美国HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析仪已经被FDA和国内外毒理学实验室所使用。本试验研究目的对精子分析仪和血细胞计数板在大鼠附睾精子计数结果的比较验证。方法选取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,对三批次雄鼠的精子计数进行比较。健康雄鼠通过戊巴比妥钠麻醉实施安乐死后,取左侧附睾尾称重,将附睾尾部放入37℃预热的含有M199培养液平皿中,剪碎附睾尾,放入培养箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子悬液,用M199培养液进行一定倍数的稀释,混匀后,取1滴稀释液,滴入精子分析仪**载玻片上,将载玻片放入TOXIVOS精子分析仪载物台,进行精子计数,同时吸取稀释后的精子悬液滴入血细胞计数板内,通过光学显微镜进行计数,比较两种计数方法的差异性。结果***批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为165.9±91.7,140.0±59.6。三个批次的精子分析仪和血细胞计数板的精子计数结果无统计学差异(P>0.05)。结论精子分析仪是一种方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理学研究中具有重要的应用价值。CASA系统操作简便，检测速度快，且重复性优于人工检测。香港全自动化精子分析WOB

医生处置质量是指诊断质量?是以当今医学科学知识、技术为基础依据症状来完成的。CASA系统可以为医生提供优于传统精子分析的手段和快速准确的分析结果［5］。CASA在医生处置质量方面的特点在于：①当CASA系统的参数设定和样品的处理方式（温度、稀释法、缓冲液）确定时?通过个体内和个体间的比较?CASA的精子活力重复性明显好于直观评估［6］。②实验室数据资料是质量的一部分?CASA系统所有数据都是直接在线获得的?因此明显优于其他方法［6］?记录传递到数据库的过程无错误发生?可清楚准确地打印出结果。所有的数据可直接转换到数据库、能够对***前和***后测定的数据进行统计学比较［9］、质量控制数据的采集与保存、每天的标本测试记录以及许多其他报告等等?如此大量数据的处理只有在计算机中才能完成。但是CASA系统的参数设定也许限制了其质量?特别是在精子形态学检查中?通过CASA系统对精子形态学特征进行分析［7］?这些特征（细胞大小、形状、光学密度、尾的存在以及其它）可由操作者选择?这样就会引起同一标本在不同实验室或不同分析者测得的结果一致性较差［8］。就形态学分析而言?传统方法的可变性远远大于CASA分析。马精子分析ALHWHO第6版明确提出：使用CASA系统须遵循适当的程序步骤，才能获得可靠和可重复的结果。

方法:使用两种已知浓度的质控乳胶珠溶液,1份浓度为(35±5)×106/ml,另1份浓度为(18.0±2.5)×106/ml,评价4种计数方法的准确性和精确性,并比较4种方法计数精液的结果。结果:计数乳胶珠时,CellVU计数池的结果**接近已知浓度,分别为(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,变异系数(CV)值分别为12.80%和10.58%;血细胞计数池和Makler计数池结果均高于已知浓度,前者为(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分别为10.81%和8.89%,后者为(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分别为14.86%和14.96%;CASA系统结果低于已知浓度,为(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比较低,分别为7.22%和6.50%。计数精液时,CellVU计数池与CASA系统结果差异无***性(P=0.71),分别为(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血细胞计数池和Makler计数池结果差异无***性(P=0.14),分别为(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU计数池、CASA系统与血细胞计数池、Makler计数池结果间差异***(P<0.05或P<0.01)。结论:计数精液时,CASA系统与CellVU计数结果差异无***性。各实验室可选择合适的手工或CASA计数方法。

精子分析仪使用注意事项1.样品制备是CASA取得高质量检查结果的关键。CASA采用深度为10um样品池，能保证精子在单层界面内自由运动。取样分析前标本必须充分混匀，用微量取液器取5~7ul**加入样品池中，用0.5mm厚皿盖片盖紧。2.不洁净的计数池可影响精子的活力，尤其影响灰度CASA精子计数的准确性。3.精子样品密度过大时，造成图像处理上的粘连，无法分析每个精子的运动特性。**中所含精子太少时，需增加检查视野数量或者使用低倍物镜观察，以提高样品检出率。Hamilton Thorne自动精子分析仪具有高精度、高效率和自动化的优点。

测定精子密度和精子总数的方法主要包括显微镜计数和全自动分析。1.显微镜计数：这是传统的测定方法，需要收集精液，通常是使用量杯。收集后，应在实验室中尽快进行计数。应在光学显微镜下将精子进行分类，这一步非常重要，因为完整的精子才能被计数。然后，将剩余的精液样本通过自然沉降或离心的方法让精子下沉，通过显微镜观察并计数。这种方法需要一定的经验和技巧，而且受到许多因素的影响，如精子的活动性、浓度、形态等。2.全自动分析：随着科技的发展，现在有全自动的精子分析仪，可以快速准确地测定精子密度和总数。这种方法通过激光技术进行，可以测量大量精子，包括前向运动的精子。这些仪器通常可以提供更精确的结果，并且减少了人为错误。在进行精子计数前，男性应避免长时间禁欲，因为这可能会影响精子的数量和质量。同时，健康的饮食和生活方式也有助于提高精子的数量和质量。精子分析，直线速率（VSL）?：精子头在开始检测时的位置与终止所处位置之间的直线运动的时均速率。南京兔子精子分析STR

精子分析，平均角位移（MAD）?：精子头沿其曲线轨迹瞬时转折角度的时均J对值?。香港全自动化精子分析WOB

精子计数是在显微镜下计算一次排出的精液中精子的数量将精子计数值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后将样本按一定比例稀释和固定后，滴于血细胞计数板上，在显微镜下计数红细胞计数区内的所有精子数并换算为每m1内所含精子数。此外还可用电子细胞计数仪经调整阈值设置后计数精子数量。将已经液化的精液标本均匀混合，用白细胞计数吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀释液至11刻度，振荡三分钟，然后置于血球计数板内，计数二大格（每格面积1平方毫米）之精子数，在尾数后加5个“0”即得每毫升精液内精子数。例如计数为1280个，则每毫升精子应为128,000,000。精液稀释液之配制：重碳酸钠5克、福尔马林1毫升、蒸馏水加至100毫升。稀释液内重碳酸钠有消化粘液的作用，福尔马林有使精子制动的作用。如精液之稠度过高而不易吸取时，可以精液1毫升混匀于稀释液19毫升内，稀释后进行计数。如精子的数目极少，亦可改为稀释10倍计数。每次排精75%的精子是从附睾尾部所贮存的，还有25%是由输精管道的其他部分来的，因此单凭一次排精的精子计数来衡量睾丸生精机能是不***的。只有在排精后间隔4-5天以后多次精液检查，才能比较正确地从这些精子计数来反映睾丸的生精机能。香港全自动化精子分析WOB