industryTemplate云生物提供甲基化服务。陕西RRBSDNA甲基化经验丰富
羟甲基化DNA免疫沉淀测序(HydroxymethylatedDNAImmunoprecipitationSequencing,hMeDIP-Seq)是通过5hmC特异性抗体富集羟甲基化的DN**段,然后结合高通量测序技术在全基因组水平上以较小的数据量,快速、高效地寻找羟甲基化区域。可广泛应用于羟甲基化与疾病关系研究以及羟甲基化在胚胎发育过程中的研究。样本要求:基因组DNA:>=3ug;样品浓度>50ng/ul;无RNA和蛋白污染建库测序:测序策略:IlluminaHiSeq,PE150;测序深度:20-30Mreads。信息分析:基于全基因组范围的羟甲基化分析,数据质控,Peak锋Calling,Peak锋在基因组、染色体、功能元件上的分布,多样本羟甲基化差异聚类,差异羟甲基化DMR鉴定及相关基因的功能分析,结合项目背景和科学问题的数据亮点挖掘。上海oxBSDNA甲基化专业服务WGBS技术及应用是有力方案。
安捷伦公司芯片平台因其强大的eArray探针设计平台,可以进行芯片的定制。在甲基化领域同样适用。合作伙伴利用Agilent芯片平台设计了一款专门针对**启动子区域CpG岛的甲基化芯片。绝大多数基因是针对基因的启动子区域的CpG岛设计探针。这款芯片上一共有4160个功能注释比较明确的基因,其中2128个和**发生有关系。从功能上分,有256基因和细胞凋亡有关,1273个基因和信号传导有关,487个基因和压力和衰老有关。采用的是8*60K的芯片格式。利用MeDIP原理进行甲基化检测的方法探针的分辨率可以精确到100 bp。
强化RRBS——高性价比DNA甲基化检测方案。单碱基分辨率,全基因组范围,富集启动子/CpG岛甲基化调控区域,适合人和哺乳动物、动物及鱼类,适合细胞、全血及新鲜冷冻组织,不适合cfDNA及FFPE等片段化样本。项目介绍:简化基因组甲基化测序(ReducedRepresentationBisulfiteSequencing,RRBS)是通过限制性酶切的方法富集基因组DNA上富含CCGG位点的片段,经Bisulfite处理和高通量测序技术进行基因组CpG富集区域内的单碱基分辨率的甲基化测序。相对WGBS而言RRBS技术作为高性价比的甲基化测序方案,测序量大幅减少,在大规模临床样本研究中具有很不错的应用价值。高通量BSP测序结果多种展示形式。
芯片种类:Agilent**甲基化芯片,8x60K●和合作伙伴在Agilent公司定制的Promoter芯片。●绝大多数基因是针对基因启动子区域的CpG岛设计探针。●芯片上一共有4160个功能注释比较明确的基因,其中2128个和**发生有关系。●从功能上分,有256基因和细胞凋亡有关,1273个基因和信号传导有关,487个基因和压力和衰老有关。●特别适用于**甲基化研究。案例分析:用Agilent定制甲基化芯片和表达谱芯片共同筛选乳腺*患者的高甲基化基因,并探讨甲基化与基因表达的关系为了寻找乳腺*早期诊断的甲基化标记基因,探讨基因甲基化水平与基因表达量之间的关系,科研者使用甲基化芯片和表达谱芯片进行了相关研究。研究中,甲基化程度检测使用BSP法和COBRA分析,基因表达水平检测用RT-PCR。结果,在乳腺*患者中检测到70对高度甲基化差异***的基因,表达谱芯片分析结果显示在乳腺*患者中这70个基因大部分不表达;RT-PCR结果也显示大部分基因表达量很低甚至不表达。这种研究策略,能够直观方便的筛查患者甲基化基因,有效地寻找乳腺*标记基因,对研究甲基化基因调控基因表达提供研究基础。cfDNA,cell free DNA,就是血液中游离的自身DNA。安徽TAB-SeqDNA甲基化怎么样
全基因组甲基化分析及特异位点甲基化检测。陕西RRBSDNA甲基化经验丰富
虽然焦磷酸测序可以进行单个位点甲基化程度的精确定量,但是目前来看,测序的片段长度还比较短,只有一百多bp,其中有效长度约为60bp。以上是对几种常用的特异位点甲基化检测方法进行了介绍及比较,还有一些检测技术是在常用的检测手段上进行优化或者将不同的方法进行结合应用,比如以MSP方法为基础,发展了SMART-MSP技术,该技术利用定量技术对MSP扩增过程进行检测,同时后续结合HRM技术来分析甲基化差异。此外,利用质谱平台进行甲基化检测的有MALDI-TOF技术,可以对甲基化进行精确检测并能进行高通量筛选。从对这些技术的比较分析来看,没中检测技术都有各自的优点,并也存在一定的局限性,研究者可以根据自己的实际研究情况进行选择。在特异甲基化位点检测上,能够提供BSP、HRM及焦磷酸测序三种技术的完整的检测服务,具有丰富的经验,帮助客户加速甲基化研究进程。陕西RRBSDNA甲基化经验丰富