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血清兼容PEI转染试剂

来源: 发布时间:2025-07-29

瞬时转染方法:1.接种细胞:转染前一晚,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后,添加?体积的包含30%血清的生长培养基。4.孵育细胞和分析结果:在CO2培养箱中37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后5h即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间。或者关注我们的公众号:Mine-bioPEI转染试剂从96孔板到1000L生物反应器规模都能提供连续性的高表达蛋白或病毒。血清兼容PEI转染试剂

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1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。4.对大多数细胞来而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1~4μL体积线性PEI转染试剂进行优化。若有更多关于Polysciences 转染试剂相关技术问题,欢迎咨询上海曼博生物。欢迎关注曼博生物公众号:Mine-bio北京高性价比PEI转染试剂PEI转染试剂的使用方法是怎样的?

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产品特点:PEIMAX40K是线性聚乙烯亚胺盐酸盐形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),是线性化聚乙烯亚胺PEI25K的升级产品。相比于PEI25K,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙酰化);2.盐酸盐形式,具更高的水溶特性;3.含更长连续性乙烯亚胺片段,其质子化氮水平比PEI25K提高11%以上。应用领域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等级的PEI转染试剂,适用于基础学术研究和药物研发早期阶段,以固体粉末形式提供,需用户自行配置(详情见使用方法)。更多关于KyforaBiobyPolysciencesPEI转染试剂,欢迎咨询上海曼博生物!Polysciences PEI转染试剂中国代理商是哪个?无动物源成分PEI转染试剂转染步骤

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