EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留EdU细胞增殖检测试剂盒多少钱?山东正规EdU细胞增殖检测试剂盒评价
EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替T渗入正在复制的DNA分子,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,通过检测EdU标记便能准确地反映细胞的增殖情况。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU检测染料只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)即可有效检测,可有效避免样品损伤,在细胞和组织水平能更准确地反映细胞增殖等现象安徽咨询EdU细胞增殖检测试剂盒公司EdU细胞增殖检测试剂盒常见的用途有哪些?上海东寰告诉您。
细胞增殖能力的检测是评估细胞活性、基因毒性和抗药物效果等的基本方法。公认的精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成。初使用的通过检测DNA合成来检测细胞增殖的方法是放射性标记核苷掺入法,如氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷([3H]thymidine)掺入法。细胞活性的细胞增殖检测方法,能检测到细胞的总体增殖效果,但无法检测到单个的增殖细胞。这几种方法尽管都不是检测DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine掺入法。上述这些基于细胞活性或CFDASE的方法可以作为EdU法的补充性检测方法
EdU细胞增殖检测和BrdU细胞增殖检测的对比。小分子化合物AndyFluor?azide与EdU之间的点击化学(ClickChemistry)反应不需要DNA变性,就可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,该反应不受双链DNA中碱基对的影响,因此客户了BrdU掺入法的弊端。图2.使用EdU细胞增殖检测试剂盒对细胞和组织的染色效果。使用10μMEdU处理A549细胞2小时,然后分别使用AndyFluor?488azide(绿色,上图)、AndyFluor?594azide(红色,中间图)检测细胞增殖活性,使用DAPI进行复染(蓝色)。腹腔注射EdU到小鼠体内(每公斤小鼠注射5mgEdU),分别于0、12、24小时之后取小鼠肠组织,制成切片用AndyFluor?488azide(绿色,**下图)检测细胞的增殖情况,使用DAPI进行复染(蓝色)。上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒的应用范围。
细胞增殖能力的检测是评估细胞活性、基因毒性和抗药物效果等的基本方法。公认的精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成。初使用的通过检测DNA合成来检测细胞增殖的方法是放射性标记核苷掺入法,如氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷([3H]thymidine)掺入法。细胞活性的细胞增殖检测方法,能检测到细胞的总体增殖效果,但无法检测到单个的增殖细胞。这几种方法尽管都不是检测DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine掺入法。上述这些基于细胞活性或CFDASE的方法可以作为EdU法的补充性检测方法。EdU细胞增殖检测试剂盒生产厂家。江苏哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒原理
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本试剂盒小包装C0085S如果用于培养的细胞(6孔板)的检测,可以检测50个样品,每个样品的反应体系为500μl的Click反应液;如果用于96孔板检测,可以检测500个样品,每个样品的检测体系为50μl的Click反应液;如果用于12孔、24孔、48孔或384孔板样品的检测,分别可以检测125、250、350和1250个样品,每个样品推荐的Click反应液用量为200μl、100μl、70μl和20μl。小包装如果用于冰冻或石蜡切片的检测,可以检测125-250个样品,每个样品的反应体系为100-200μl的Click反应液。大包装C0085L可检测样品的数量为小包装C0085S的4倍。山东正规EdU细胞增殖检测试剂盒评价