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飞克级数字ELISA快速检测

来源: 发布时间:2024-12-24

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每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

为了证明检测极低浓度的可能诊断价值使用数字ELISA检测血液中的蛋白质,对接受治理性前列腺切除术(RP)的患者血清样本中的PSA进行了测量。PSA是前列腺病的血清生物标志物病症既用作筛查工具,也用于监测住院患者的复发接受治理性前列腺切除术28。治理性前列腺切除术后,绝大多数PSA被消除,水平低于标准商用检测方法的检测限(3pM或0.1ng/mL)。定期监测这些患者的PSA恢复情况可以检测前列腺病的复发,但术后几年内生化复发可能不会被发现。 芯弃疾产品数字ELISA微量使用现有平台就能做的单分子免疫检测;

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芯弃疾JX-8B数字ELISA产品是什么?怎么做到单分子技术的低成本实现?参考原理:

分子水平的疾病检测正在推动早期诊断和治病的新兴变革。该领域面临的一个挑战是,用于早期诊断的蛋白质生物标志物可能存在于非常低的丰度中。传统免疫分析技术的检测下限为飞摩尔范围(10?13M)。数字免疫分析技术将检测灵敏度提高了三个数量级,达到了飞摩尔范围(10?16M)。这一能力有可能在诊断和治病领域开辟新的进展,但这些技术已被限制为不适合高效常规使用的手动程序。我们描述了一种新的实验室仪器,该仪器能够完全自动化单分子阵列(Simoa)技术进行数字免疫分析。该仪器具有单分子灵敏度和多重检测,具有快速周转时间和每小时处理66个样本的能力。针对心血管、肿标、传染病、神经学和炎症研究中的16种感兴趣的蛋白质,开发了单分子和多重数字免疫分析方法。与传统方法相比,Simoa免疫分析方法的平均灵敏度提高了lELISAwas>1200倍,变异系数为<10%。数字免疫分析在推进人类诊断方面具有潜力,这在两个临床领域得到了体现:创伤性脑损伤和传染病的早期检测

创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA;使用新型 的fg级超敏免疫检测simoa单分子产品原理;

它是一种DVD大小的圆盘,由24个阵列组成,每个阵列包含240微米大小的微孔,这些微孔呈径向排列,以便使用蓝光制造工艺和仪器内的液体处理并行处理。图2B显示了集成阵列及其相关流体通道的设计。每个阵列由216,000个40飞升大小的微孔组成,以六边形紧密排列模式排列在平面表面的3×4毫米区域内。每个微孔的标称尺寸为4.25μm直径、3.25μm深度和8μ米中心间距。流体通道深0.5毫米,通道和流体入口端口的总体积为74μLto,可容纳珠子和密封油溶液。通道中包含一个收缩部分以减少液体回流。微珠的分级是西莫亚技术的关键要求,微孔的几何形状足以容纳单个微珠(2.7μmdiameter;以下简称珠子)。西莫亚圆盘由环烯烃共聚物(COP)制造,因其具有高通量注塑成型的适应性,且成本低廉。具有良好的化学、生物和光学性能 芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,超敏检测,低至可测试到亚皮克级;

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    创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。循环血液转化为~2×10?15M(或2飞摩尔,fM);早期HIV传染血清中每mL含有10-3000个病毒颗粒,相当于p24抗原浓度范围为从50×10?18M(50attomolar,aM)到15×10?15M(15fM)10.尝试开发能够测量这些蛋白质浓度的方法集中在蛋白质上的核酸标记复制,11,12或测量整体、结合标记蛋白分子的性质13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金纳米颗粒和DNA生物条形码的标记物,已将蛋白质的检测范围扩展至低飞摩尔水平;更近使用该技术的一篇报道展示了检测到10飞摩尔PSA插入物17。这些方法所达到的灵敏度然而,检测蛋白质仍然落后于核酸,如聚合酶链反应(PCR),从而限制了蛋白质组中具有已在血液中检测到6,19。单个蛋白质分子的分离和检测为测量极低浓度的蛋白质s1,2提供了一种有希望的方法。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,每个医学实验室都能用的单分子检测;哪些是数字ELISA使用灵活

6)数字化高敏ELISA芯片试剂盒,10ul样本可同时测2-4个指标;飞克级数字ELISA快速检测

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动力学上,对于200,000个微球分散在100μL中,珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA(分别为17.3和30kDa)的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明,在2小时的孵育过程中,蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次,必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中,通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球(见下文),这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到,对应于泊松噪声的可接受变异系数(CV)为6-7%。第三,过高的微球浓度可能导致:a)非特异性结合增加,降低信噪比;以及b)分析物与微球的比例过低,导致活性微球的比例过低,从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时,为了获得可接受的背景信号(1%)和泊松噪声)。 飞克级数字ELISA快速检测

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