做好对照正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。实验条件的选择在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。附近哪里有性价比高的生物检测试剂盒?上海蓝侣生物科技知晓!杭州生物检测试剂盒常用知识
ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面:1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。2、研究抗酶抗体的合成。3、显现微量的免疫沉淀反应。4、定量检测体液中抗原或抗体成份。青浦区个性化生物检测试剂盒上海蓝侣生物科技,专业介绍生物检测试剂盒的质量把控!
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。
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解决办法:若室温太低(<19℃),请于操作步骤4,适当延长温育时间。d.原因:未使用试剂盒的清洗液清洗。解决办法: 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。e.原因:试剂盒已过有效期限。解决办法:请更换成仍在有效期限内的试剂盒。2. 标准曲线线性不佳,或是平行性不好。a.原因:温育位置避光不好或受到气流干扰。解决办法: 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。b.原因:操作时间拖太久。解决办法:请在方法熟练后再进行操作。c.原因:微孔间相互污染。解决办法: 加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。d.原因:标准品或酶标记物所加入的量不一致。解决办法:请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合性。e.原因:添加样品或试剂的操作方法不正确。解决办法:加样品或试剂时,吸头请勿接触微孔。f.原因:洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。服务生物检测试剂盒,上海蓝侣生物科技服务团队专业吗?杭州信息化生物检测试剂盒
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