体回收率差。 印迹大会和总议定书 1.用支撑层(蓝色边缘)握住吸墨纸托并弄湿膜层(白色)在润湿过程中溢出水提供的托盘。不要弄湿支撑层。放置湿的滚动板上的污点固定器。2.如果需要,将印迹预先在甲醇和水中浸湿,然后将其放置在印迹支架中心,蛋白质面朝下。注意:印迹不得超过材料中指定的尺寸必填部分。3.轻轻滚动印迹以去除气泡,然后稀释印迹保持并滚动一次。4.打开吸墨纸固定框架,用力将吸墨纸固定在蛋白质面朝上,然后将其放入框架中。一个缺口吸墨架可确保正确放置在框架中。注意:如果只在框架中运行一个MultiBlot,请放置孔空白卡在第二口井中。5.关闭并锁定框架。加入30 mL封闭溶液(MultiBlot为15毫升)。向下按框架并转动系统旋钮施加真空。当框架完全为空时,关闭真空。注意:如果使用抗体回收托上海益启细胞跨膜电阻仪订购方便。杨浦区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器
密封的平板/m歧管组件放在倒置显微镜。6.在扩展的灌注实验中,定期将7孔倒空至避免出口溢流到歧管和灌注系统中。在CellASICOONX2软件的“运行”选项卡上,单击“暂停”按钮。按下仪器上或“工具”下拉菜单中的“密封”按钮在下拉菜单中,单击开封板。从板,并抽吸良好。7.将歧管重新密封到板上,然后在在“运行”选项卡上,单击“恢复”以重新启动每个融合协议。解决方案切换1.从选定的进水口(1-5)吸出溶液。加至350μL所需的解决方案。如果少于四个单位(A-D)使用时,用缓冲液填充未使用的进口井,以防只托水。2.根据以下说明将微流体板密封到ONIX2歧管上:CellASIC@ONIX2微流体系统用户指南。3.打开CelIASICOONIX2软件,在下拉列表,然后单击ProtocolEditor选虹口区Merck超滤杯Merck仪器代理价采购正规细胞计数器哪家靠谱?
关闭真空。同样,溶液将被吸收到印迹架中,并且表面可能看起来干燥。重要提示:孵育10分钟后,再抽真空。11.向下压框架并施加真空。等待5至8秒钟,直到框架完全空了。真空运行连续添加30 mL洗涤缓冲液(对于MultiBlot为15 mL)。重复洗涤步骤3次(共3次)4次洗涤)。12.关闭真空,然后从框架上取下吸墨架。从污点固定器中取出污点,并与适当的检测试剂。如果使用了MultiBlot孔空白,则卸下并清洗。 扩展一级抗体孵育:一小时至过夜1.执行《通用议定书》的步骤1至5。2.加入2.5 mL(对于MultiBlot),5 mL(对于Mini blot)或10 mL(对于Midi blot)1X一抗(浓缩液)通常在标准免疫检测过程中使用)。3.用盖子盖住吸墨纸固定架。如果需要的话,将其从底座
阳光直射的地方。 细胞培养使用CellASICOONIX2微流体系统进行细胞培养1.从孔中吸出溶液以用于灌注(孔1-5)。向这些孔中添加350μL培养基。确保未使用溶液入口孔中充满了缓冲液。2.清空6号和8号孔,以确保在更换过程中正确交换溶液灌注。3.按照以下说明将微流体板密封到0NIX2歧管上CellASICOONIX2微流体系统用户指南。4打开CellASICOONIX2软件,选择“新建”之一实验选项,然后在下拉列表中找到B04A板。单击协议编辑器选项卡,然后输入所需的步骤,然后情况。对于1-5井,建议的压力为6.9-13.8kPa(1-2psi)可提供足够的营养,并且营养含量极低压力。有关创建协议的信息,请参阅CellASICB《ONIX2微流体系统用户指南》。5.为了监测细胞生长,将益启生物公司带您了解Merck仪器。
有关详细信息,请参见表2。●不建议在SNAP i.d. @ 2.0系统中剥离印迹。印迹已被剥离可以从阻塞步骤开始在SNAP i.d.o 2.0系统中对遵循标准协议的系统进行重新探测。●如果不需要剥离(例如,如果使用其他二抗进行检测),则可以重新检测印迹快速清洗后,立即在SNAP i.d.9 2.0系统中使用。 优化准则抗体已经开发了优化指南,以使用户能够转换所用抗体的浓度将标准免疫检测测定法浓缩至适用于SNAP i.d. @ 2.0系统的浓度。大多数用户会能够使用相同量的抗体,但与标准品相比,体积更小,浓度更高免疫检测。但是,当使用扩展抗体方案(第12页)时,可以使用相同的方法通常用于标准免疫检测的一抗的浓度,体积和时间,其次是较高浓度的二抗,持续时间较短。表1.如何根据SNAP i.d.9关于细胞分析仪的询价电话。虹口区Merck超滤杯Merck仪器代理价
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