与常规的PCR的方法相比,dPCR有很好的优势。
***定量
常规PCR和实时荧光PCR定量检测都需要已知拷贝数的标准DNA制定标准曲线,由于样品测定在各种条件上不会完全一致,会造成PCR扩增效率的差异,从而影响定量结果的准确性。而ddPCR不受标准曲线和扩增动力学影响,可以进行***定量。
样品需求量低
在检测珍贵样品和样品核酸存在降解时具有明显的优势。
高灵敏度
ddPCR本质上是将一个传统的PCR反应分成了数万个**的PCR反应,在这些反应中可以精确地检测到很小的目的片段的差异、单拷贝甚至是低浓度混杂样品,且能避免非同源异质双链的形成。
高耐受性
由于目的序列被分配到多个微滴中,***降低了体系间的影响以及背景序列和***物对反应的干扰,扩增基质效应大大减小。 开放式平台,支持用户自行开发试剂、产品。苏州数字PCR代理商
MicroDrop-100系统产品特点
一、适应性广,灵活性高
1、理论上可覆盖qPCR(荧光定量PCR)的所有应用
2、样本多样性,样本通量可达96个样本,支持灵活设定
3、开放式平台,支持用户自行开发试剂、产品。
二、灵敏度高,准确性高
1、***定量——无需依赖标准曲线
2、采用微滴式技术高达100,000个的微滴
3、线性范围达到6个数量级,灵敏度高达万分之一
三、可分析复杂混合物
1、准确度不完全依赖于扩增效率
2、双通道荧光检测,支持EvaGreen染料及探针法
3、支持多重数字PCR
四、操作简单,使用方便
1、全封闭防污染设计,一键式自动化操作。
2、可选全中文分析软件 南通永诺数字PCR代理商MiniDrop?研发团队由微流控、光学、机电学、化学、临床医学、分子生物学等多学科交叉领域的**组成。
数字PCR为juedui定量,qPCR为相对定量,数字PCR较qPCR更精细、更灵敏。所以说,未来数字PCR将成为qPCR的重要补充,在部分领域逐步替代荧光定量PCR。
未来这些领域将广泛应用到数字PCR:
科研:高校(生命科学学院、环境学院、医学院、药学院)等。
医院:病理科、血液科、妇产科、心血管科、检验科、转化医学中心
:研究院单位、疾控中心、海关(出入境检验检疫)、质监局、环境/环保局等。
企业:第三方检测机构、IVD(分子体外诊断试剂)、生物制药等。
相对于二代测序、基因芯片和定量PCR而言,数字PCR具备以下优势:
· 能够有效区分浓度差异微小的样品:更好的准确度、精密度和重复性,可以用于精确测定靶基因的相对表达,基因拷贝数变异分析等。
· 数字PCR可开发针对不同**、不同样本以及不同的样本环境提供检测解决方案,该技术的应用范围广,尤其在液体活检领域,已开发针对肺*、乳腺*、肠*、胃*等上百个位点检测试剂盒,可精细指导临床***的诊断,以便患者在后续得到更及时并且适当的***方案提供。 液体活检:早筛、用药、监测、复发。
研究方向
无创产前筛查
无创伤的产前诊断, 如21号染色体为3倍体的唐氏综合征、已知父母基因型的胎儿地贫检测或已知父母基因型的其它核酸病检测(孟德尔相关遗传疾病)。目前标本来源主要为血液,而待检测的胎儿DNA受到母体DNA的干扰,影响了检测的准确性。而QX200检测系统独特的微滴化技术完全可以作为二代测序法的补充来进行的无创伤产前诊断,从而提高工作效率及节约成本。
转基因食品或成分的检测
目前在确定转基因作物或成分的含量时采取定量PCR的标准曲线法,这种方法需要依赖于已知浓度的标准品(Certified Reference Materials Calibrants, CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以彻底解决这些标准物质的定标工作。 准确度不完全依赖于扩增效率。苏州微流控芯片数字PCR代理商
样本多样性,样本通量可达96个样本,支持灵活设定。苏州数字PCR代理商
定量PCR和数字PCR的特点:
5. 目前定量PCR已经能实现高通量样品条件下的自动化操作。
6. 数字PCR在单分子层面上的***定量,可以彻底摆脱对标准曲线的依赖而直接给出靶序列的拷贝数,提高了实验结果在批内和批间的稳定性,甚至能用来对标准品进行定标。
7. 基于***定量的方式,数字PCR结果的高重复性和高精度可实现微小差异的基因表达分析,如等位基因的不平衡表达、单细胞基因表达分析、microRNA表达分析等等。所谓“微小差异”的标准一般而言是指表达水平的差异在2倍以内。
8. 同等条件下,数字PCR在灵敏度方面拥有优势,使得该技术已成为**的液态活检、病原微生物检测、转基因成分测定、宿主残留DNA分析等的热门技术。
浚和(上海)仪器有限公司是一家供应国内外先进仪器和设备的专业供应商和服务商,致力于为客户提供专业的定制化解决方案。多年来,持续为医药、化工、高校、科研单位、检测院等多个行业提供先进的产品和专业的服务。
浚和在不断引进国内外先进仪器设备的同时,结合行业和市场需求,加强和客户之间的沟通,并与国际上多家**仪器设备制造商保持着长期稳定的合作关系,不定期地与合作商进行技术交流,努力加强自身技术力量。公司配备了数名有着多年行业经验的技术人员,依靠雄厚的技术实力、科学合理的配置方案、专业的安装调试和周到的售后服务,得到了广大用户的支持与信赖。
公司主要经营产品包括:等离子清洗机、真空泵、喷雾干燥器、数字PCR、高压灭菌锅、培养箱、切片机、水分测定仪、激光粒度仪、光谱仪、温湿度记录仪等,目前主要合作品牌有:日本雅马拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、广州永诺 、日本KEM等。同时,公司还提供专业的技术服务,如设备的维护、验证等。
浚和仪器将始终以行业特点为立足点,以客户需求为导向,不断地提高自身专业技术能力,不停地完善客户服务质量,在发展中保持创新的精神,力求与客户共同进步,为行业的发展作出不懈的努力。