94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例5 以二氧化硅包裹的磁性纳米颗粒提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有15 ul二氧化硅包裹的磁性纳米颗粒的离心管中,混匀后静止15分钟;上磁力架吸附2分钟,吸弃上清液;加入500 ul漂洗液,混匀,上磁力架吸附1分钟,吸弃上清;上海益启生物土壤DNA提取订购方便。浦东新区土壤DNA土壤DNA提取订购
与现有技术相比,本发明技术克服了样品土壤来源的二氧化硅对DNA的吸附,从而减少了不必要的DNA损失,可达到获取高质量、高产量土壤尿液DNA目的。 附图说明 图1是本发明实施例1中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 图2是本发明实施例2中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 图3是本发明实施例3中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 图4是本发明实施例4中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 具体实施方式 下面将结合本发明的附图,对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。宝山区土壤DNA提取联系人在上海益启生物买土壤DNA提取可以退货吗?
调节样本的含水量等因素来优化裂解条件·裂解不充分:增加物理破碎的时间和次数?!ぜ觳橄吹右褐惺欠窦尤胍掖??!は赐巡怀浞郑航ㄒ槎蜗赐言黾硬炕蛱岣呦赐烟寤N侍?:提取的DNA无法扩增怎么办?解决思路:· 检测DNA的浓度:过量的DNA模板也会抑制PCR反应?!ぱ綝NA稀释之后可以扩增:样本中的腐殖酸等抑制物含量高?!と范≒CR反应条件是否已优化:退火温度,时间,引物等等?!し翘匾焯醮合赐岩褐心康腄NA的丰度可能比较低
解决方案应对以上难点?MP Biomedicals:MP有三款试剂盒可供选择。产品:提取方式、裂解介质、样本类型、样本硬度、去杂提纯、操作耗时。FastDNA Spin Kit:玻璃奶法、介质A、植物样本、艰难样本、高效提纯、需一定时间。需一定时间:柱膜法、介质E、微生物样本、较软样本、高效提纯、省时简便。FastDNA Spin Kit for Soil:玻璃奶法、介质E、微生物样本、较软样本、高效提纯、需一定时间。解决方案:解决方案1:当作植物样本看待,选择Fas上海益启生物土壤DNA提取的销售电话。
12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,土壤DNA提取品牌零售代理商家。浙江土壤DNA提取试剂盒土壤DNA提取规格
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取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟; b.最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀; c.将上一步的混合液转移至硅基DNA吸附材料,分离液体和硅基DNA吸附材料; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料; e.用洗脱液洗脱硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR扩增及电泳 将上步纯化的DNA进行PCR扩增,在电泳仪中检测DNA。 本发明具有以下有益效果: 本发明的土壤尿液DNA提取试剂盒及方法,配制好土壤裂解液、结合液、漂洗液、洗脱液,利用特殊成分的土壤裂解液,在加入结合液之前,样品土壤来源的二氧化硅不与DNA结合,离心分离固体颗粒和溶解了DNA的上清液,上清液中加入结合液,混合后转入含有硅基DNA吸附材料中,分离液体和硅基DNA吸附材料,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脱获得纯化DNA;浦东新区土壤DNA土壤DNA提取订购