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来源: 发布时间:2021-09-10

传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性,抗原修复,抗原抗体过夜孵育,操作步骤复杂繁琐。并且由于BrdU抗体分子较大,嵌入DNA分子中的BrdU无法直接与BrdU抗体结合,必须先进行DNA变性操作才能使BrdU抗原表位暴露,但变性的程度可能导致错误结果。如果变性不充分,会导致BrdU难以暴露,无法检测,而且变性过程从边缘向中间渗透,会导致细胞核DNA的变性不均匀,边缘模糊不清。如果变性过分,则会导致DNA断裂,甚至降解,导致核染不均一。另外,不同抗体试剂公司的抗体质量不一致,造成难以确保实验重复性,且容易产生假阳性结果。上海EdU细胞增殖检测试剂盒的价格是多少?湖南咨询EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好

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EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Clickreaction),其反应原理参见图1。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记,从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,终使细胞DNA标记上生物素等探针。湖北咨询EdU细胞增殖检测试剂盒优势上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒的运用方式。

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EdU染色(a)通过用10:1去离子水稀释10x反应缓冲液进行配制1xEdU反应缓冲液;(b)按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配;注:缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。(c)按照以下的表格进行染色反应液的配制:   该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。

细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2'-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在DNA复制时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在合成的DNA分子中,基于Apollo®荧光染料与EdU的特异性反应即可直接并准确地检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复、病毒繁殖等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及各种药物的细胞增殖及活力筛选实验。EdU细胞增殖检测试剂盒的优点体现在哪?

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与BrdU检测方法相比,EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU染料只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性。EdU(5-Ethynyl-2’- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与Apollo荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性,适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。EdU细胞增殖检测试剂盒使用时的注意事项。安徽口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒评价

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细胞增殖的能力是评价细胞、代谢、生理、病理状况、细胞活性、基因毒性等的重要指标之一,细胞增殖虽然与多种因素有关,比如细胞代谢活性、与细胞增殖相关的蛋白表达、ATP的浓度等等,但是检测细胞增殖现象的zui直接zui准确的方法就是用荧光探针直接检测遗传物质DNA的合成,这种方法是研究细胞增殖、信号通路、DNA修复及分化等等方向常用的方法。目前,基于DNA的合成原理,人们zui初开发了工具是BrdU染色法,但是这种方法操作耗时长,往往需要过夜处理细胞,操作繁杂,比如需要DNA变性、抗原修复以及抗原抗体反应等操作,后来在BrdU的基础上,人们开发出了革命性的探针--EdU,这种方法不需要繁杂的操作,节约时间,且反应更灵敏和准确。并且与MTT/WST-1或者CCK-8这种依靠化学显色法只能得到一个折线图的方法相比,EdU细胞增殖检测法可以得到高清细胞增殖现象数据图,可视化展示数据、更直观、更具视觉效果!湖南咨询EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好

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