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来源: 发布时间:2023-10-26

培养基的制备:(1)称量:根据培养基的配方,称取适量药品于搪瓷杯中;(2)溶解:用量筒量取所需水量,置电炉上加热,一边搅拌,至完全溶解,加热至沸腾,拔掉电源,待冷却;(3)分装:根据不同需要,立即趁热分装入三角瓶或试管中,分装三角瓶以不超过三角瓶一半为宜,分装试管一般为管长的1/5(需根据试管的大小而定).液体培养基如乳糖胆盐发酵培养基约分装10毫升左右.(4)塞硅胶塞:装好培养基的试管应塞上硅胶塞,松紧合适,紧贴管壁,不留缝隙,约1/2塞入内,这样即可过滤空气,避免杂菌侵入,又可减缓培养基水分的蒸发.(5)包装:三角瓶棉塞头部应用锡箔纸包扎,试管集中于试管篓.2、无菌水的制备:(1)用10ml移液管量取9.2ml蒸馏水(稀释水)装入试管中.(2)用100ml量筒量取95ml蒸馏水(稀释水)装入150ml的三角瓶中.可置少许玻璃珠于三角瓶内,防止暴沸.(3)量取240ml蒸馏水(稀释水)于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮纸包扎好,高压灭菌备用。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。黑龙江培养基制备器

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培养基的过滤澄清:液体培养基必须较全澄清,琼脂培养基也应透明无明显沉淀,因此,须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应拆叠成折扇成漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。琼脂培养基可用清洁的白色薄绒布趁热过滤。亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤。新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先用绒布将碎渣滤去,再用滤纸反复过滤。如过滤法不能达到澄清要求、则须用蛋清澄清法。即将冷却至55-60℃的培养基放入大的三角烧瓶内,装入量不得超过烧瓶容量的1/2,每1000ml培养基加入1-2个鸡蛋的蛋白.强力振摇3-5分钟,置高压蒸汽灭菌器中、121℃加热20分钟、取出趁热以绒布过滤即可。河南培养基制备器报价脱水培养基,又称预制干燥培养基,指含有除水分外的一切成分的商品培养基。

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根据培养基的物理状态来区分,可以分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。1)液体培养基所配制的培养基是液态的,其中的成分基本上溶于水,没有明显的固形物,液体培养基营养成分分布均匀,易于控制微生物的生长代谢状态。2)固体培养基在液体培养基中加入适量的凝固剂即成固体培养基。常用作凝固剂的物质有琼脂、明胶、硅胶等,以琼脂较为常用。固体培养基在实际中用得十分普遍。在实验室中,它被用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定等。3)半固体培养基如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中,就制成了半固体培养基。以琼脂为例,它的用量在0.2~1%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力,有时用来保藏菌种。

根据培养基的物理状态来区分,可以分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。a.液体培养基所配制的培养基是液态的,其中的成分基本上溶于水,没有明显的固形物,液体培养基营养成分分布均匀,易于控制微生物的生长代谢状态。b.固体培养基在液体培养基中加入适量的凝固剂即成固体培养基。常用作凝固剂的物质有琼脂、明胶、硅胶等,以琼脂好为常用。固体培养基在实际中用得十分较广。在实验室中,它被用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定等。c.半固体培养基如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中,就制成了半固体培养基。以琼脂为例,它的用量在0.2~1%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力,有时用来保藏菌种。培养基制备器解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。

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高层斜面:制备高层斜面分装于试管,约占试管容积的1/3,灭菌后趁热放置成高层短斜面,待其凝固后应用。分装好的培养基或缓冲液等及时密封后必须在配制当天(2h内较佳)进行灭菌处理。液体、半固体培养基一般在高压灭前分装,约装试管容积的1/3,在灭菌后还要加其他成分的液体、半固体培养基,灭菌后再分装于灭菌试管或锥形瓶中。通过无菌技术为测试制备的每一批培养基其PH在放冷至室温(25°)后,都应测定。一个扁平的pH计用于培养基表面pH值的测定,浸入式的pH计用于液体的测定。各供应商提供的培养基的pH应该在规定的±0.2的范围内,除非通过验证得到更宽的范围。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应拆叠成折扇成漏斗形。中国香港培养基制备器

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三角培养瓶是细胞培养中的常用耗材,也可用于培养基的配制、混合及储存。利用三角培养瓶制备培养基可以按照以下步骤操作:配料:配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。调PH:用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。过滤:滤纸或棉花进行过滤。分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角培养瓶:若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角培养瓶,很多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。试管分装:液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度;固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。黑龙江培养基制备器

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