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芯弃疾数字ELISA高灵敏

来源: 发布时间:2025-01-02

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从TNF-α数字ELISA测定的检测限为~150aM(2.5fg/mL),相当于全血中的~600aM(10fg/mL);市场上可用的ELISA对TNF-α的比较高灵敏度在血清中的LOD为21fM(0.34pg/mL)(补充图3)。两种方法的目标蛋白零浓度尖峰均为为这些实验提供有用的阴性对照:25%的血清含有多种蛋白质的微摩尔浓度,在这些高蛋白质背景之上可以检测到非常低浓度的目标蛋白。我们还开发了一个证明用于显示低浓度核酸可以检测到的DNA的主要数字分析方法,而无需复制目标


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生物实验室、医学实验室常见问题:ELISA使用繁琐、用时长、样本用量大、使用不够灵活。使用方法比较繁多,用时长,每次检测可能要花几个小时,经常半天就测试了一轮工艺;如果要根据结果来改善,就得再花上半天、一天;使用和实验安排不够灵活。ELISA试剂盒每次购买和使用,大多都要以整版方式进行,不够灵活。 科研数字ELISA芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,超敏检测,理论可达飞克级;

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数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应:1)SiMoA对酶标记的高度敏感性;以及2)通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签,抗体亲和力,试验背景,以及背景测量值的变异(%CV)27.SiMoA对酶非常敏感标签(图2)为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说,对于给定亲和力的抗体,其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定,SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明,数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合(NSB)与捕获珠表面结合(补充表2)。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度,明显减少了检测抗体(~1nM)和酶标记物(1–50pM)的需要,以检测结合事件,与传统方法相比(标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面,从而导致背景信号明显降低。

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我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。

光纤束购自SchottNorthAmericaouthbri,非增强型光泽硅片购自SpecialtyManufacturing(Saginaw,NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人,第7页盐酸、无水乙醇和分子生物学级别的吐温-20均购自西格玛-奥德里奇(圣路易斯,密苏里州)。2.7-μm-二羧基磁珠购自瓦里安公司(加利福尼亚州莱克福斯特)。单克隆抗人TNF-α捕获抗体、多克隆抗人TNF-α检测试剂和重组人TNF-α均购自R&DSystems(Minneapolis,MN)。单克隆抗PSA捕获抗体、单克隆抗PSA检测试剂和纯化的PSA购自BiosPacific(埃默里维尔,加利福尼亚州);使用标准方法将检测试剂抗体生物素化。1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基磺基琥珀酰亚胺(NHS)和SuperBlock®T-20封闭缓冲液购自ThermoScientific(Rockford,IL)。纯化DNA购自综合DNA技术公司(Coralville,IA)。 芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,每个生物实验室都能用的单分子检测;

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    芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内,从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积(~50fL),导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位,在第二步中,将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔(图1C)。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔,孔径为μm,孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下,用橡胶密封圈密封。Rissin等人,第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物(图1D)。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像,可以区分与单一酶分子相关的微球(“开启”孔)和不与酶相关的微球(“关闭”孔);补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数(图1D)。使用SiMoA,浓度是因此,我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,人人都用能得起的单分子检测;进口数字ELISA精密度

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超敏:芯弃疾.数字ELISA,与Simoa同样的检测方案,将检测结果二维化,使用成像方式,可精确量检测区多少个微球载体上发生免疫反应,具有阳性荧光信号,理论可达fg级;使用常规ELISA试剂,测试IL-6等演示指标,也可轻松达到亚pg级(0.2-0.5pg/mL);使用显微图像处理方法,得到数万个磁珠中,阳性的个数和亮度,建立标准曲线,得到待测指标的浓度。极低浓度时,检测信息为数字化信号,有效提高检测灵敏度到0.2 pg/ml级; 芯弃疾数字ELISA高灵敏

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