2025-05-10
二、成分提取
1. 初步分离
离心:低速离心(如500-1000×g,5分钟)去除未破碎的细胞碎片;高速离心(如10,000×g,15分钟)分离细胞器(如线粒体、细胞核)。
过滤:用滤膜(如0.22μm或0.45μm)去除大颗粒杂质。
2. 目标成分纯化
蛋白质提?。?
使用裂解液(含去垢剂、盐和缓冲液)溶解蛋白。
离心后收集上清液,通过亲和层析(如His标签纯化)、沉淀法(如硫酸铵沉淀)或电泳分离。
核酸提取:
DNA:酚-氯仿抽提去除蛋白质,乙醇沉淀纯化。
RNA:TRIzol法提取,注意避免RNase污染。
细胞器分离:
差速离心或密度梯度离心(如蔗糖梯度)分离线粒体、叶绿体等。
代谢物提?。?
有机溶剂(如甲醇、乙腈)萃取,或冷冻干燥后溶解。
3. 浓缩与保存
浓缩:超滤离心管、冻干或真空浓缩。
保存:分装后低温保存(-20℃或-80℃),避免反复冻融。
本回答由 提供