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哈尔滨RNA转录组学服务

来源: 发布时间:2022-04-15

单细胞RNA-seq转录组学工作流程:单细胞RNA测序等高通量单细胞转录组学技术通常从针对不同瘤和组织类型(解离、分选和分离细胞等)量身定制的实验工作流程开始,然后产生可以比对的序列,量化、质量控制(QC)过滤和以不同方式标准化,以实现许多下游计算分析,例如聚类分析以识别转录不同的细胞类型和亚群,等位基因分析以识别单核苷酸变异(SNV,用星号表示)或拷贝数变体(CNV)、轨迹分析、剪接检测或瘤的微环境(TME)相互作用的推断中。单细胞转录组学数据的分析通常因精心设计的研究设计而变得复杂,这些设计可能包括来自患病和未患病个体的样本、在不同时间点(例如,诊疗前和诊疗后)收集的同一个人的多个样本,或来自表现出不同疾病状态的不同个体的多个样本。这样的研究设计可以发现患者共享的转录特征,这些特征可能定义疾病中常见的干扰分子途径。转录组学可应用于植物生长机制的发现及干预。哈尔滨RNA转录组学服务

RNA-seq转录组学技术优势有:1、可以直接测定每个转录本片段序列、单核苷酸分辨率的准确度;2、灵敏度高,可以检测细胞中少至几个拷贝的稀有转录本;3、可以对任意物种进行全基因组分析,能够检测未知基因,发现新的转录本,并准确地识别可变剪切位点及cSNP,UTR区域;4、检测范围广,能够同时鉴定和定量稀有转录本和正常转录本。RNA-seq转录组学是需要生物学重复的,至少需要两次生物学重复,3次以上的生物学重复更好。以3个重复为例,加上对照的三个生物学重复,一次RNA-seq需要6个样本。哈尔滨RNA转录组学服务转录学组测序能够提供更高的检测通量。

转录组学测序类型:1.根据RNA种类:可以分为mRNA测序,SmallRNA测序,LncRNA测序、CircRNA测序、全转录组测序等。2.根据物种特点:比如真核生物或者原核生物,是否有参考基因组,测序平台的不同,分为真核有参和无参转录组测序,原核转录组测序,全长转录组测序等。3.根据相互关系:分为互作转录组,比较转录组等等;此外,基因组甲基化会影响到基因的转录调控,也属于转录调控测序范畴;还有用于研究转录因子与DNA的交互作用或组蛋白修饰在基因组上的分布的ChIP-Seq,研究RNA与蛋白互作关系的RIP-Seq,以及研究RNA甲基化的MeRIP-Seq等。

转录组学测序比其他研究方法有哪些优势?转录组学测序具有以下优势:(1)可以直接测定每个转录本片段序列、单核苷酸分辨率的准确度,同时不存在传统微阵列杂交的荧光模拟信号带来的交叉反应和背景噪音问题;(2)灵敏度高,可以检测细胞中少至几个拷贝的稀有转录本;(3)可以对任意物种进行全基因组分析,无需预先设计特异性探针,因此无需了解物种基因信息,能够直接对任何物种进行转录组分析,同时能够检测未知基因,发现新的转录本,并准确地识别可变剪切位点及cSNP,UTR区域。(4)检测范围广,高于6个数量级的动态检测范围,能够同时鉴定和定量稀有转录本和正常转录本。以DNA为模板合成RNA的转录过程是基因表达的第一步,也是基因表达调控的关键环节。

全转录组测序为什么需要构建两个文库?全转录组测序需要构建2个测序文库,一个小RNA文库和一个去除核糖体RNA的链特异性文库,然后分别上机测序。小RNA长度较短,一般小于50nt,采用测序策略为50SE。其他三类RNA序列一般大于200,通常在1000以上,可达几万,通过片段化构建150PE测序文库。然后小RNA文库可以获得miRNA序列信息,去核糖体的链特异性文库可以获得mRNA、lncRNA和circRNA的序列信息。转录组学即特定细胞在某一功能状态下转录出来的所有RNA的总和,包括mRNA和非编码RNA。转录组学广义上指在某一生理条件下,细胞内所有转录组产物的组合。哈尔滨RNA转录组学服务

转录组学可应用于基因点突变及多态性检测。哈尔滨RNA转录组学服务

宏转录组学适用范围包括人体微生态、环境、工业、农业等领域。宏转录组学以生态环境中的全部RNA为研究对象,避开了微生物分离培养困难的问题,能有效的扩展微生物资源的利用空间。应用领域:包括肠道微生物、口腔微生物、粪便微生物、人体组织微生物。宏转录学组的概念:宏转录组是特定时期、环境样本、组织样本中所有的微生物的RNA(转录本)的汇合。通过对这些转录本进行大规模高通量测序,可以直接获得环境中可培养和不可培养的微生物转录组信息。哈尔滨RNA转录组学服务

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