对象,避开了微生物分离培养困难的问题,能有效的扩展微生物资源的利用空间。应用领域:包括肠道微生物、口腔微生物、粪便微生物、人体组织微生物。宏转录学组的概念:宏转录组是特定时期、环境样本、组织样本中所有的微生物的RNA(转录本)的汇合。通过对这些转录本进行大规模高通量测序,可以直接获得环境中可培养和不可培养的微生物转录组信息。上海宏转录学组分析鉴定转录学组测序可对任意物种的整体转录活动进行检测。
转录组分析是目前应用比较广的高通量测序分析技术之一。常见设计是不同样品之间比较,寻找差异基因、标志基因、协同变化基因、差异剪接和新转录本,并进行结果可视化、功能注释和网络分析等。转录组的测序分析也相对成熟,从RNA提取、构建文库、上机测序再到结果解析既可以自己完成,又可以在专业公司进行。概括来看转录组的分析流程比较简单,序列比对-转录本拼接(可选)-表达定量-差异基因-功能富集-定制分析。整个环节清晰流畅,可以作为刚开始接触高通量测序学习比较合适的技术之一。
单细胞转录组关键步骤:单细胞的分离和捕获:温和分离,稀有细胞。转录本的捕获和扩增:RNA测序需要0.1-1.0ugtotalRNA,捕获效率10%(5-**NA测序需要1ngDNA,极限稀释加移液分离单细胞;显微操作分选单细胞;流式分选带有表面Marker的单细胞;激光切割实体组织;微流控技术;磁珠捕获,主要用于CTC。它的一个优点是可以结合流式细胞荧光分选(FACS,fluorescentactivatedcellsorting)根据表面Marker分选细胞。因此特别适合分选细胞子集用于测序。它的另一个优点是可以获得细胞形态全览图,提供另外一个维度的信息,可用于鉴定微孔中是否有损伤的细胞或双份细胞,主要缺点是通量低且每个细胞所需的工作量相当大。转录组学可应用于植物生长机制的发现及干预。
RNA-Seq转录组学技术优势:RNA-seq技术可以检测到低水平表达、未识别的转录子和新拼接亚型基因。另一方面,与基因芯片相比,RNA-Seq有一个更广的检测动态范围,可以研究编码和非编码RNA,更易于基因网络的构建、发现选择性剪切转录物,检测到等位基因的具体表达方式,也可以用来提取基因型信息。在RNA-Seq单细胞研究中,一个主要优势是可以分析整个转录序列,而不是有限制数量的基因,并且,研究DNA和RNA的方法并不是相互排斥的,他们可以相互结合使用,产生更多的生物学上重要的信息。转录组学测序可以同时测到mRNA、lncRNA、micRNA以及circRNA么?武汉高通量转录组学分析研究
基于高通量测序平台的转录组学测序技术能够全方面获得物种特定组织的转录本信息。上海外泌体转录组学技术分析
转录组学应用领域:海洋水产:生长发育机制,渔业资源,渔业环境与水产品安全等;微生物:致病机理,耐药机制,病原体-宿主相互作用研究等;生物医药:生物标志物,疾病机理机制,疾病分型,药物开发,个性化医治等;环境科学:发酵过程优化,生物燃料生产,环境危害风险评估研究等;食品科学:食品储藏及加工条件优化,食品组分及品质鉴定,功能性食品开发,食品安全监检测等。转录组是特定发育阶段或生理条件下细胞内的完整转录信息的汇合,表示了基因表达的中间状态。上海外泌体转录组学技术分析