SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可测定蛋白质分子量。其原理是带大量电荷的SDS结合到蛋白质分子上克服了蛋白质分子原有电荷的影响而得到恒定的荷/质比。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测蛋白质分子量已经比较成功,此法测定时间短,分辨率高,所需样品量极少(1~100μg),但只适用于球形或基本上呈球形的蛋白质,某些蛋白质不易与SDS结合如木瓜蛋白酶,核糖核酸酶等,此时测定结果就不准确。聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于蛋白质定量。电泳后的凝胶经凝胶扫描仪扫描,从而给出定量的结果.凝胶扫描仪主要用于对样品单向电泳后的区带和双向电泳后的斑点进行扫描。电泳设备涂装技术是国内外表处理作业的将来的趋势。昆山镁合金电泳企业
电泳涂装设备可以分为连续通过式和间歇垂直升降式两大类,连续通过式电泳设备组成流水生产线,适于大批量涂装生产,在工业上应用很广;而间歇垂直升降式,初始形式是采用单轨电葫芦,用人工控制,适用于批量较小的涂装作业。近年来随着计算机技术的进步,机电一体化技术发展很快,用微机控制垂直升降的程控小车已在涂装生产线获得应用,它同连续通过式电泳设备相比,同样批量的生产线长度明显缩短,而且具有灵活变化各工艺过程的优点,备受人们的关注。超哑电泳生产电泳设备涂装与上世纪六七十年代起源于美国。
支持介质的筛孔大小对待分离生物大分子的电泳迁移速度有明显的影响。在筛孔大的介质中泳动速度快,反之,则泳动速度慢。电泳喷涂的工艺流程: 工件上挂(不锈钢、铝、铜)→超声波除蜡除油→水洗→纯水洗→纯水洗→红铜色电泳 漆→纯水洗→纯水洗→纯水洗→烘干→下挂。各段工艺控制要点:1、工件成型后在上挂之前,表面应先经过接丝或者化学抛光后,再进行红铜色电泳涂装。2、上挂:要求挂具清洁,接触点好,工件牢靠不晃动。3、超声波除油除蜡:以K-106A超声波除油除蜡剂为例,按K-106A: 纯水=1:5 比例进行配槽,其温度控制在 0~50℃,时间选择在 1~10min。4、纯水洗:纯水质量要严格控制电导率〈5μs/cm,而且进槽前后一道水洗槽内电导率不 得高于 10μs/cm。5、红铜色电泳:以K-8087 聚氨脂丙烯酸阴极电泳漆为例,配槽比例。油性色浆 KLK-8262 红铜浆比 KLL-8087 树脂=1 比 30~40,再 按树脂和色浆总和我五倍加入纯水,循环熟化进行生产,熟化时间为 24 小时。施工电压选 择 30~100V;施工时间选择:20~90S;槽液温度:28±2℃。
电泳涂装是把工件和对应的电极放入水溶性涂料中,接上电源后,依靠电场所产生的物理化学作用,使涂料中的树脂、颜填料在以被涂物为电极的表面上均匀析出沉积形成不溶于水的漆膜的一种涂装方法。电泳涂装是一个极为复杂的电化学反应过程,其中至少包括电泳、电沉积、电渗、电解四个过程。电泳涂装按沉积性能可分为阳极电泳(工件是阳极,涂料是阴离子型)和阴极电泳(工件是阴极,涂料是阳离子型);按电源可分为直流电泳和交流电泳;按工艺方法又有定电压和定电流法。目前在工业上较为普遍采用的是直流电源定电压法的阳极电泳。电泳设备涂装成膜快、能耗低,以20微米的膜度。
聚丙烯酰胺凝胶电泳结果不正常现象和对策:1.指示剂前沿呈现两边向上或向下的现象。向上的“微笑”现象说明凝胶的不均匀冷却,中间部分冷却不好,所以导致凝胶中分子有不同的迁移率所致。这种情况在用较厚的凝胶以及垂直电泳中时常发生。向下的“皱眉”现象常常是由于垂直电泳时电泳槽的装置不合适引起的,特别是当凝胶和玻璃板组成的“三明治”底部有气泡或靠近隔片的凝胶聚合不完全便会产生这种现象。2.“拖尾”现象是电泳中常见的现象。这常常是由于样品溶解不佳引起的,克服的办法是在加样前离心,选用合适的样品缓冲液和凝胶缓冲液,加增溶辅助试剂。另一方法是降低凝胶浓度。电泳漆槽普通由几个局部组成。无锡华为电泳加工
电泳设备涂料以水为稀释剂属于低VOC,无火灾危险性。昆山镁合金电泳企业
电泳中蛋白带模糊不清和分辨不佳是由于多种原因引起的。虽然梯度凝胶可以提高分辨率,但与其他方法相比,常规聚丙烯酰胺凝胶电泳是分辨率较低的方法。为了提高分辨率,不要加过多的样品,小体积样品可给出窄带。加样后应立即电泳,以防止扩散。选择合适的凝胶浓度,使组分得以充分的分离。通常靠近前沿的蛋白带分辨率不佳,所以应根据分子量与凝胶孔径的关系,灌制足够长度的凝胶,以使样品不会走出前沿。样品的蛋白水解作用也引起扩散而使分辨率降低。水解作用通常发生在样品准备的时候,系统中的内源性蛋白酶会水解样品蛋白,如果在缓冲液中加蛋白酶可以减少这种情况的发生。昆山镁合金电泳企业