在细胞培养实验里,DMEM 培养基的使用过程需严谨规范。收到培养基后,应及时存放于 2-8°C 的环境中,低温可有效减缓培养基内成分的降解速度,确保其营养成分的稳定性。在使用前,需将培养基预热至 37°C,模拟人体体温环境,让细胞在适宜温度下开启生长旅程。同时,由于 DMEM 培养基多采用碳酸氢钠缓冲系统,需将培养环境的 CO?浓度维持在 5 - 10%,以此精细调控培养基的 pH 值处于 7.2 - 7.4 的生理适宜区间,为细胞打造稳定且舒适的 “居住空间”,促进细胞健康生长。Ham’s F-12营养混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)是由Ham以Ham’s F-10营养混合物为基础设计而成的。重庆医用细胞培养基厂家
无血清培养基中通常需要添加一些额外的组分,才能帮助细胞贴壁生长,包括以下几大类物质:1)促贴壁物质:一般为细胞外基质,如纤连蛋白、层粘连蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子,对许多细胞的繁殖和分化,起着重要作用。纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化,这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞等。2)促生长因子:针对不同细胞添加不同的生长因子。也是刺激细胞生长、维持细胞功能的重要物质,有些是许多细胞必不可少的,如胰岛素。3)酶抑制剂:培养贴壁生长的细胞,需要用胰酶消化传代,在无血清培养基中需含酶抑制剂,以终止酶的消化作用,达到保护细胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制剂。4)结合蛋白和转运蛋白:常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比较大,可增加培养基的粘度,保护细胞免受机械损伤。许多旋转式培养的无血清培养基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常见的。重庆医疗细胞培养基供应商家Fischer’s培养基不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。
CMRL培养基是由康诺特医学研究室(ConnaughtMedicalResearchLaboratories)设计出来的,初用于L细胞(Earle)的无血清培养。CMRL培养基添加马血清或小牛血清后,特别适用于猴肾细胞的克隆培养以及其他哺乳动物细胞系的培养。本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。注意事项本产品经过滤除菌,使用时应注意无菌操作,避免污染;为保持本产品的比较好使用效果,请勿进行冻融处理;本产品用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和。
DMEM,即 Dulbecco 改良的 Eagle 培养基,在细胞培养领域占据着极为重要的地位。它源于经典的 Eagle 培养基,经科学家 Dulbecco 改良优化后,焕发出全新活力。DMEM 培养基成分丰富,氨基酸浓度是原始 Eagle 培养基的两倍,还涵盖了非必需氨基酸,为细胞蛋白质合成筑牢根基。其维生素含量亦是 Eagle 培养基的四倍之多,积极参与细胞内各类代谢反应,助力细胞维持正常生理功能。同时,培养基中包含酸,这一糖酵解途径的关键物质,在细胞能量供应方面发挥着重要作用,时刻为细胞的生命活动提供动力支持。Dulbecco’s 改良培养基–DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)现已广应用于各种细胞的培养。
Dulbecco’s改良培养基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素的含量增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子等。DMEM培养基**初设计葡萄糖含量为1000mg/L(低糖型),后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L(高糖型),现已广泛应用于各种细胞的培养。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产,例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。不含葡萄糖的培养基可以根据研究需要,随意调节葡萄糖的浓度,方便快捷。L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养元素,但其在溶液中不稳定,会自发降解,不含L-谷氨酰胺的培养基,可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量,在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。 MEM培养基含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,主用于贴壁细胞培养,修改后也可用于其他细胞培养。湖北RPMI-1640细胞培养基检测
高糖 DMEM 适合生长快、粘附低的细胞,如肿瘤细胞的培养 。重庆医用细胞培养基厂家
DMEM 培养基在细胞毒性测试中发挥着重要作用。在评估药物、化合物或化妆品对细胞的毒性影响时,将细胞置于 DMEM 培养基中,再加入待测试物质。科研人员通过观察细胞在含测试物质的 DMEM 培养基中的生长状态、形态变化、增殖能力以及细胞死亡情况等指标,判断测试物质的细胞毒性强弱。比如,在新药研发初期,利用 DMEM 培养基进行细胞毒性测试,可初步筛选出细胞毒性较低的药物候选物,减少后期研发风险,为新药研发的安全性提供重要保障。重庆医用细胞培养基厂家
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