单细胞转录组关键步骤：单细胞的分离和捕获：温和分离，稀有细胞。转录本的捕获和扩增：RNA测序需要0.1-1.0ugtotalRNA，捕获效率10%（5-**NA测序需要1ngDNA，极限稀释加移液分离单细胞；显微操作分选单细胞；流式分选带有表面Marker的单细胞；激光切割实体组织；微流控技术；磁珠捕获，主要用于CTC。它的一个优点是可以结合流式细胞荧光分选（FACS,fluorescentactivatedcellsorting）根据表面Marker分选细胞。因此特别适合分选细胞子集用于测序。它的另一个优点是可以获得细胞形态全览图，提供另外一个维度的信息，可用于鉴定微孔中是否有损伤的细胞或双份细胞，主要缺点是通量低且每个细胞所需的工作量相当大。转录组学可应用于炎症发生机制的发现及干预。南京转录组学分析研究

什么是转录组学测序？转录组广义上指在某一生理条件下，细胞内所有转录组产物的组合，包括：mRNA、ncRNA、rRNA等；狭义上指所有mRNA的组合。转录组测序的研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有RNA的总和，主要包括mRNA和ncRNA。转录组具有时间特异性、组织特异性、空间特异性等特点。无参转录组和有参转录组的区别？如果所研究的物种有组装注释质量较好基因组序列，且和该基因组序列比对效率较高，那么可以采用有参转录组的分析策略，直接进行分析。反之，则需要按照无参转录组的分析策略进行转录本组装，构建unigene库，然后进行后续分析。南京转录组学分析研究转录组学检测范围广，高于6个数量级的动态检测范围。

转录组学(transcriptomics)是功能基因组学(FunctionalGenomics)研究的重要组成部分，是一门在整体水平上研究细胞中所有基因转录及转录调控规律的学科。随着人类基因组计划HGP(HumanGenomeProject)的完成，科学家也逐渐认识到对基因结构序列的研究只是基因组学研究的一部分，并不能揭示所有的生命奥秘，所以接下来需要解决的问题是：研究这些基因序列的功能、参与的生命过程、表达调控方式，以及这些基因在不同的时空条件下的表达差异等。这些问题都需要功能基因组学技术来解决，而转录组学技术是功能基因组学研究的重要组成部分。对基因及其转录表达产物功能研究的功能基因组学，将为疾病控制和新药开发、作物和畜禽品种的改良提供新思路，为人类解决健康问题、食物问题、能源问题和环境问题提供新方法。

转录组学研究的方法：在早期，由于测序价格昂贵、基因序列数目有限，转录组学研究者只能进行极少数特定基因的结构功能分析和表达研究。近十几年，分子生物学技术的快速发展使高通量分析成为可能，这为真正意义上的转录组学的研究奠定了基础。这些高通量研究方法主要可以分为两类：一类是基于这类方法包括表达序列标签技术、基因表达系列分析技术、大规模平行测序技术、RNA测序技术其中，Microarray和EST技术是较早发展起来的先驱技术，SAGE、MPSS和RNA-sea是高通量测序条件下的转录组学研究方法转录组学研究有助于了解特定生命过程中相关基因的整体表达情况，进而从转录水平初步揭示该生命过程的代谢网络及其调控机理。转录组学测序可以同时测到mRNA、lncRNA、micRNA以及circRNA么？

RNA-Seq转录组学技术优势：RNA-seq技术可以检测到低水平表达、未识别的转录子和新拼接亚型基因。另一方面，与基因芯片相比，RNA-Seq有一个更广的检测动态范围，可以研究编码和非编码RNA，更易于基因网络的构建、发现选择性剪切转录物，检测到等位基因的具体表达方式，也可以用来提取基因型信息。在RNA-Seq单细胞研究中，一个主要优势是可以分析整个转录序列，而不是有限制数量的基因，并且，研究DNA和RNA的方法并不是相互排斥的，他们可以相互结合使用，产生更多的生物学上重要的信息。RNA-Seq转录组学有着巨大的应用前景。哈尔滨高通量转录组学定量分析

转录组学有高通量、更精确的数字信号。南京转录组学分析研究

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