蛋白质翻译后修饰:蛋白质的翻译后修饰通过可逆的共价键将小分子或蛋白质与底物蛋白质上特定的氨基酸结合,调控着底物的酶活性、功能以及三级结构的变化。各种蛋白质翻译后修饰在信号通路和网络中发挥着重要的作用,翻译后修饰系统的紊乱将导致一系列疾病的发生。通过实验的方法鉴定蛋白质翻译后修饰的位点需要耗费大量的资金和时间,并且酶反应的优化常常难以实现。而计算的方法则能够快速、准确的预测酶特异性的底物蛋白质及其修饰位点。蛋白质修饰位点能够影响蛋白的多种属性,包括蛋白质折叠、活性以及之后的功能。广州蛋白质甲基化修饰组学有哪些类型
乙酰化修饰蛋白组学应用方向:1、乙酰化修饰与细胞基因表达调控、表观调控、细胞凋亡、细胞代谢、信号转导、蛋白质稳定性等生理过程研究。2、乙酰化引起的代谢疾病、代谢紊乱发生等疾病机理研究。乙酰化生物学意义:1、调节DNA-蛋白、蛋白-蛋白相互作用;2、与其他PTMs发生crosstalk;3、调节酶活性;4、调控蛋白亚细胞定位。生物领域各个研究方面,如:1、农林领域:抗逆胁迫机制,生长发育机制,育种保护研究等;2、 畜牧业:肉类及乳品质研究,致病机理研究等。山东琥珀酰化修饰蛋白质组学质谱鉴定蛋白质磷酸化修饰的免疫印迹技术优点:能够特异鉴定单个磷酸化位点。
根据不同的作用位点,蛋白质乙酰化修饰分为:发生在蛋白N端的乙酰化修饰、发生在蛋白赖氨酸上的乙酰化修饰。前者发生在90%以上的真核生物新生蛋白上,对于新生蛋白的成熟和细胞定位非常重要,由N乙酰转移酶(NATs)负责;而后者是一个可逆的过程,主要由赖氨酸乙酰化酶(KATs)和赖氨酸去乙酰化酶(KDACs),赖氨酸的乙酰化修饰是我们目前研究的重点。蛋白质磷酸化修饰应用领域:应用在食品工业方面,通过人工翻译磷酸化修饰的蛋白可以普遍用于各种食用蛋白质的改性,以改善蛋白质品质。如,花生蛋白、大豆蛋白、小麦面筋蛋白等。在人工磷酸化修饰的方法下,也可以研究各种蛋白质的功能和相关代谢途径的调控。在医学领域,蛋白质的磷酸化紊乱,会导致细胞周期调控异常,因此,病理的形成与蛋白质的磷酸化异常也有很大相关性。其分子机制问题对于病症等重大疾病的研究具有相当的指导意义,这也是指当之无愧地成为生物学研究领域中的热点。
蛋白质乙酰化修饰鉴定流程:1. 组织/细胞破碎,提取、提纯目的蛋白质。2. 使用胰蛋白酶将目的蛋白酶解成多肽片段。3. 使用高效特异性乙酰化抗体对乙酰化修饰肽段进行免疫富集。4. 使用LC-MS/MS对富集的乙酰化肽段进行鉴定分析。5. 数据分析,并对鉴定的乙酰化位点的生物学功能进行解释预测。随着蛋白质组研究的发展,我们越来越深刻地意识到,对于生物体生命活动的管理和调控过程,密切相关的不只是单个蛋白质层面的修饰状态,更重要的是研究蛋白质组学水平研究在翻译后修饰的动态变化。高质、高效的蛋白质翻译后修饰富集技术和丰富的、准确的定量手段使得研究蛋白质水平的翻译后修饰组学成为现实,借助这些组学研究手段能够实现不同生理病理状态下生物样本在翻译后修饰水平上的定量比较,深入地揭示翻译后修饰水平的波动与生物生命活动的密切联系。蛋白质的磷酸化修饰是生物体内重要的共价修饰方式之一。
蛋白磷酸化检测方法:质谱检测方法优势:1. 准确度高,能够同时检测多个蛋白的多个磷酸化位点。2. 适用于大规模分析蛋白磷酸化水平。3. 不依赖于磷酸化抗体。在实际应用中,Western Blot与质谱分析方法各有各的好,谁也无法完全被另一种方法所替代。所以在选择测定磷酸化修饰的时候还应该根据具体需要来决定。如果研究的蛋白正好有商业化的磷酸化抗体,那么lucky you,你可以选择Western Blot进行快速磷酸化测定研究。但是如果你所研究的蛋白质没有可用的商业化磷酸抗体,或是抗体价效过低,亦或是需要大规模地检测细胞内磷酸化蛋白的水平的话,质谱检测会是更好地选择。蛋白质翻译后修饰的作用主要是改变蛋白质的定位。贵阳丙酰化修饰蛋白质组学分析
常见的蛋白质翻译后修饰包括乙酰化。广州蛋白质甲基化修饰组学有哪些类型
翻译后修饰蛋白组分析:蛋白质翻译后修饰是影响蛋白质功能并调节整个细胞过程的重要方式,几乎在每个细胞过程中都是不可或缺的。分析和鉴定翻译后修饰蛋白质对揭示蛋白质的功能和深入了解各种生理现象具有重要意义。大多数翻译后修饰蛋白以低化学计量和丰度存在,这限制了在分析全细胞裂解液时对其的检测。因此,要在蛋白质组学的范围内表征翻译后修饰蛋白,纯化方法是必要的,以分离修饰蛋白和肽段,然后再进行后续分析。后续分析一般采用质谱技术进行,可以对翻译后修饰蛋白组进行定性和定量研究。广州蛋白质甲基化修饰组学有哪些类型