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干热灭菌生物指示剂操作流程

来源: 发布时间:2025-07-09

过氧化氢灭菌生物指示剂的芽孢计数方法 过氧化氢灭菌生物指示剂芽孢计数—操作方法?随机抽取需检验批次生物指示剂 4片(支)与相关物品一并放入安全柜中,用酒精棉擦拭外表面,通风15min以上,后续操作如下:特别提醒:不可将指示剂进行紫外照射,否则会造成计数结果偏低!!! 01芽孢洗脱 在生物安全柜中,取出生物指示剂载体,分别放置于无菌试管中,向试管中加入 10 mL无菌纯化水,于涡旋混匀仪上震荡2min,转移至超声波清洗机中,设置频率为40KHz,处理15min,将该试管记为10-1。 特别提醒:不要将多片载体放置到一个容器中进行洗脱,载体相互堆叠可能影响洗脱效果,造成计数结果偏低。过氧化氢低温灭菌效果存疑?泰林生物指示剂给您答案。干热灭菌生物指示剂操作流程

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压力蒸汽灭菌生物指示剂芽孢计数之热激活处理、梯度稀释(106浓度)和培养计数 将上述10-1试管放置于95℃~100℃恒温水浴锅中热激活15min,热激活结束后立即放入 0℃~4℃冰水混合浴中迅速冷却至室温。 注:根据生物指示剂总芽孢数适当调整稀释级,建议最终稀释芽孢数在30~300cfu/mL。 取最终稀释的试管,用移液枪吸取1mL菌悬液加入90mm的一次性无菌平皿中,注入15mL ~20mL温度不超过45 ℃融化的胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA),混匀,每稀释级至少制备2个平板。等待平板凝固后,倒置于恒温培养箱中55℃~60℃培养24h~48h,记录各平板的菌落数,并计算每片(支)生物指示剂的总芽孢数。供应生物指示剂芽孢数量泰林生物指示剂的使用简便,适合各种规模的实验室和生产环境。

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湿热灭菌生物指示剂的选型 某灭菌程序的灭菌条件为121℃,12min,能否选择FBio≥12min的生物指示剂? A:?能否选择FBio≥12min的生物指示剂,需知晓该灭菌程序的FPhy值,即使是相同的灭菌参数,不同设备的FPhy的也可能存在较大差异,如脉动真空灭菌器和水浴灭菌器。建议根据《欧洲药典》的要求,选择物理杀灭时间FPhy将指示剂杀灭到10-1~10-3。 灭菌程序1参数为:121℃,8min,FPhy值为13min,选择生物指示剂的D值为1.8min,芽孢数量为2.0×106cfu/支,可以将指示剂完全杀灭。灭菌程序2参数为:121℃,10min,FPhy值=15min,能否使用同一批生物指示剂? A:?本批生物指示剂的FBio经计算为11.3min,推荐应用于FPhy值在13.1~16.7min之间的灭菌程序。灭菌程序FPhy为13min经实验证实可杀灭该批次生物指示剂;灭菌程序2的参数为121℃ 10min的杀灭程序符合将指示剂杀灭到10-1~10-3的要求,可以共同使用该批次生物指示剂。Q3

为什么要使用生物指示剂 使用生物指示剂的原因主要基于其独特的优势和在灭菌效果验证中的重要性 1. 直接反映微生物杀灭能力 微生物的耐受性差异:不同的微生物对灭菌因子(如高温、化学消毒剂等)的耐受性不同。生物指示剂通常选用对灭菌因子具有较强抵抗力的特定微生物(如芽孢菌),这些微生物的耐受性接近甚至高于一些致病菌。因此,如果生物指示剂中的微生物被完全杀灭,可以推断灭菌过程对其他微生物也具有足够的杀灭能力。 模拟实际灭菌对象:在实际灭菌过程中,待灭菌物品可能携带各种微生物,包括一些难以培养或检测的微生物。生物指示剂提供了一种标准化的微生物样本,能够模拟实际灭菌过程中可能存在的微生物情况,从而更准确地评估灭菌效果。 2. 验证灭菌过程的可靠性 物理参数的局限性:只依靠物理参数(如温度、压力、时间等)来判断灭菌效果是不够的。物理参数的监测只能反映灭菌设备的运行状态,但无法直接证明微生物是否被完全杀灭。例如,即使温度和压力达到设定值,但由于设备故障、物品放置不当或灭菌时间不足等原因,仍可能导致灭菌失败。生物指示剂能够直接检测微生物的存活情况,从而验证灭菌过程的实际效果。泰林生物指示剂采用高纯度芽孢,确保灭菌验证的准确性。

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环氧乙烷灭菌生物指示剂芽孢计数注意事项 1、切勿将生物指示剂进行紫外照射消毒,建议对初级包装进行擦拭。 2、环氧乙烷灭菌生物指示剂芽孢计数,建议使用含0.1%聚山梨酯80的无菌纯化水进行稀释。 3、吸取含纸质载体的菌液时,避免纤维堵枪头,导致移液不准确。 4、建议以单片(支)生物指示剂的形式进行计数,确保每片(支)生物指示剂计数结果均符合要求。 5、建议使用玻璃珠(4mm-6mm)对纸质载体进行打散处理。 6、芽孢计数过程中必须进行热激活处理:温度80℃-85℃,时间10min。湿热灭菌参数达标≠成功!泰林生物验证才是关键保障。TAILIN 生物指示剂系列

泰林生物指示剂的芽孢数量经过严格控制,确保每次灭菌验证的可靠性。干热灭菌生物指示剂操作流程

生物指示剂D值测定 D值是灭菌验证的基石,需通过标准方法(存活曲线法)精确测定。 实际应用中需结合Z值、F值等参数,优化灭菌工艺。 质量控制包括菌种标准化、设备校准和数据追溯,确保结果可靠性。 通过科学测定D值,可确保生物指示剂真实反映灭菌效力,为医疗、制药等行业提供无菌保障。 D值测定方法 1. 存活曲线法(Fractional Negative Method) 适用场景:实验室标准测定(如ISO 11138、USP要求)。 步骤: 制备生物指示剂: 使用标准菌株(如嗜热脂肪地芽孢杆菌ATCC 7953),确保初始芽孢量已知(如1×10? CFU/载体)。 设定灭菌条件: 固定温度/压力(如121℃蒸汽灭菌),分多组不同时间处理(如2、4、6、8分钟)。 回收与培养: 灭菌后立即用中和剂(如硫代硫酸钠)终止反应,洗脱芽孢并接种培养。 计数存活菌落: 统计每组存活菌落数(CFU),绘制存活曲线(对数存活量 vs 时间)。干热灭菌生物指示剂操作流程

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