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来源: 发布时间:2022-07-21

1、动物模型名称:二甲基苯蒽(DMBA)致乳腺*大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌性4、实验动物年龄:6~8周龄5、实验动物体重:80~100g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:二甲基苯并蒽(DMBA)诱导。大鼠按100mg/kg体重于臀部皮下一次性注射10mg/mL的DMBA溶液1次。正常饲养致24周。2、检测标准:模型组大鼠第5对乳房直径在各测定时间点与正常对照组比较有***性差异;大鼠注射致*剂后乳腺上皮组织逐渐发生有规律的变化,乳腺导管上皮细胞首先发生上皮增生、不典型增生,并逐渐加重,在第9周时可见同一大鼠的多个乳腺出现不同程度的导管上皮增生和不典型增生。第13周开始发现>3mm的乳腺*,至第24周时70%的大鼠发生乳腺*,并可见一只大鼠同时发生多个乳腺*,而同一大鼠的其他乳腺亦呈现出不同程度的上皮细胞增生和不典型增生,提示处于*发生的不同进展阶段。能够准确模拟人相关特定功能与疾病特征。闵行区阿尔兹海默症疾病动物模型建模

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其可与dna链交叉连接,显示出细胞毒作用。溶解后在体内无需载体转运,即可通过带电的细胞膜。由于细胞内氯离子浓度低(4mmol/l),氯离子为水所取代,电荷呈阳性,具有类似烷化剂双功能基团的作用,可与细胞核内dna的碱基结合,形成三种形式的交联,造成dna损伤,破坏dna复制和转录,高浓度时也抑制rna及蛋白质的合成。顺铂具有抗*谱广、乏氧细胞有效、作用性强等优点,已普遍用于***睾丸*、卵巢*、子宫*、膀胱*、颈部*、前列腺*、脑*等,疗效***。但顺铂用于****有一定的毒性,会引起副作用,与卵巢的损害有直接关系,有研究表明顺铂可诱导卵巢细胞凋亡。静安区非酒肝疾病动物模型建模可以克服人类某些疾病潜伏期长,病程长和发病率低的缺点。

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pirb在轴突生长锥表达,位于富含肌动蛋白的前缘和synapsin免疫阳性的囊泡中,在神经元突起的表达呈点状分布。文献表明,pirb表达随年龄增加,特别是在老龄认知损伤的小鼠海马中,pirb能够抑制轴突再生和突触可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚体对海马长时程增强的破坏作用需要pirb的参与,在ad转基因模型中,pirb不仅参与成年小鼠记忆缺失,而且介导幼年小鼠视皮层突触可塑性的丢失。这些研究提示我们,pirb参与突触可塑性,抑制pirb可能对ad起到***效应。但是在cns,pirb的功能和下游抑制性信号通路仍然未被阐明,因此迫切需要pirb的细胞和动物模型。目前对于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制剂,或者采用慢病毒转染。前者受到是否能够透过血脑屏障和抑制剂效率的影响,后者慢病毒转染在原代细胞和在体的转染效率比较低,使研究pirb的功能受到极大的限制。为解决这些问题,我们通过crispr/cas9技术建立了pirb基因敲入小鼠,将pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位点,为研究pirb在免疫系统或者神经系统的作用和机制提供了很好的工具。技术实现要素:本发明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠动物模型。

pcrmix:反应条件:pcr扩增产物的电泳鉴定结果如图3所示,从图3中可以看出,6、8、9号为pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr产物没有这两个扩增产物。(c)短链pcr反应,引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能够扩增出344bp的产物,而野生型没有。pcr体系:反应条件:(2)f1代小鼠测序:通过pcr扩增后测序鉴定小鼠基因型,如图4所示,为6号pirb基因敲入小鼠测序峰图,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern杂交检测f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸内切酶切割dna分子,切割示意图如图5。具体的southern杂交检测过程如下:步骤a、提取f1代小鼠尾部dna;步骤b、制备探针,通过pcr方法将dig-dutp渗入到步骤a的dna分子中。早期阶段科学假说与疾病潜在药物治疗效果评价始于小鼠疾病模型构建及其实验室研究。

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得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地,l型棒的直径为,***端长3-5mm,第二端长1-3mm。具体地,根据大鼠体重选择l型棒的直径大小:当大鼠体重在200g到不足220g范围时,采用直径为;当大鼠体重在220g到不足250g范围时,采用直径为;当大鼠体重在250g到不足300g范围时,采用直径为;当大鼠体重在300g到350g范围时,采用直径为。在另一个具体实施方式中,压迫元件为u型棒;步骤三具体为:将u型棒的***端和第二端分别插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中,得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地,压迫元件采用不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料制备而成。在一个具体实施方式中,压迫元件采用黄铜和锌的混合物制备而成。具体地,混合物为h62黄铜,即含铜量为%~%,余量为锌含量的黄铜。而铜、锌皆属于非铁磁性物质。在另一个具体实施方式中,压迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制备而成。pla是一种无毒无刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金属。h62黄铜棒或pla棒在体内,即不会受磁疗、电疗引起的磁场、电场干扰,也不会对磁疗、电疗仪器及磁共振仪器产生不良影响。大鼠疾病建模请找上海东寰。江苏疾病动物模型建模优势

通过小鼠疾病模型的构建有助于我们深入揭示潜在致病基因作用机制。闵行区阿尔兹海默症疾病动物模型建模

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