荧光微球分析技术属于化学材料发展结果，可用于细胞表面抗原的检测、退行性神经病变示踪物、吞噬功能的检测、血流分析、敏感性诊断试剂等，本文介绍了荧光微球分析技术以及荧光微球吞噬实验的操作步骤。 荧光微球分析 技术简介 荧光微球分析技术是近年来化学材料科学活跃发展 的产物，各种大小(0.2～10μm)可产生荧光和色彩的人工微球应运而生，目前各种材料人工合成、多种颜色和规格的荧光微球有2大类，一种是表面不带修饰基团的微球，另一种是携带各种化学修饰基团，包括羧基化修饰、氨基修饰、巯基或醛巯基修饰等的微球。 西安载药微球

如何制作纳米微球呢？ 离子交联法是制作纳米微球的基本方法之一，适用于以壳聚糖、海藻酸钠等 为材料的纳米微球。其主要原理是作为***载体的材料通过离子交联法从乳 液中析出，同时通过氢键相互作用和疏水相互作用将***包埋在载体中，从 而制备成载药微球。该方法制备条件温和，整个过程不使用对人体有害的试 剂，也成为载药微球的理想制备方法之一。 纳米微球的典型制备方法还有“乳化-溶剂挥发法”和“微流控法”。“乳 化-溶剂挥发法”是将模型***先溶解于有机溶剂中,然后滴加到含有表面活 性剂的水相中,在均质机的高速剪切下形成油相/水相型乳液,再通过常压或减 压方式除去乳液分散相中的挥发性有机溶剂,使纳米粒硬化,***通过冷冻干 燥从水性混悬液中收集纳米粒。“微流控法”是一种在微米尺度的通道中操 控两种或几种互不相溶的微小体积液体,连续、可控地生产具有高度单分散尺 寸的单乳液滴和多重乳液液滴的技术。 青岛载药微球哪家强

目前，制备微球的常用方法主要有乳化分散法、凝聚法及聚合法三种。根据所需微球的粒度与释能及临床给药途径不同，可选用不同的制备方法 。 1.乳化分散法 乳化分散法系指与载体材料溶液混合后，将其分散在不相溶的介质中形成类似油包水（W/0）或水包油（0/W）型乳剂，然后使乳剂内相固化、分离制备微球的方法。 （1）加热固化法 加热固化法系指利用蛋白质受热凝固的性质，在100～180℃的条件下加热使乳剂的内向固化、分离制备微球的方法。常用的载体材料为血清白蛋白，必须是水溶性的。常与25%白蛋白水溶液混合．加到含适量乳化剂的油相(如棉籽油)中，制成油包水的初乳，另取适量油加热至100-180℃．控制搅拌速度将初乳加入热油中，约维持20分钟，使白蛋白乳滴固化成球，用适宜溶剂洗涤除去附着的油，过滤、干燥即得。

2.凝聚法 凝聚法是指与载体材料的混合液中，通过外界物理化学因素的影响，如用带相反电荷、脱水、溶剂置换等措施使载体材料溶解度发生改变，凝聚载体材料包裹而自溶液中析出。凝聚法制备微球常用载休材料有明胶、阿拉伯胶等。 3.聚合法 聚合法是以载体材料单体通过聚合反应，在聚合过程中将包裹．形成微球。此种方法制备微球具有粒径小、易于控制等优点。 （1）乳化/增溶聚合法 乳化/增溶聚合法系将聚合物的单体用乳化或增溶的方法高度分散，然后在引发剂作用下，使单体聚合，同时将包裹制成微球的方法。该法要求载体材料具有良好的乳化性和增溶性、且聚合反应易于进行。 （2）盐析固化法 盐析固化法又称交联聚合法，向含有的高分子单体溶液中加入适量的盐类沉淀剂如钠使溶液浑浊而不产生沉淀，制得的颗粒粒径约为1～5μm，然后再加人交联剂固化，可得到稳定的微球。

如何精确控制和大规模化生产裸眼看不到的纳米微球并赋予这些材料的功能， 以满足现代产业的需求是当今纳米材料科学家**重要的研究方向。纳米微球 的关键技术问题和研究方向如下： 1） 纳米微球粒径大小径及粒径分布精确控制关键技术: 纳米微球的应用非常***,不同的应用需要不同性能的微球,很多**应用都 对微球的粒径大小和均一性都有极高的要求，如液晶间隔物微球和导电金 球都要求能精确控制粒径大小（平均粒径精度控制在50纳米以下），粒径分 布满足变异系数小于3%,. 因此不同材料组成的纳米微球的精确粒径大小和分 布本领域首要解决的关键技术问题 2） 纳米微球的孔径大小,孔径分布和比表面精确调控关键技术: 在很多应用领域，不仅要严格控制微球材料、粒径大小、分布和机械强度， 还要调控微球的比表面积、孔道结构等,如用于生物分离和分析的微球介质和 色谱填料，微球粒径大小、均一性、纳米孔道结构都会影响生物分子分离和 分析效果，因此如何调控微球孔道结构，比表面积也是关键技术之一。北京载药微球

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理想微球的微观形态应为圆整球型或椭圆形实体，形态饱满，颗粒的大小应尽可能均匀，微球之间无粘连。通常粒径在1～250μm的称微球，而粒径在0．1～1μm的称亚微球，粒径在10～100nm的称纳米球。微观形态的观察可使用扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)，以及原子力学显微镜(AFM)。SEM是目前观察微球形态使用**广的方法，被用于表面及切面形态的观察。TEM分辨率高，适用于亚微球、纳米球粒径测定。AFM优点之一是分辨率高，与SEM相比，不需要对样品进行金属喷镀，避免了喷镀后对样品的表面形态造成的破坏，并且AFM允许在液态环境下观测样品，而SEM则不行。但是AFM缺点是观察范围窄，得到数据不具有统计性，适合单个粒子表面形态的观察西安载药微球

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