本发明涉及生物医药领域,涉及一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。背景技术:近年来,采用口腔拭子进行DNA检验有逐渐增多的趋势,由于国内没有专门用于采集口腔脱落细胞的工具,而只是使用普通的医用棉签,而不同的人采集口腔脱落细胞在擦拭次数、力度、检材剪取量及扩增用的模板量上都存在一定差异,导致了口腔拭子的DNA常温下保存效果不大稳定,影响了口腔拭子在DNA常温下保存中的应用。
为规范口腔拭子DNA的采集,提高口腔拭子的DNA保存效率,亟需一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。
口腔拭子应该可以承受4N的垂直于轴向的静压力。吉林医疗口腔拭子供应商
专业用在基因检测行业,细胞学,遗传学,疾病筛查,检测,基因DNA,分子诊断,个人检测诊断,大健康,医学,生物,制药等行业**的海绵拭子【基因检测DNA海绵拭子】:基因检测口腔DNA样本采集【产品结构、组成】:一次性使用基因采样袋由基因海绵采样拭子、细胞保存液管组成。【使用说明】:本基因采样作为基因检测的采样工具,其用途是采集和保存口腔黏膜上皮脱落细胞。采样拭子由海绵头、采样套杆和采样推杆三部分组成。使用方法将密封包装的采样拭子拆封后,将有海绵头一端深入口腔内,用海绵头刮拭口腔内壁,可将口腔黏膜上皮脱落细胞及部分唾液吸在采样头表面。在刮拭后可单手持采样拭子,用拇指抵住采样推杆,将采样头顶入采样管内,拧紧采样管盖,便可在常温下保存。一个采样头对应一个采样管,套杆及推杆可丢弃。操作如下图:【产品特点】:本采集袋具有采集方便、携带方便、一次性使用,无交叉污染的特点。【用途】:本产品用于采集人体口腔黏膜上皮脱落细胞。【注意事项】:使用本产品前详细阅读使用说明书;本产品为‘一次性使用’不可重复使用,用后请立刻丢弃;本产品禁止存放在0、有害、有腐蚀性物质的环境;本产品在储运过程中不得被重压,并保存包装完好。 天津鼻拭子口腔拭子供应商家口腔拭子的绒毛质地可采集更多目标分析物。
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口腔拭子DNA提取介绍所述iCleanhcy的DNA口腔细胞的试剂盒允许从人口腔拭子的基因组DNA的快速和有效的纯化。
DNA样本准备裂解液后,您可以在使用iCleanhcy不到15分钟纯化DNA技术。根据所使用的DNA纯化试剂盒,可以使用液体处理机器人单独或在自动化系统中处理样品。对于套件预期用途的iCleanhcy设计DNA口腔细胞试剂盒以允许从人颊细胞拭子或来自漱口水/或者唾液采集器手机人体唾液的沉淀细胞中分离以下量的基因组DNA。在加工前,样品可以在4°C下储存长达2周,而DNA产量或质量没有明显损失,不会降解。纯化的基因组DNA适用于下游应用,例如PCR,芯片.iCleanhcy?的DNA归口腔细胞培养基:在150微升的总体积在1-3毫微克/微升的浓度制作的基因组DNA的归一化产率。
iCleanhcy的DNA口腔细胞培养基:纯化的基因组DNA的6微克。重要提示:DNA产量各不相同,取决于几个因素,包括服用拭子的人的技术,供体是高还是低的脱落剂,以及使用的拭子类型。优点使用iCleanhcy的DNA口腔细胞的试剂盒,分离基因组DNA提供了以下优点:使用基于磁珠的技术分离基因组DNA,无需使用危险化学品,离心或真空歧管在样品制备和裂解后不到15分钟内。 包装后的拭子应贮存在2℃ ~30℃,相对湿度40%~90%的无腐蚀性气体、通风良好、阴凉干燥、清洁的环境中。
加入20μteinaseK溶液,混匀。加入200μL缓冲液GB,充分颠倒混匀,在56℃放置14min(期间颠倒混合样品数次),溶液应变清亮,若未完全变清亮,延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇,充分振荡混匀10s,此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12,000rpm离心30s,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm(~13,400×g)离心2min。将吸附柱放置新的,以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50~200μL洗脱缓冲液,室温放置2~5分钟,12,000rpm(~13,400×g)离心2min,将溶液收集到离心管中,测定浓度及纯度后,取3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6,本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21~25之间,荧光扩增曲线呈典型的S型。口腔拭子是海绵口腔拭子。吉林医疗口腔拭子供应商
口腔拭子如果在使用的过程中出现过敏现象,请立即停止使用,严重时请及时就医。吉林医疗口腔拭子供应商
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