标记神经元：在动物体内，特定的荧光染料可以稳定且持久地标记皮质脊髓神经元，用于病理生理学研究和切片膜片钳研究。如将Fluoro-Red和Fluoro-Green注入麻醉新生大鼠的颈脊髓，固定的脑切片显示出离散的内部皮质层中细长或金字塔形细胞轮廓中的***荧光，与V层锥体细胞一致，并且标记的神经元使用切片膜片钳方法显示出自发突触活动4。用于细菌成像：有机荧光染料可用于大肠杆菌的超分辨率成像实验。通过分光光度计测定大肠杆菌的生长曲线，以及将大肠杆菌与有机荧光染料尼罗红共孵育，在超分辨率显微镜下实现了大肠杆菌细胞壁的荧光标记。这一实验既结合了生物化学和分析化学相关实验及仪器的原理和操作，也有利于学生深入了解新型的细菌荧光标记技术6。近红外荧光寿命成像：近红外（NIR）染料在小动物成像和漫射光学断层扫描中用作荧光标记。通过三种方式将现有的共聚焦和多光子激光扫描显微镜（LSM）与时间相关单光子计数（TCSPC）荧光寿命成像（FLIM）系统相适应，用于近红外FLIM。测试的许多近红外染料在生物组织中显示出明显的寿命变化，取决于它们所结合的组织结构，因此近红外FLIM可以提供有关组织组成和局部生化参数的补充信息7。荧光染料作为一种重要的科研和应用工具，近年来得到了广泛的关注和研究。多肽荧光染料Cy3

特异性结合：生物标志物靶向荧光探针是克服早期**检测困难的关键。例如，设计合成的双光子荧光探针（NP-C6-CXB）用于检测环氧合酶-2（COX-2）生物标志物。该荧光探针以萘酰亚胺为荧光基团，塞来昔布为靶向基团，在COX-2存在时，在溶液和*细胞中发出明亮的荧光，并且表现出很好的选择性。其荧光强度与*细胞中COX-2酶的含量成正比，为COX-2酶表达的**识别和切除提供了可视化工具29。基于塞来昔布和苯并吩噁嗪的近红外发射（700nm）荧光探针（NB-C6-CCB），用于检测细胞内高尔基体中COX-2酶。在COX-2高表达的肿瘤细胞或组织中，该探针发射出近红外荧光29。纳米载体的作用：聚合物纳米载体（胶囊、胶束和二氧化硅纳米颗粒）可作为荧光探针的载体，将荧光染料的“智能”特征整合到合成材料中。结合在pH值或光照射发生变化时会裂解的生物反应性成分，是成功设计此类载体的基础，这种载体具有在目标部位特异性加载和释放***剂的能力8。例如，从柿子果实中制备的高荧光氮掺杂碳点（PCDs），通过1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺耦合反应，将***药物阿霉素和吉西他滨固定在PCDs表面，形成PCDs@Dox和PCDs@Gem纳米杂化物，用于生物成像和caspase诱导的细胞凋亡应用30。黑龙江济南荧光染料荧光染料在细胞内离子浓度测量中起着重要的作用，不同种类的荧光染料在测量细胞内离子浓度时存在具体差异。

DiI染料标记机制DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanineperchlorate）是一种亲脂性的荧光染料，常用于神经元标记。在大鼠中，通过结晶状的荧光DiI可以对牙初级传入神经元（DPANs）进行逆行荧光标记。在小鼠中，虽然也可以使用DiI进行标记，但之前*能使用Fluoro-Gold这种具有神经毒性的荧光染料，且其膜穿透特性优于碳菁染料。后来研究人员对DiI在大鼠中的标记技术进行了重新评估，旨在将其应用于小鼠。新型的DiI配方具有改进的穿透性能和染色效率，可以评估轴突染料从应用部位到三叉神经节的运输速度、染色的DPANs数量以及荧光强度。其标记机制主要是利用DiI的亲脂性，能够与神经元细胞膜结合，随着轴突的运输而扩散到神经元的各个部位，从而实现对神经元的标记。

肿瘤细胞成像：近红外荧光染料IR-780具备使多种肾透明细胞*细胞显像的能力，对正常肾胚上皮细胞则无此能力，可用于血液中肾透明细胞*细胞的特异性诊断。这为肿瘤细胞的检测和诊断提供了新的方法21。疾病标志物检测：设计合成的近红外荧光探针RB-Phenylacrylate(NOF1)，用于高选择性和高灵敏度检测半胱氨酸(Cys)，并成功应用于活细胞、斑马鱼和小鼠中半胱氨酸的近红外荧光成像检测。近红外荧光探针RB-Phenyldiphenylphosphinate(NOF2)用于过氧亚硝酸根的荧光成像，实现了活细胞和小鼠炎症模型中ONOO?的荧光成像检测。这些探针为疾病标志物的检测和成像提供了新的手段23。四、支持超分辨率成像新型近红外氧杂蒽荧光染料如KRhs，可用于超分辨率成像。KRhs显示出强烈的近红外发射峰，在700nm处具有高荧光量子产率，且在没有增强缓冲液的帮助下，表现出随机荧光开关特性，支持单荧光团的时间分辨定位。KRhs被功能化为KRh-MitoFix、KRh-Mem和KRh-Halo，分别具有线粒体、质膜和融合蛋白靶向能力，可用于活细胞中这些目标的超分辨率成像20。染料的细胞毒性也会影响其在细胞内的稳定性。

    共振成像（MRI）：如文献《优化实验动物眼部磁共振成像技术》中提到，选用了5只健康的SD大鼠，利用。通过精确的定位和细致的扫描参数调整，对比了T2WI与FLASH两种成像技术，以评估图像质量。研究结果显示，利用大鼠头部线圈结合精确的定位技术，成功获得了高质量位置统一的眼部MRI图像。FLASH序列在眼部结构成像中展现出更高的信噪比（SNR），从而提供了更为清晰的图像和更丰富的组织细节1。MRI技术的优点在于具有高分辨率、无辐射损伤等特点，可以提供软组织的详细结构信息。但同时，MRI设备昂贵，扫描时间较长，对动物的配合度要求较高。正电子发射断层扫描（PET）/计算断层扫描（CT）：在文献《开发新型动物摇篮的小动物多重成像方式：采集和评估高通量多鼠成像》中，提到开发了一种可以修改和调整以适应多种成像模型（如正电子发射断层扫描（PET）/计算断层扫描（CT）和磁共振成像（MRI）的新型动物摇篮。可以使用这种新开发的摇篮来获取具有PET/MRI和PET/CT图像的高吞吐量多鼠成像（MMI）的融合图像4。PET/CT结合了PET的功能成像和CT的解剖成像优势，可以同时提供动物体内的代谢信息和解剖结构信息。但该技术需要使用放射性示踪剂，对动物有一定的辐射风险。 动物成像技术不仅在医学研究中具有重要应用，还可以拓展到其他领域。黑龙江济南荧光染料

使用双重荧光染料标记的氧化铁磁性纳米颗粒（MNP），研究荧光检测在程度上可以反映其在生物动物中的命运。多肽荧光染料Cy3

影响成像的清晰度提高图像对比度：稳定的荧光染料可以在较长时间内保持较高的荧光强度，使得目标组织与周围组织之间的对比度更高。例如，在ATP荧光纳米探针基于ZIF-90和近红外染料用于**小鼠成像的研究中，CP@ZIF-90纳米探针具有***的光稳定性和化学稳定性，在检测ATP时具有**长的发射波长（705nm）和比较大的荧光增强（32倍），能够成功用于活细胞（293T和CT26细胞）中内源性和外源性ATP水平的实时荧光成像2。相比之下，不稳定的荧光染料可能会随着时间的推移而减弱荧光强度，降低图像的对比度，使得目标组织难以清晰地显示出来。增强图像分辨率：稳定的荧光染料有助于提高成像的分辨率，使图像更加清晰地显示动物体内的细微结构。例如，在多光谱光声成像小动物中荧光染料的研究中，通过多光谱方法对目标发色团和荧光染料进行灵敏区分，以25fmol的灵敏度和150μm的空间分辨率对小动物中荧光染料的深度分辨分布进行成像5。如果荧光染料不稳定，可能会导致成像分辨率下降，无法清晰地显示动物体内的细微结构，影响对疾病的诊断和研究。多肽荧光染料Cy3