pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠，pirb基因敲入到特异性组织或细胞中。其中pirb-cwt小鼠表达cre，但不含有loxp-pirb等位基因，pirb-chetandpirb-cki小鼠表达cre并分别含有一个或者两个loxp-pirb等位基因。其中f3代杂交小鼠纯合子/杂合子鉴定所用的pcr引物如下：f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp组织特异性的基因敲入也可以通过加入另一对引物，用pcr来验证：pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意：如果dna的样本不够纯，或者pcr的延伸时间不够长，可能扩增不出来1180bp的产物。cre阳性pcr鉴定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安医学院pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。确定研究疾病目的了解影响疾病发生的内在与外在因素。纤维化疾病动物模型建模说明书

    该模型能够帮助我们研究pirb基因在免疫系统和神经系统的功能以及下游的调节机制。本发明的另一目的在于提供上述小鼠动物模型的构建方法。本发明所采用的第一种技术方案是：pirb基因敲入的小鼠动物模型，包括确定pirb基因的待敲入的特异性靶位点grna1和grna2，将pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的内含子1内，所述grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如。本发明所采用的第二种技术方案为：pirb基因敲入的小鼠动物模型的构建方法，具体按照以下步骤实施：步骤1、基于crispr/cas9技术构建针对c57bl/6j小鼠rosa26基因的特异性grna1和grna2，grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如；步骤2、构建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶载体，将打靶载体进行线性化处理；步骤3、步骤2中将含有loxp位点打靶载体、步骤1中有活性的grna1和grna2与cas9蛋白共同注射进入**小鼠受精卵中，获得f0代小鼠；步骤4、将步骤3中性成熟的阳性f0小鼠分别与野生型鼠交配繁一代，获得f1代杂合子小鼠，通过pcr、测序和southern杂交确定动物基因型；步骤5、将步骤4获得的f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子小鼠。哪一家疾病动物模型建模原理临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制出来。

1、动物模型名称：腹主动脉缩窄致心衰大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雌性4、实验动物年龄：成年5、实验动物体重：180~220g6、实验动物环境：SPF级 1、实验方法：采用主动脉缩窄法建立模型大鼠麻醉后，仰卧位固定、去腹毛、消毒，沿腹正中线切开皮肤及肌层，分离出腹主动脉，在肾动脉上方将腹主动脉与钝头8号探针一起结扎后，小心抽出针头。手术造模后大鼠正常饲养3个月。大鼠终末体重(BW),心室重(VW),计算心体比(VW/BW),并进行心功能检测,包括心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)及左室最大压力上升及下降速度(±dp/dtmax),并对心肌组织进行病理学检测.2、检测标准：模型组大鼠VW/BW明显增加，LVSP明显降低，LVEDP明显升高，±dp/dtmax则***减小，与正常对照组相比具有统计学差异。病理学检测结果表明心肌出现典型心衰样病理改变。

    来源：ZSCI基础研究中如果加入动物实验部分则使得研究更加趋于完善，投稿时中稿率也相应会增加。但将动物实验做好却不是一件容易的事情。这篇文章主要讲动物模型的构建技术，把骨科、糖尿病相关的动物模型构建做了一个***的技术汇总，建议先码后读，文章内容有部分做了简化，想看详细讲解可以在文末获取课件！一、骨科相关动物模型1.骨关节炎1）骨关节炎模型构建方法（诱发性）-关节腔内手术法、关节腔注射法。2）模型评分标准①SafraninO染色与OARSI评分（PMID：31046827、30942801）②HE染色与OARSI评分（PMID：30609097）③SafraninO染色与Mankin评分（PMID：30609097）2.骨质疏松症1）骨关节炎模型构建方法去趋法模型PMID：31037128实验动物：小鼠方法：在戊巴比妥麻醉下进行双侧卵巢切除术以诱导骨质疏松症，同时对照组小鼠*进行卵巢外置但未切除。2）模型检测指标(PMID：31037128)①HE染色②Micro-CT③TRAcP染色④Micro-CT相关指标检测3.类风湿性关节炎类风湿性关节炎（RA）是一种慢性自身免疫性疾病状态，其特征是滑膜增生，软骨退化和脊椎关节的骨侵蚀4.强直性脊柱炎1）强直性脊柱炎模型构建方法2）模型检测指标。疾病动物模型建模有加些方式？

    设计了一套能够特异性标记“穆勒胶质细胞”的系统，再将能诱导神经细胞形成的基因编辑系统，包装成“病毒”，注射到小鼠的视网膜。约1个月后，研究人员在小鼠的视网膜视神经节细胞层，发现了由穆勒胶质细胞转分化而来的视神经节细胞。这些诱导而来的视神经节细胞，不仅可以对光刺激产生相应的电信号，还可以和大脑中正确的脑区建立功能性联系，将视觉信号传输到大脑，成功恢复视觉功能。进一步的研究还表明，通过这一基因编辑技术，还能将小鼠模型中特定区域的“星形胶质细胞”非常高效地转分化为多巴胺神经元。转分化而来的多巴胺神经元，能将帕金森模型小鼠的运动障碍，逆转到接近正常小鼠的水平。这项研究的负责人杨辉指出，尽管将胶质细胞转分化为神经元的基因编辑技术在实验室里取得重要进展，但要将研究成果真正应用于人类疾病的***，还有很多工作要做。人类的视神经节细胞能否再生？帕金森患者是否能通过该方法被***？研究人员今后将从小鼠模型转到灵长类模型，进一步深入研究。模型应适用于多数研究者使用，容易复制，实验中便于操作和采集各种标本。闵行区肺病疾病动物模型建模

生物医学研究的进展常常依赖于使用动物模型作为实验假说和临床假说二者的试验基础。纤维化疾病动物模型建模说明书

1、动物模型名称：低铁饲料联合放血致缺铁性贫血大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雌性4、实验动物年龄：初断乳5、实验动物体重：50~70g6、实验动物环境：SPF级 1、实验方法：低铁饲料联合放血法诱导。SD大鼠每天给予低铁饲料和超纯水饲养，并每周通过眼底静脉丛放血1mL，连续3周。2、检测标准：血红蛋白含量明显下降，红细胞内游离原卟啉明显升高。1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。2.根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料。纤维化疾病动物模型建模说明书

上海东寰生物科技有限公司是一家经营范围为：从事生物科技领域内的技术开发、技术转让、技术咨询、技术服务。化工产品（除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品）的销售。【依法须经批准的项目，经相关部门批准后方可开展经营活动】。的公司，是一家集研发、设计、生产和销售为一体的专业化公司。公司自创立以来，投身于原代细胞，细胞增殖与凋亡，细胞检测试剂盒，动物疾病模型，是商务服务的主力军。上海东寰生物始终以本分踏实的精神和必胜的信念，影响并带动团队取得成功。上海东寰生物始终关注商务服务行业。满足市场需求，提高产品价值，是我们前行的力量。