蛋白组学样本要求:常规组织:(心、肝、脾、肺、肾、肠、脑、肌肉等)PBS洗涤去除残留血液和污染物,剔除无关的干扰组织(血管、脂肪、结缔组织等);冲洗干净,用组织剪或手术刀将组织分离成1cm3左右的小块;液氮速冻5min,保存于-80℃。软骨组织:PBS洗涤去除残留血液和污染物;用手术刀将软骨切成1cm3左右的小块;液氮速冻5min,保存于-80℃。软体动物(吸虫等)PBS洗涤去除来自宿主的污染;液氮速冻5min,保存于-80℃。蛋白质组的研究不但能为生命活动规律提供物质基础,也能为众多种疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。定量蛋白质组学技术主要分为标记(label)和非标记(label free)定量策略。杭州修饰蛋白组学技术服务
蛋白组学技术:质谱技术相较于传统蛋白质鉴定技术而言,拥有灵敏、准确、高通量、自动化等特点。质谱鉴定蛋白质的基本原理是先将样品分子离子化,然后根据不同离子之间的质荷比差异来分离并确定蛋白质的相对分子质量。根据蛋白质酶解后所得到的肽质量指纹图谱、肽序列标签、和肽阶梯序列去检索蛋白质或核酸序列数据库,质谱技术可达到对蛋白质的快速鉴定和高通量筛选。因产生离子的方法不同而发展起来的质谱包括基质辅助激光解吸离子化质谱、电喷雾离子化质谱、表面增强激光解吸离子化质谱等。河南PRM定量蛋白质组学检测价格蛋白质组学技术并带领生物技术取得关键性的突破。
蛋白质组(Proteome)的概念指由一个基因组(genome),或一个细胞、组织表达的所有蛋白质(Protein).蛋白质组的概念与基因组的概念有许多差别,它随着组织、甚至环境状态的不同而改变.在转录时,一个基因可以多种mRNA形式剪接,并且,同一蛋白可能以许多形式进行翻译后的修饰.故一个蛋白质组不是一个基因组的直接产物,蛋白质组中蛋白质的数目有时可以超过基因组的数目.蛋白质组学(Proteomics)处于早期“发育”状态,这个领域的**否认它是单纯的方法学,就像基因组学一样,不是一个封闭的、概念化的稳定的知识体系,而是一个领域.蛋白质组学集中于动态描述基因调节,对基因表达的蛋白质水平进行定量的测定,鉴定疾病、药物对生命过程的影响,以及解释基因表达调控的机制.作为一门科学。
定量蛋白质组学分析(QuantitativeProteomics)是对一个基因组表达的全部蛋白质或一个复杂混合体系内所有蛋白质进行精确鉴定和定量。可用于筛选和寻找任何因素引起的样本之间的差异表达蛋白,结合生物信息学揭示细胞生理病理等功能,同时也可对某些关键蛋白进行定性和定量分析。目前定量蛋白质组学技术常见标记(Label)和非标记的(LabelFree)定量策略。定量蛋白质组学技术常见的几类主要包括:LabelFree定量蛋白组分析、SILAC与免疫共沉淀蛋白互作分析、MRM/PRM定量蛋白组学分析、SILAC/Dimethyl标记定量蛋白组分析、SWATH定量蛋白组学、TMT/iTRAQ/multinotch定量蛋白组学分析。蛋白质组学技术有生物质谱。
蛋白质组研究内容:1.蛋白质鉴定:可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术,利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。2.翻译后修饰:很多mRNA表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如磷酸化,糖基化,酶原刺激等。翻译后修饰是蛋白质调节功能的重要方式,因此对蛋白质翻译后修饰的研究对阐明蛋白质的功能具有重要作用。基-受体结合分析。可以利用基因敲除和反义技术分析基因表达产物-蛋白质的功能。另外对蛋白质表达出来后在细胞内的定位研究也在一定程度上有助于蛋白质功能的了解。蛋白质组的概念指由一个基因组,或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。四川修饰蛋白组学
蛋白质组学技术的本质(从分析化学角度来看),就是对蛋白质的定性定量分析。杭州修饰蛋白组学技术服务
蛋白质组学发展趋势:1、基础研究方面:近两年来蛋白质组研究技术已被应用到各种生命科学领域,如细胞生物学、神经生物学等。在研究对象上,覆盖了原核微生物、真核微生物、植物和动物等范围,涉及到各种重要的生物学现象,如信号转导、细胞分化、蛋白质折叠等等。在未来的发展中,蛋白质组学的研究领域将更加普遍。2、应用研究方面:蛋白质组学将成为寻找疾病分子标记和药物靶标比较有效的方法之一。在对早老性痴呆等人类重大疾病的临床诊断和治理方面蛋白质组技术也有十分诱人的前景,目前国际上许多大型药物公司正投入大量的人力和物力进行蛋白质组学方面的应用性研究。杭州修饰蛋白组学技术服务
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