取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有石英膜的离心柱中,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;上海益启品牌土壤DNA提取规格。杨浦区土壤DNA提取土壤DNA提取咨询问价
实验的时候,有没有遇到过实验结果不符合预期的情况,提取DNA的纯度过低、浓度达不到预期或者是出现弥散现象。***给大家聊一聊一下其他同学遇到的问题,以及MP技术人员给出的解决方案,希望可以帮到大家,在以后的实验中顺顺利利~问题1:土壤样品含水量过高怎么办?解决思路:· 如果土壤样品过湿,可先将样本10,000 x g,离心30s,尽可能多的去除液体。问题2:DNA产量低怎么办?解决思路:· 样本微生物含量低:【1】增加样本量【2】上海土壤微生物土壤DNA提取订购土壤DNA提取的占地面积小吗?
。如果样品中的目的微生物含有比较厚的细胞壁,可能需要额外的破碎裂解。问题4:洗脱的DNA颜色为黄色或棕色怎么办?解决思路:·腐殖酸含量高【1】在洗涤步骤之前,可先用4.5M-5.5M的异硫氰酸胍溶液洗涤1-2次。【2】减少样本用量。问题5:A260/A280比值偏低怎么办?解决思路:·蛋白去除不干净:增加蛋白沉淀离心的次数。·洗涤不干净:增加洗涤次数。问题6:A260/A280比值高怎么办?解决思路:·RNA含量高,可在洗脱之后的溶液中加
PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例3 以玻璃纤维膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有玻璃纤维的离心柱中,土壤DNA提取的报价具体是多少呢?
直接应用于下游实验。多:完美配合自动化核酸提取仪,实现高通量提取。广:多种环境土壤均能有效提取,适用性广,***匹配市面上大多数核酸提取仪和工作站。安:不使用酚、氯仿等有毒试剂,安全环保。PART.02。多重数据表明提取效果。MagBeads FastDNATM Kit for Soil用于提取不同类型土壤DNA,可直接用于PCR、酶切、测序等下游实验。提取不同类型土壤DNA收率及纯度结果:A260/A280比值在1.7~2.0范围视为提取效果良好,A260/A230比值大于土壤DNA提取哪家靠谱?崇明区土壤微生物DNA土壤DNA提取代理价
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颗粒紧密结合,很难分离,经常会导致菌体裂解不完全,DNA条带弥散;并且土壤中还存在大量抑制剂,如腐殖酸等,导致提取的DNA纯度差,洗脱液有颜色。这些难题,选择MP Biomedicals***产品土壤基因组DNA提取试剂盒——SPINeasy DNA Kit for Soil,帮你轻松解决,让我们看看TA到底有什么神奇之处吧……1.四大绝招攻克土壤样本DNA提取难题。产品名称:SPINeasy DNA Kit for Soil、SPINeasy DNA Kit for Soil (Sample) 5 preps。包装规格:50 preps、5p杨浦区土壤DNA提取土壤DNA提取咨询问价