安捷伦公司芯片平台因其强大的eArray探针设计平台,可以进行芯片的定制。在甲基化领域同样适用。合作伙伴利用Agilent芯片平台设计了一款专门针对**启动子区域CpG岛的甲基化芯片。绝大多数基因是针对基因的启动子区域的CpG岛设计探针。这款芯片上一共有4160个功能注释比较明确的基因,其中2128个和**发生有关系。从功能上分,有256基因和细胞凋亡有关,1273个基因和信号传导有关,487个基因和压力和衰老有关。采用的是8*60K的芯片格式。利用MeDIP原理进行甲基化检测的方法探针的分辨率可以精确到100 bp。羟甲基化DNA免疫沉淀测序是通过5hmC特异性抗体富集结合高通量测序技术。山东RIP-seq技术服务怎么样
GOS2基因靶向甲基化测序确定了一种快速复发、常规致死的肾上腺皮质*亚型
Targeted Assessment of G0S2
Methylation Identifies a Rapidly Recurrent, Routinely Fatal Molecular Subtype
of Adrenocortical Carcinoma. Clin Cancer Res. 2019; 25(11):3276-3288.
(IF= 10.199)
研究者分析了ACC-TCGA数据,在114例肾上腺皮质**的**队列中鉴定了一个在CIMP高ACC中***被高甲基化并沉默的基因G0S2,并通过高通量BSP得到验证。G0S2基因CpG岛高甲基化**预测不良临床后果,是ACC快速复发或致死的标志。评估G0S2甲基化对临床决策是直接可行的,并有助于对侵袭性ACC进行有效辅助***。 山东RIP-seq技术服务怎么样cfDNA,cell free DNA,就是血液中游离的自身DNA。
cfDNABS-Seq送样要求一、送样类型分离好的血浆二、保存方式分离后的血浆,用ml离心管分装,例如:1ml/管;放-20℃冰箱中保存(短暂保存,1-2周);放-80℃冰箱中长期保存(1年以内);保存期间不能冻融。三、运输条件干冰运输:顺丰陆运(3-4天时间),夏季10-15公斤干冰;秋冬季10公斤干冰。四、抽血要求1、使用Streck**管(不建议使用普通的EDTA-钠抗凝管),采集10ml外周静脉血(客户没有Streck**管,公司配送);2、室温或者放置4℃冰箱中半小时以上,不超过8小时,进行血浆分离步骤。五、血浆分离步骤1、4℃条件下以1600g离心10min,离心后将上清(血浆)分装到2、4℃条件下以16000g离心10min去除残余细胞,将上清移入新的离心管中,每管分装1ml;3、血浆样本存放于-80℃冰箱中保存;使用干冰运输,提取之前不能冻融。备注1:血浆分离在4℃条件进行,如果客户没有冷冻离心机,也可以在室温条件下进行;备注2:离心后取血浆上清,避免吸取白细胞;通常10ml全血可以获得4-5ml血浆。
甲基化敏感性高分辨率熔解曲线分析(MS-HRM)
通过熔解曲线分析可以将单碱基序列的差异转变成熔解曲线的差异,因此DNA样本经过亚硫酸氢盐处理后,甲基化与未甲基化DNA会存在序列差异,这种差异可通过熔解曲线分析来发现。使用该方法进行甲基化分析*需一对引物,相对简单,不过这种方法对仪器的要求颇高,需要带HRM模块的荧光定量PCR仪,并且在进行实时定量PCR过程中,需要使用饱和的荧光染料。利用MS-HRM技术进行甲基化检测只能对检测片段整体甲基化情况进行分析,并不能明确每个CpG位点的甲基化状态。因此这种技术适用于大量样本的检测,筛选出感兴趣的CPG位点,然后利用其他方法进行单个位点的精确检测及甲基化程度的精确定量。 WGBS用于人、哺乳动物及农林牧渔方向的高水平甲基化研究。
2019国自然基金解析—甲基化研究专题。从生命科学部和医学科学部总体来看:2019年度,生命科学部获自然科学基金委批准资助6478项(不含杰出青年基金项目),批准资助金额共计,单项平均资助金额。2019年度,医学科学部共批资助10138项(不含杰出青年基金项目),批准资助金额共计,单项平均资助金额。从甲基化研究方向来看,与甲基化研究相关的项目总数达283项,项目总金额超过12669万元。其中生命科学部项目总数62项,项目金额3235万元,医学科学部项目总数221项,项目金额9434万元。从2011-2019年甲基化研究方向的项目金额和项目数目分析,整体呈上升趋势;从医学科学部来看,甲基化研究项目获批数量221项,项目金额达到9434万,较之2018年度项目获批金额(7166万元)上升趋势尤为明显,可以看出,甲基化研究日益成为国自然的研究热点。 高通量BSP测序结果多种展示形式。山东RIP-seq技术服务怎么样
云生物提供测序服务。山东RIP-seq技术服务怎么样
Chip-Seq 是指通过染色质免疫共沉淀技术(ChIP)特异性地富集目的蛋白结合的DN**段,并对其进行纯化和文库构建;然后对富集得到的DN**段进行高通量测序,通过将获得的数百万条序列标签精确定位到基因组上,从而获得全基因组范围内与组蛋白、转录因子等互作的 DNA 区段信息,是目前在全基因组水平研究蛋白结合靶DNA序列的重要手段,为转录因子、组蛋白修饰、核小体定位等表观遗传学的研究提供有效方法。
应用领域
1、确定组蛋白修饰的位置及其与基因表达的关系。
2、完成对转录因子及其它蛋白在基因组上结合位点的精细定位。
3、研究特定的核小体或组蛋白的分布。 山东RIP-seq技术服务怎么样