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国产数字ELISA

来源: 发布时间:2025-01-02

创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA

我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。

光纤束购自SchottNorthAmericaouthbri,非增强型光泽硅片购自SpecialtyManufacturing(Saginaw,NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人,第7页盐酸、无水乙醇和分子生物学级别的吐温-20均购自西格玛-奥德里奇(圣路易斯,密苏里州)。2.7-μm-二羧基磁珠购自瓦里安公司(加利福尼亚州莱克福斯特)。单克隆抗人TNF-α捕获抗体、多克隆抗人TNF-α检测试剂和重组人TNF-α均购自R&DSystems(Minneapolis,MN)。单克隆抗PSA捕获抗体、单克隆抗PSA检测试剂和纯化的PSA购自BiosPacific(埃默里维尔,加利福尼亚州);使用标准方法将检测试剂抗体生物素化。1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基磺基琥珀酰亚胺(NHS)和SuperBlock®T-20封闭缓冲液购自ThermoScientific(Rockford,IL)。纯化DNA购自综合DNA技术公司(Coralville,IA)。 芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,微量多重检测,微量样本就能同时测试4项指标;国产数字ELISA

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动力学上,对于200,000个微球分散在100μL中,珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA(分别为17.3和30kDa)的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明,在2小时的孵育过程中,蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次,必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中,通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球(见下文),这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到,对应于泊松噪声的可接受变异系数(CV)为6-7%。第三,过高的微球浓度可能导致:a)非特异性结合增加,降低信噪比;以及b)分析物与微球的比例过低,导致活性微球的比例过低,从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时,为了获得可接受的背景信号(1%)和泊松噪声)。 代理数字ELISA价格具有以下特点: 多重、超敏、微量、极速 灵活、开放!

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    创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。蛋白质生物标志物在区分健康和疾病状态方面的临床应用,而监测疾病进展则需要测量复杂样品中的低浓度蛋白质。目前的免疫测定方法测量的是蛋白质的浓度高于10?12M,6而大多数在病症7、神经疾病8,9和接触早期阶段10中重要的蛋白质的浓度被认为在10?16到10?12M之间。需要提高灵敏度的例子包括:一个由一百万个细胞组成的1毫米3疾病,每个细胞分泌5000种蛋白质到5升液体中。Simoa®由现任于哈佛大学医学院的DavidWalt教授作为科学创始人于2007年创立。DavidWalt是美国的工程院,艺术院和医学院三院院士。2010年,DavidWalt将Simoa®技术以封面文章的形式发表在《NatureBiotechnology》上,此技术开始为大众所知并引起业界轰动。Simoa技术(Single-moleculeArray,Quanterix公司)特点是通用阵列化检测,实现超高的灵敏度,较传统ELISA方法能够高出3个数量级,达到飞克级别(fg/ml)甚至更低。已拿阿兹海默症的两个FDAbreakthroughdevice;通常用于各种科研方向:神经因子、蛋白组学、细胞因子等。

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只有少量分泌蛋白可测量的可能性突显了蛋白质测量领域面临的挑战:医学上相关的生物标志物可能存在于非常低的丰度中。免疫测定仍然是是蛋白质生物标志物敏感和特异性测量的基础。然而,传统的免疫分析技术在检测不可测量的生物标志物时灵敏度不足,这些生物标志物肯定位于当前可检测范围之下。主流的传统免疫分析方法——包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光和电化学发光——的灵敏度下限约为10^-13M(~<0.1pM)。许多降低灵敏度的方法已被描述,包括拉曼增强信号检测、电感耦合等离子体质谱,但这些方法的数据表明其成功有限。非常规方法如亚飞摩尔级检测具有明显的权衡,例如程序较长或无法提供定量答案。
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    芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列(图1C)我们称之为单分子阵列(SiMoA)——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步(图1A),在微球(直径μm)上形成一个三明治抗体复合物,结合的复合物用酶标记,如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品,蛋白质的比值分子(以及由此产生的酶标记复合物)与微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布,导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如,如果在(3000个分子)的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质,并且在200,000个微球上进行标记,则珠子,然后,。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术(例如,平板阅读器)的标签,因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积(通常为),并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。 每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测;科研用数字ELISA微量试剂

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芯弃疾JX-8B数字ELISA产品是什么?怎么做到单分子技术的低成本实现?参考原理:

分子水平的疾病检测正在推动早期诊断和治病的新兴变革。该领域面临的一个挑战是,用于早期诊断的蛋白质生物标志物可能存在于非常低的丰度中。传统免疫分析技术的检测下限为飞摩尔范围(10?13M)。数字免疫分析技术将检测灵敏度提高了三个数量级,达到了飞摩尔范围(10?16M)。这一能力有可能在诊断和治病领域开辟新的进展,但这些技术已被限制为不适合高效常规使用的手动程序。我们描述了一种新的实验室仪器,该仪器能够完全自动化单分子阵列(Simoa)技术进行数字免疫分析。该仪器具有单分子灵敏度和多重检测,具有快速周转时间和每小时处理66个样本的能力。针对心血管、肿标、传染病、神经学和炎症研究中的16种感兴趣的蛋白质,开发了单分子和多重数字免疫分析方法。与传统方法相比,Simoa免疫分析方法的平均灵敏度提高了lELISAwas>1200倍,变异系数为<10%。数字免疫分析在推进人类诊断方面具有潜力,这在两个临床领域得到了体现:创伤性脑损伤和传染病的早期检测 国产数字ELISA

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