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江苏蛋白质泛素化修饰组学质谱鉴定

来源: 发布时间:2022-03-31

蛋白质-蛋白质相互作用是蛋白质发挥功能的主要机制之一,在DNA损伤修复,自噬和代谢等过程中都扮演着非常重要的角色,蛋白相互作用异常便会导致疾病的发生.在蛋白质的赖氨酸,丝氨酸和苏氨酸等氨基酸残基上,可发生甲基化,乙酰化,磷酸化和泛素化等200多种翻译后修饰,这些修饰通常能改变蛋白质的电性,疏水性和空间结构等属性,为与之结合的蛋白提供结合的锚定或产生位阻效应,像一把开关在时空上精确调控蛋白质-蛋白质相互作用的发生以及动态变化.结构研究表明,蛋白质之间的相互作用通常由临近的几个氨基酸残基直接结合,替换该区域的氨基酸残基,通常能破坏结合,使其失去部分功能或酶活性,可以针对性地开发和设计抑制剂,用于疾病的诊疗。乙酰化修饰是原核和真核生物所共有的一种翻译后修饰类型。江苏蛋白质泛素化修饰组学质谱鉴定

蛋白质磷酸化修饰组学技术:蛋白质的磷酸化修饰是生物体内重要的共价修饰方式之一。磷酸化修饰本身所具有的简单、灵活、可逆的特性,以及磷酸基团的供体ATP的易得性,使得磷酸化修饰被真核细胞所选择接受成为一种普遍的调控手段。蛋白质的磷酸化和去磷酸化这一可逆过程,几乎调节着包括细胞的增殖、发育、分化、细胞骨架调控、细胞凋亡、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢发生等生命活动的过程,并且可逆的蛋白质磷酸化是目前所知道的主要的信号转导方式。目前已经知道有许多人类疾病是由于异常的磷酸化修饰所引起,而有些磷酸化修饰却是某种疾病所导致的后果。四川泛素化修饰蛋白质组学主要技术质谱是蛋白质翻译后修饰检测的常用技术之一。

蛋白质乙酰化修饰定义:蛋白质在细胞中经过翻译后,到被运输到相应的细胞器并且发生特定的生物学作用前会经过很重要的一步加工,那就是蛋白质翻译后修饰加工。蛋白质翻译后修饰的作用主要是改变蛋白质的活性、定位或功能。通过蛋白质翻译后修饰也进一步增加了细胞通路机制和生命活动的多样性和复杂性。常见的蛋白质翻译后修饰包括磷酸化,乙酰化,糖基化,泛素化等。蛋白质乙酰化修饰,顾名思义指的就是在蛋白质原有基础上面嫁接上乙酰化基团。在细胞中,乙酰化修饰的反应由乙酰基转移酶所催化,将乙酰辅酶A的乙酰基转移并添加在蛋白质赖氨酸残基上。在早期的研究中,乙酰化修饰一直被认为是真核细胞所特有的一种翻译后修饰,直到后来研究发现原核细胞中年也存在着蛋白质乙酰化修饰。所以,乙酰化修饰是原核和真核生物所共有的一种翻译后修饰类型。

翻译后修饰蛋白组:翻译后修饰蛋白组分析是指在组学水平上对存在翻译后修饰的蛋白质进行分析。翻译后修饰蛋白组是指细胞或组织等整体水平上的翻译后修饰蛋白。蛋白质的翻译后修饰(Post Translational Modifications, PTMs)是蛋白质在翻译中或翻译后经历的一个共价加工过程。蛋白翻译后修饰通过在一个或多个氨基酸残基上加修饰基团或通过蛋白质水解去基团而改变蛋白质的性质,调节蛋白质的功能。经过翻译后修饰的蛋白质称为翻译后修饰蛋白。目前,已知的蛋白质翻译后修饰主要包括糖基化、磷酸化、乙酰化、泛素化、二硫键配对、甲基化和亚硝基化等等。蛋白质翻译后修饰有什么生物学意义?

翻译后修饰蛋白的检测方法:翻译后修饰蛋白的检测技术包括有免疫沉淀、western blot、质谱技术、体外生化分析等。其中,免疫沉淀是大多数翻译后修饰检测中的关键步骤,它利用蛋白特异性抗体或某种翻译后修饰的特异性抗体来富集目标蛋白,之后再用western blot或质谱技术分析目标蛋白。Western blot和质谱技术均可用于蛋白质翻译后修饰的下游检测,其中Western blot相对简单但依赖于特异性抗体且无法识别单个蛋白质变化,质谱则可以检测包括未知PTM在内的几乎所有的PTMs但成本更高需要专业知识来分析产生的大量数据。研究人员可以根据成本、有无可用抗体,以及有没有目标等选择合适的方法进行检测。蛋白质磷酸化修饰组学具有可靠性。广东琥珀酰化修饰蛋白质组学主要方式

自中而下的蛋白质组学技术可用于组蛋白修饰的分析。江苏蛋白质泛素化修饰组学质谱鉴定

乙酰化修饰蛋白质组学分析:乙酰化修饰蛋白质组学分析是指从蛋白质组学的水平分析蛋白质乙酰化修饰,包括乙酰化蛋白质的鉴定和定量。提供基于质谱的乙酰化蛋白组研究服务。蛋白质乙酰化包括组蛋白乙酰化和非组蛋白乙酰化。组蛋白乙酰化主要是赖氨酸乙酰化,已在基因转录调控作用方面被普遍的研究。非组蛋白乙酰化构成了哺乳动物细胞中乙酰化蛋白的主要部分,参与了所有主要生物过程,包括蛋白质的定位、转移、功能和降解,遗传物质的转录和复制等。除了重要的生物学功能以外,乙酰化蛋白质及其调控酶还与衰老和多种疾病(如神经变形紊乱、心血管疾病等)紧密相关。因此,对乙酰化修饰蛋白质组进行研究有助于进一步探索细胞的生命活动与了解相关疾病的发病机制。江苏蛋白质泛素化修饰组学质谱鉴定

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