大鼠创伤性脑损伤_艾菱菲生物专业科研服务团队
创伤性脑损伤(Traumatic Brain Injury,TBI)作为全球范围内影响人类健康的重要问题,一直是医学研究领域的重点。头部受到外力作用导致的脑组织损伤,可引发一系列复杂症状,如意识障碍、***、呕吐、言语及肢体运动障碍等,严重者甚至危及生命。车祸、摔倒、撞击等都是常见的致伤原因,其损伤程度与外力大小、作用部位和速度等因素密切相关 。
在对 TBI 的研究中,构建可靠的动物模型是深入探究其发病机制、***方法的关键环节。控制皮层冲击(Rodent Controlled Cortical Impact Injury,CCI)模型是目前广泛应用的诱导 TBI 的方法。
以 8 周龄雄性 SD 大鼠为例,具体建模过程严谨且细致。首先,将大鼠称重并进行麻醉处理,麻醉后以俯卧位固定在手术垫上,用剃须刀片仔细剃除大鼠头顶部毛发,充分暴露头皮,接着用手术刀作头顶皮肤正中切口,使颅骨、表面筋膜和软组织清晰可见。使用 40% 双氧水缓慢轻柔地溶解掉颅骨表面软组织后,用直径 0.4cm 钻头在颅左侧以中线旁 2.5mm,前囟后 1.5mm 为中心磨开直径 5mm 的骨窗,同时要小心保留硬脑膜。随后,将大鼠固定在 TBI 建模装置上,精细设置参数:冲击深度 3.5mm,速度 5m/s,接触时间 500ms 。撞击完成后,迅速将大鼠从装置中取出,用棉签短暂压迫止血,清理手术野,再间断缝合切口。而 Sham 组大鼠*开放颅窗,不进行 TBI 操作。整个操作过程中,需格外注意避免出血和对周围组织的刺激,以确保实验的准确性和稳定性。所有大鼠处理完毕后,放置于加热垫上,等待其自然苏醒。建模完成后,评估大鼠的神经系统功能缺损情况至关重要。
改良神经功能评分(Mahmood’s method Neurological Severity Score,mNSS)是一种常用的综合评分系统。它从运动、感觉和反射三个方面***考量动物的神经功能表现,在脑损伤、神经退行性疾病以及神经?;ひ┪锷秆〉仁笛橹杏τ?**。
运动功能:正常运动的大鼠得 0 分,它们能够自由、协调地行走、奔跑,四肢动作流畅;若出现轻微步态异常,但仍能自主行走并保持平衡,评分为 1 分;行走困难、步态不稳、肢体协调性差,偶尔跌倒,在辅助下能行走的大鼠为 2 分;几乎不能自主行走,肢体活动严重受限,只有在强烈刺激下才有微弱活动的,得 3 分;完全丧失肢体运动能力,对任何刺激无反应的则为 4 分。
感觉功能:对触觉、痛觉和本体感觉刺激反应正常的大鼠得 0 分;反应稍迟钝,如棉棒轻触反应延迟、针刺痛觉减弱、倾斜平面平衡能力稍差,但仍有反应的为 1 分;感觉刺激反应明显迟钝,需较强刺激才有反应,痛觉明显减弱,倾斜平面难维持平衡,本体感觉受损的是 2 分;几乎对刺激无反应,*在极强刺激下可能有微弱反应或无反应的为 3 分。
反射功能:角膜反射、耳反射、翻正反射等生理反射正常的得 0 分;部分反射减弱,如角膜反射或耳反射稍有延迟、翻正反射稍慢,但仍能完成反射动作的为 1 分;反射明显减弱,需较强刺激才能引出,且反射动作不完整或延迟明显的是 2 分;大部分反射消失,强烈刺激也难引出反射动作的为 3 分。mNSS 总分为 0 - 10 分,分数越高表示神经功能缺损越严重。0 - 3 分表明神经功能基本正?;?有轻微缺损,动物日常生活活动基本不受影响;4 - 6 分提示中度神经功能缺损,动物可能出现明显的运动、感觉或反射异常,正常生活活动受到一定影响;7 - 10 分则表示重度神经功能缺损,动物生存质量严重下降,可能需要特殊护理。
此外,抓力测试、新物体识别实验和 Morris 水迷宫实验等也常用于评估大鼠的相关能力。抓力测试能检测大鼠的肌肉力量;新物体识别实验基于大鼠对新奇事物的探索天性,评估其情景记忆能力;Morris 水迷宫实验则主要用于评估大鼠的空间学习和工作记忆能力。
对 TBI 的研究,从模型构建到功能评估,每一个环节都凝聚着科研人员的心血。通过对动物模型的深入研究,我们能够更深入地了解 TBI 的发病机制,为开发更有效的***方法和干预措施提供理论依据,从而为 TBI 患者带来康复的希望 。未来,随着研究的不断深入,相信在 TBI 的***和预防领域将会取得更多突破性的进展。