c ) 用无血清的冷培养基稀释ECM 胶至2 0 μ g/mL ，以5-10μg/cm2的密度加入到细胞小室的上层（按照ECM产品说明书的推荐比例和体积），轻轻摇晃使胶均匀铺在膜上。以上操 作在冰上进行。 d)立即将铺好ECM胶的细胞小室置于培养板中，于37°C孵育1小时，ECM胶可由液体凝成固体，吸走多余的或者未凝的胶。细胞用PBS清洗一次，EDTA或者0.05%胰酶消化，然后用包含5%BSA的无血清培养基中和，1500rpm离心5-10min。用无血清培养基重悬细胞，调整细胞密度至0.5-2.0x106cell/ml。益启生物公司带您了解添加剂详情。嘉定区培养基细胞培养咨询报价

?Guava流式检测 Guava Nexin Reagent目录号4500-0450，早期凋亡检测，Annexin与PI预混，一步完成染色，减少离心步骤，减少细胞损伤导致的假阳性 ?TUNEL法DNA断裂检测 FragEL? DNA Fragmentation Detection Kit, Colorimetric目录号QIA33，晩期凋亡检测，包含阳性和阴性对照，试剂齐全，显色法 ?TUNEL法DNA断裂检测 FragEL? DNA Fragmentation Detection Kit, Fluorescent目录号QIA39，晩期凋亡检测，包含阳性和阴性对照，试剂齐全，荧光法 ?caspase活性检测 Caspase activity detection kit，利用标记了荧光基团AFC或发色基团pNA的底物检测caspase活性，灵敏度高，种类齐全 ?caspase活性***剂 Caspase inhibitor，提供**全种类的caspase***剂，满足不同需求 细胞自噬长宁区培养基细胞培养咨询问价上海益启生物的联系电话。

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每隔2天用电阻仪测量细胞跨膜电阻值，直到达到平台，提示细胞已经形成致密单层；或者通过检测荧光染料荧光黄的通过率，以判断细胞刚好完全汇合。电阻仪测量因不伤害细胞，可以继续培养而比荧光黄法更为普遍地被采用。细胞单层汇合后，用DPBS清洗一次细胞，加入含有不同浓度药物（一般10-200μM）的缓冲液。如果要测药物从上至下的运输效果，则上层小室中加药物，下层培养板孔里只加缓冲液；反之则相反。将培养板在37℃条件下培养（60rpm震荡或者不震荡）1-2h，到达时间之后，分别从细胞小室和培养孔里取出一定 体积缓冲液（一般50μL ）转移至新的转运分析板进行LC/MC分析。对于放射性标记药物，分别取出20μL缓冲液加入100μL闪烁液，通过多孔闪烁读板仪读值。上海益启生物的培养基询价公司电话。

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